HCO3-在不同检测仪器中测定结果的相关性及在静脉血中的稳定性分析

张 磊，朱 艳，冉娅琼，杨月娇

重庆医科大学附属第一医院医学检验科，重庆 400016

血清二氧化碳总量包含碳酸氢根离子(HCO3-)、H2CO3、CO32-和游离的CO2。临床实验室通过检测HCO3-来反映血清总二氧化碳的含量，评估酸碱平衡。血气分析仪和生化分析仪是两种不同性质和类别的仪器，可用于检测不同类别标本中的HCO3-水平[1-2]。血气分析仪对动脉血进行检测，但动脉血采集比较困难，对采样人员技术要求高，创伤大，不易被患者接受，而生化分析仪采用静脉血进行检测，采集标本容易，创伤小，易被患者接受。因此，临床检测HCO3-时通常以静脉血为主。而在临床实际工作中，临床医生发现血清HCO3-检测值常低于临床预期。为了探讨血气分析仪和生化分析仪这两种不同性质和类别的仪器检测不同类别标本中HCO3-结果是否存在差异性及相关性，以及标本放置时间对血清HCO3-检测结果的影响，本课题组设计并进行此项研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 随机收集2016年9-12月在本院呼吸内科就诊的患者70例，其中男38例，年龄45～84岁，中位年龄56.5岁；女32例，年龄44～83岁，中位年龄52.9岁。

1.2仪器与试剂 GM3000血气分析仪(以下简称GM3000)购自AVL公司，试剂批号：20160319；VITROS4600全自动生化分析仪(以下简称VITROS4600)、原装试剂盒、定标物及质控品购自强生公司；肝素抗凝液 (6 250 U/mL)、真空采血管及采血针均由重庆开奇有限公司生产。其他检测仪器还包括7600-020全自动生化分析仪(日本日立，以下简称7600-020)；检测试剂还包括血清CO2测定试剂盒(四川迈克)。

1.3方法

1.3.1GM3000和VITROS4600同时检测HCO3-70例研究对象均用动脉血采集专用注射器采集动脉血1～2 mL，密封后充分混匀迅速送检。70例研究对象于1 h内采集静脉血3～4 mL，静置凝固后离心分离出血清。GM3000和VITROS4600室内质控结果在控情况下，分别检测动脉血和静脉血中HCO3-水平，所有操作均严格按照仪器操作规程进行。

1.3.2试剂开瓶稳定性验证 高、低两个水平的质控品复溶后分装，置于-20 ℃冰箱内封口保存，7600-020每天检测HCO3-水平，连续检测10 d。检测过程使用同一瓶试剂，试剂于敞口仪器内4 ℃保存，计算连续10 d HCO3-检测结果的精密度，以CV值表示精密度大小。

1.3.3仪器精密度验证 两个水平的质控品复溶后分装，置于-20 ℃冰箱内封口保存，每天检测1次，连续检测20 d，以CV值表示精密度大小。以上检测使用同一批号但不同盒的试剂。

1.3.4标本稳定性检测 随机收集70例患者中的20份静脉血标本，于室温下分别在30、60、120、240 min时检测血清标本的HCO3-水平。检测过程使用同一批号的试剂。以上检测，每份标本均检测3次，取平均值。以30 min时的检测结果为参考标准，计算其他时间点检测结果的偏差。

2 结 果

2.1两种仪器检测不同类型标本中HCO3-结果的差异性与相关性分析 GM3000检测的70例患者动脉血中HCO3-水平为(29.6±7.6)mmol/L，VITROS4600的检测结果为(27.7±5.6)mmol/L，略低于GM3000的检测结果，但二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示，两台仪器所检测的HCO3-水平之间具有相关性(r=0.956，P<0.05)，回归方程为Y=1.3X-6.6(R2=0.914)。见图1。

图1 两种仪器检测不同类型标本中HCO3-结果的相关性分析

2.2试剂稳定性分析

2.2.1仪器精密度验证 7600-020检测高、低两个水平质控品的HCO3-批内CV%分别为1.43%和1.55%，批间CV%分别为4.10%和3.85%，满足试剂说明书提供的批内CV%要求(<8.00%)及批间CV%要求(<10.00%)。见图2。

注：A为批内结果；B为批间结果。

图2 HCO3-的批内精密度和批间精密度验证

2.2.2试剂开瓶稳定性验证 7600-020用同一瓶试剂连续10 d检测两个水平质控品的HCO3-，CV%分别为3.8%、3.5%，小于试剂说明书可接受标准(±5.0%)。见图3。

图3 HCO3-的试剂开瓶稳定性验证

2.3标本稳定性检测 以30 min时检测的HCO3-水平作为参考标准，在室温下保存60 min时，检测结果下降了5.1%；保存120 min时，结果下降了8.8%；保存240 min时，结果下降了10.0%。随着标本放置时间的延长，HCO3-水平呈逐渐下降趋势，不同时间点(60、120、240 min)的检测结果与30 min时的检测结果比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

临床上常要求用动脉血作为血气分析标本，因为标本的采集和处理对分析结果影响较大，而且动脉血的采集易给患者带来疼痛、操作后易留下创伤，故对采血人员的要求较高。全血采集后血细胞继续进行代谢，O2不断被消耗，CO2不断产生，故应尽可能在短时间内进行检测。从本研究结果可以看出，采用静脉血检测的HCO3-水平与动脉血的检测结果之间具有良好的相关性。静脉血标本采集简便，采血后的创伤小，在动脉血检测仪器出现故障时，可以替换使用，避免检验报告的延误[3]。对于需要连续监测的患者，可通过检测静脉血中HCO3-水平来帮助临床判断患者体内是否存在酸碱失衡[4]。

标本检测从前处理到报告完成，有很多因素影响检测结果的准确性[5]。有报道指出，前处理时标本HCO3-水平降低是因为试剂暴露在空气中，试剂中的磷酸烯醇式丙酮酸与空气中的CO2反应导致检测值降低[6]。本研究结果表明，标本放置时间明显影响HCO3-的检测结果，与以上报道结论一致。同时，在同样的保存时间，标本的保存方式和保存温度对检测结果也有较大的影响[7]。在临床工作中，由于标本量大，临床标本离心开盖后在生化分析仪上等待检测时间较长，标本暴露于空气中，会导致检测结果低于实际值。有学者指出，将标本放置冰箱中冷藏，检测时再取出可以达到减少降解的目的[6]，但该方法较难实现，现阶段只能采样后在尽可能短的时间内进行检测。Westgard给出的HCO3-生物学变异的最佳变异系数为2.6%[8]，实验室通常以5.0%为标准。但室温敞口状态下，60 min时血清HCO3-水平下降已超过5.0%，而实际工作中，在60 min内难以完成所有的标本检测。为了有效解决标本放置时间对HCO3-检测结果的影响，提高检测结果的准确性，笔者建议单独抽血并选用稳定性较高的电极法对血清HCO3-水平进行检测[9]。