显微镜血涂片及手工草酸胺法在血小板减少患者结果复核中的应用

侯蒙

近年来，随着科技的发展与应用，各类全自动化监测仪器不断更新，监测性能与标本检验质量密切相关，而稳定的检测系统是确保检验质量的基础。目前，血液分析仪是实验室常用检测仪器，BC-6900全自动血液分析仪是深圳迈瑞公司生产的高精密血液检测仪器之一，分为体液、血液2种模式，可对血常规进行有效检测[1]。临床实践发现，目前多数全自动血液分析仪以电阻抗法原理对血小板进行检测，根据脉冲信号强弱对血小板数值进行归类收集，在临床应用中具有重要价值[2]。对于肿瘤化疗、需血小板输注或血小板减少患者而言，血小板计数尤为重要，可直接为临床诊断、治疗方案选择提供指导依据，故血液分析仪检测结果准确性尤为重要[3]。鉴于此，本研究选取血小板减少患者178例，探究显微镜血涂片、手工草酸胺法在迈瑞BC-6900全自动血液分析仪血小板结果复核中的应用效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 经医院医学伦理委员会审批，选取我院2017年7月至2019年7月收治的血小板减少患者178例，其中男98例，女80例；年龄22～74岁，平均年龄(45.69±8.55)岁；病因：遗传性疾病69例，获得性疾病109例；合并症：高血压36例，糖尿病25例，慢阻肺13例。

1.2 选例标准

1.2.1 纳入标准 血液中血小板计数＜100×109/L；轻者表现为皮肤淤斑、出血点，鼻衄、牙龈渗血，严重者表现为黑便、呕血、脑出血及血尿；签署本研究知情同意书。

1.2.2 排除标准 血液采集依从性差者；血液标本存放不合格者。

1.3 方法

1.3.1 仪器与试剂 BC-6900全自动血液分析仪(产自深圳迈瑞软件技术有限公司)、SC-120全自动推片染色机(产自深圳迈瑞软件技术有限公司)、olympus内置光源显微镜(产自北京普瑞赛司仪器有限公司)。

1.3.2 样本采集 根据世界卫生组织《静脉采血的最佳操作》标准，采集178 例患者肘静脉血，EDTA-K2抗凝。

1.3.3 检测方法 BC-6900全自动血液分析仪：校准品校准仪器，重复10次，取其平均值，计算红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)空白计数相对偏倚，相对偏倚＝(均值-靶值)/靶值×100%；采用鞘流阻抗法对红细胞对应电脉冲个数进行测量，获取血小板数目；利用血小板直方图，获取血小板各种参数；光学法纠正血小板计数；显微镜血涂片：利用SC-120全自动推片染色机，45°制成3张符合质控标准血涂片，由高资历经验丰富血液科检验师进行血小板形态观察与结果估测，将显微镜血涂片作为参照，与全自动血液分析仪结果进行一致性分析；手工草酸胺法：血小板计数根据第三版《全国临床检验操作规程》进行操作，并以手工草酸胺法为参照，与全自动血液分析仪结果进行一致性分析。

1.4 观察指标 观察迈瑞BC-6900全自动血液分析仪准确度试验结果；分析显微镜血涂片、手工草酸胺法与迈瑞BC-6900全自动血液分析仪一致性。

1.5 统计学方法 采用SPSS 24.0 软件进行分析，一致性采用Kappa检验，P＜0.05即差异有统计学意义。

2 结果

2.1 迈瑞BC-6900全自动血液分析仪准确度试验结果(表1) RBC、WBC、Hb、PLT 4个检测项目相对偏倚符合检测行业标准。

表1 迈瑞BC-6900全自动血液分析仪准确度试验结果

2.2 一致性分析 将显微镜血涂片、手工草酸胺法血小板计数分别与迈瑞BC-6900全自动血液分析仪进行比较，显微镜血涂片与血液分析仪差值均数为7.04×109/L，差值标准差为12.38×109/L，95%范围(7.04±1.89)×12.38×109/L；手工草酸胺法与血液分析仪差值均数为2.15×109/L，差值标准差为12.98×109/L，95%范围(2.15 ±1.89)×12.98×109/L；显微镜血涂片与手工草酸胺法差值标准差为6.41×109/L，差值标准差为11.91×109/L，95%范围(6.41±1.89)×11.91×109/L，显微镜血涂片、手工草酸胺法与迈瑞BC-6900全自动血液分析仪血小板计数具有良好一致性。

3 讨论

血小板减少是指血液中PLT＜100×109/L，多见于血液性疾病、放化疗损伤、风湿免疫病、药物相关血小板减少等[4]。目前，临床主要通过病因治疗，并及时进行血小板输注支持，而准确检测PLT对临床对症治疗具有重要指导意义。

目前，PLT作为血液分析常规项目，主要采用血液分析仪检测，BC-6900全自动血液分析仪是利用荧光技术、激光流式细胞术，将血液中各细胞、细胞中核酸含量通过荧光强度表现出来，并结合细胞内信息或细胞体积进一步区分细胞类型，提高血液中原始细胞与幼稚细胞检测准确度及精准识别度，有助于血液系统疾病早发现、及时对症治疗[5]。临床工作中，为确保检验质量，在新仪器使用前，需进行系统检测，评估并检验系统基本性能指标，以保证各项性能指标符合临床检验使用要求[6]。本研究发现，迈瑞BC-6900全自动血液分析仪对RBC、WBC、Hb、PLT 4个检测项目相对偏倚均符合检测行业标准，表明迈瑞BC-6900全自动血液分析仪检测系统性能指标符合临床标准，可用于常规检测工作。研究发现，全自动血液分析仪对PLT检测存在一定不足，对血小板减少，尤其是极低值血小板标本，难以准确反映血小板真实数目，为确保检测准确性，需结合其他方式对其结果进行复核[7]。相关研究报道，显微镜血涂片、手工草酸胺法与细胞成像系统进行血小板计数具有良好一致性[8]。显微镜血涂片是血液细胞学检查基本方法，对各种血液疾病诊断存在较大价值，通过显微镜观察可有效估测血小板数量，显微镜下可见纤维蛋白丝、巨大血小板、血小板假性聚集等，采用此法可及时纠正全自动血液分析仪血小板计数，确保获取真实血小板结果[9]。手工草酸胺法是国际通用血小板计数方法，但需排除EDTA依赖性假性血小板减少症，且此方法结合显微镜血涂片观察可提升检测血小板减少标本结果准确性，为全自动血液分析仪检测结果提供重要补充[10]。本研究发现，显微镜血涂片、手工草酸胺法与迈瑞BC-6900全自动血液分析仪血小板计数具有良好一致性，可见显微镜血涂片、手工草酸胺法可用于全自动血液分析仪血小板结果复核，对提高检测结果准确性具有重要作用。

综上所述，显微镜血涂片、手工草酸胺法与迈瑞BC-6900全自动血液分析血小板结果具有良好一致性，可用于血小板结果复核，临床应用中具有重要价值。