类风湿关节炎患者血清IgG及亚类的水平和临床意义

翁默寒，王凤超，丁淑琴，张伦军，朱安友

蚌埠医学院第一附属医院检验科，安徽蚌埠 233004

类风湿关节炎(RA)是一种临床常见的自身免疫病，以慢性关节炎为主要特征，易反复发作,并可导致关节畸形甚至残疾。RA患者血清中常出现类风湿因子(RF)和抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)等自身抗体，这些自身抗体大部分属于IgG。人IgG根据其分子重链(γ链)抗原性差异及二硫键数目和位置的不同，可分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4 4个亚类。近年来，IgG亚类在相关疾病中的作用逐渐得到关注和重视[1-3]。本研究通过检测RA患者血清IgG及亚类水平，并与血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)、RF及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体等指标进行相关性分析，探讨IgG亚类在RA中的临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2018年10月至2019年6月本院风湿免疫科收治并确诊的RA患者54例纳入RA组，其中男14例、女40例，年龄36～78岁、平均(59.09±10.71)岁。所有患者均符合2010年美国风湿学会/欧洲防治风湿病联盟关于RA的诊断标准，并且患者近3个月内未接受糖皮质激素、抗感染等药物治疗。排除标准：(1)非RA的其他自身免疫病患者；(2)合并严重心肺、肝肾功能不全者；(3)关节畸形、其他关节炎患者；(4)合并急、慢性感染性疾病患者；(5)合并肿瘤患者；(6)妊娠期和哺乳期女性。另选择同期本院健康体检者36例纳入对照组，其中男9例、女27例，年龄43～76岁、平均(58.06±8.73)岁。两组研究对象年龄、性别之间差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 RA组患者于门诊就诊或入院时采集空腹静脉血,对照组健康体检者于体检时采集空腹静脉血，3 000 r/min离心10 min，分离血清备用。采用双抗体夹心法ELISA检测IgG1、IgG2、IgG3和IgG4，试剂由eBioscience公司提供，iMark酶标仪为Bio-Rad公司产品；采用贝克曼库尔特公司IMMAGE800特定蛋白分析仪(免疫散射比浊法)检测免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)和RF，试剂由贝克曼库尔特公司提供；采用BioPlex2200全自动流式点阵免疫发光分析仪检测抗CCP抗体，试剂为美国伯乐公司产品。各项观察指标的检测均严格按照仪器操作规程和试剂盒说明书进行操作。

2 结 果

2.1RA组与对照组血清免疫球蛋白、补体、RF及抗CCP抗体水平比较 RA组血清IgG、IgA、RF和抗CCP抗体水平显著高于对照组(P<0.05)，但IgM、C3和C4水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组血清免疫球蛋白、补体、RF、抗CCP抗体水平比较[M(P25,P75)]

注：-表示仪器最低检测限为20 IU/mL，故未得出结果。

2.2RA组与对照组血清IgG亚类水平比较 RA组血清IgG1和IgG3水平显著高于对照组(P<0.05)，两组间IgG2和IgG4水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3RA组与对照组血清IgG各亚类/IgG比值比较 RA组血清IgG1/IgG和IgG3/IgG显著高于对照组(P<0.05)，而IgG2/IgG显著低于对照组(P<0.05)；两组间IgG4/IgG差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

2.4相关性分析 Spearman相关分析结果显示，RA组患者血清IgG1水平与IgG呈高度正相关(r=0.865,P<0.05)；IgG2、IgG3水平与IgG均呈中度正相关(r=0.613、0.644，P<0.05)；IgG4水平与IgG呈低度正相关(r=0.271,P<0.05)；IgG2水平与IgA呈低度正相关(r=0.399,P<0.05)；IgG3水平与IgM呈低度正相关(r=0.343,P<0.05)。IgG各亚类水平与RF、抗CCP抗体之间均无相关性(P>0.05)。见表4。

表2 两组血清IgG亚类水平比较[M(P25,P75),g/L]

表3 两组血清IgG各亚类/IgG比值比较

表4 RA组血清IgG各亚类水平与IgG、IgA、IgM、C3、C4、RF、抗CCP抗体的相关性分析

3 讨 论

RA是一种常见的高发病率、高致残率系统性自身免疫性疾病，其具体病因尚不明确，可能与感染、内分泌失调、免疫失调和遗传等因素有关。细胞免疫与体液免疫参与RA的生理病理过程，体液免疫中的相关免疫指标检测对RA诊断具有重要意义。

IgG、IgA和IgM是体液免疫的重要组成部分，IgG、IgA和IgM水平升高可引起一系列免疫反应，导致组织损伤，并直接参与RA的发病。诸多研究报道，RA患者血清IgG、IgA和IgM水平均显著升高，而且其水平变化与RA病情活动有关[4-6]。本研究中，RA患者血清IgG和IgA水平均高于健康人群(P<0.05)，IgM水平差异无统计学意义(P>0.05)。也有研究发现，RA患者只有血清IgG水平显著升高，而IgA和IgM水平与健康人群比较，差异无统计学意义(P>0.05)[7]，提示血清IgG水平可以作为反映RA患者病情进展的一个客观指标。

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，也是二次免疫反应的主要抗体，具有很高的亲和力。人IgG有4个亚类，其在血清中水平为IgG1>IgG2>IgG3>IgG4。IgG亚类均以单体形式存在，并具有高度的结构相似性，但彼此之间的细小差异赋予了IgG亚类各自独特的生物学功能。IgG1和IgG3能强有力地活化补体经典途径，主要产生于病毒和蛋白抗原引起的免疫反应；IgG2可以启动补体旁路活化途径，主要见于多糖抗原引起的免疫反应；而IgG4主要参与线虫引起的免疫反应和慢性抗原刺激反应。

有研究显示，IgG亚类水平异常与自身免疫病有关。原发性干燥综合征(pSS)患者血清IgG1、IgG2和IgG3水平显著升高，IgG4水平显著降低；IgG3水平与pSS疾病分期呈正相关[8]。还有研究发现，Graves病患者的IgG1水平较对照者显著升高，IgG2水平也较对照者升高，但差异无统计学意义(P>0.05)；IgG3和IgG4水平明显下降；血清IgG1与甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、促甲状腺激素受体刺激性抗体(TSAb)、促甲状腺激素受体刺激阻断性抗体(TSBAb)这4种甲状腺自身抗体之间无显著相关性[9]。邸平等[10]研究显示，自身免疫性胰腺炎组、腹膜后纤维化组、健康对照组间血清IgG1、IgG3水平差异均无统计学意义(P>0.05)，自身免疫性胰腺炎组血清IgG4水平显著升高(P<0.05)，而且该研究者认为IgG4可用于自身免疫性胰腺炎与急慢性胰腺炎、胰腺癌和胆管癌等相似疾病的鉴别诊断。

本研究结果显示，RA组患者血清IgG1和IgG3水平显著增加，并且IgG1/IgG和IgG3/IgG显著高于对照组，说明RA患者血清中存在IgG亚类水平异常，这与ENGELHART等[11]的研究结果基本一致。但LIN等[12]的研究结果显示，RA患者血清4种IgG亚类水平均显著升高。而ENGELMANN等[13]研究结果显示，RA患者血清针对瓜氨酸抗原的两个抗体主要是IgG1和IgG4。研究结果的差异可能与入选的病例不同有关。

相关性分析结果显示，RA患者血清IgG各亚类与IgG之间均呈正相关，IgG2与IgA之间呈正相关，IgG3与IgM之间也呈正相关。提示血清IgG亚类水平可能和免疫球蛋白一样，在判断RA病情进展方面具有重要价值。也有研究显示，成人IgG亚类水平与免疫球蛋白及炎症指标之间也存在一定相关性[14]。RF和抗CCP抗体是诊断RA常用的血清学指标，RF诊断RA的敏感性较高，但特异性较差，而抗CCP抗体是RA早期诊断敏感性及特异性均较高的指标[15-16]。本研究结果显示，RA患者血清IgG各亚类与RF和抗CCP抗体之间均无相关性，提示IgG亚类检测对于RA的诊断价值有限。有研究表明，与抗CCP抗体单独检测相比，抗CCP抗体与IgG各亚类联合检测对RA的早期诊断价值并无明显提升[17]。

综上所述，RA患者血清IgG水平显著升高，并且存在IgG亚类水平变化，以IgG1和IgG3升高为主。IgG亚类对于RA早期诊断价值有限，对判断RA病情进展方面有一定意义。