探讨无创DNA检测和羊水细胞染色体检查的意义

龙冠现

【关键字】孕妇；无创DNA检测；羊水细胞；染色体；诊断；胎儿

近年来，我国出生缺陷率具有升高的趋势，发病率可达6%，出生缺陷不仅会对婴幼儿的生命以及生活质量造成严重影响，还会为家庭以及社会带来严重的经济负担，因此进行产前诊断工作意义重大。当前，羊水细胞培养是孕妇产前诊断的主要方法，因具有较高的准确率，也被称为是产前诊断的金标准，但该诊断方式的不足之处在于需要对孕妇穿刺取样，存在着较大的风险，且所用时间较长，容易为孕妇带来较大的心理压力，因此采用非侵入性的诊断方式进行产前诊断意义重大[1-2]。无创产前基因检测是分析胎儿染色体非整倍体异常的一项技术，近年来得到较好的应用，该方式对于检测染色体异常具有较高的准确性[3]。本次研究以100例孕妇作为研究对象，分析无创DNA检测和羊水细胞染色体检查对孕妇的应用价值，详细情况如下。

1 对象和方法

1.1 对象

将 2018年1月—2019年1月期间我院收治的100例孕妇作为研究对象，年龄范围为35～46岁，平均年龄为（38.4±9.7）岁，平均孕周为（20.7±3.2）周，孕妇均具有高龄，具有出生缺陷生育史和产前筛查高风险等特点，所有孕妇均知情并同意本次研究，我院伦理委员会已批准。

1.2 方法

无创DNA检测；在取得孕妇同意之后，抽取5 mL静脉血于抗凝管之中，放置在4℃的温度下保存，采血后的4 h内，进行离心处理，离心后将血浆放置-80℃保存，提取血浆中游离的DNA，PCR扩增，获得对应样本DNA文库，采用生物信息学对测序的结果进行分析。

羊水细胞染色体检查；在超声引导下，经腹壁穿刺抽取羊水30 mL并将其放置于无菌BD管中保存，实验室中细胞培养，制片对染色体核型进行分析。

1.3 观察指标

对比两种检查方式的检出率。

1.4 统计学分析

将数据纳入SPSS 18.0软件中分析，使用χ2和百分比表示计数资料，P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果

100例患者中共计10例患者染色体异常，羊水细胞染色体检查检出率为100%（10/10），无创DNA检测检出率为90%（9/10），两种检测方式无统计学意义（P＞0.05），详见表1。

3 讨论

因我国人口基数大，出生缺陷发病率也较高，曾有相关数据表明，我国每年先天性致残和致缺陷人数约为出生总人口数的6%，且近年来，该比例具有不断增加的趋势，在各种缺陷性疾病之中，染色体病变的发生率最高[4]。胎儿染色体异常是最为严重的一种先天性疾病，常见的遗传疾病有13-三体、18-三体、21-三体以及TURNER综合征等，对孕妇进行产前诊断对于降低染色体异常发生率意义重大，尽早发现胎儿严重结构异常和染色体异常不仅可以降低患者家庭负担和社会压力，还可避免孕妇受到严重的身心伤害。当前，多数地区产前诊断主要是采用血清学方法来筛查胎儿染色体机构异常，若存在异常情况，则利用超声或者羊水穿刺对患者进行进一步诊断，从而使缺陷儿的出生率得到降低，但该种方式对孕妇的影响较大，不利于孕妇身心健康[5-6]。传统对于高危孕妇的筛查方式主要有羊膜腔穿刺取样，绒毛穿刺取样等，但上述诊断方式均属于侵入性的操作，对于孕妇和胎儿均具有不同程度的影响，以往，对于高风险孕妇主要采用羊水穿刺进行诊断，但其具有较高的风险性，可能导致孕妇出现流产的可能，为孕妇带来严重的心理负担和精神压力。

当前产前诊断有创技术已经发展的较为成熟，但对患者进行有创检查时可能存在着较大的风险性，在采取标本的过程中可能会导致胎儿出现心动过缓，流产以及早产等情况发生，此外，羊水穿刺检查会在一定程度增加孕妇的心理负担和精神压力，导致其依从性不高，对胎儿染色体异常征象的筛查具有一定的缺陷[7]。无创基因检测属于一种新型的产前诊断方式，具有无创，便捷等优势，检测时，仅需采集患者5 mL静脉血即可，在一定程度上减少了羊水穿刺的步骤，降低了患者流产的风险，缓解了孕妇的心理压力，该诊断方式的目的主要是提高产前诊断准确率，减少孕妇的诊断风险。该诊断方式主要是利用大规模的平行测序技术对母体外周血中游离的DNA进行深度测序，从而取得胎儿染色体的关键信息[8-10]。研究报道，孕妇在第4周便可以检测到胎儿游离的DNA，在妊娠7周之后，检测结果的准确率更高，可尽早的得出有关胎儿DNA水平的状态，且具有含量高，半衰周期短，提取方便等显著优势，因此属于有效、无创、简单的一种诊断方式。通常在对患者进行详细的介绍后，家属和孕妇均会配合检测，基本无拒绝和不理解的情况，由此也证明，无创DNA基因检测技术与侵入性检查相比较，更容易被患者及家属认可和接受。但就目前而言，该诊断依旧具有一定的不足，如该方式不适用于孕妇自身具有染色体异常的情况，不可用于多胎孕妇；无法准确检测出重复，倒位以及移位等染色体异常疾病；孕妇外周血中cffDNA浓度是影响该检查结果的重要指标，若浓度过低可能会影响诊断结果的准确性[11-13]。

在本次研究中，无创DNA检测与羊水细胞染色体检查的准确率具有较高的一致性，数据对比无统计学意义。表明无创DNA检测可作为产前检查的重要手段，具有安全性高，无创以及准确率高等显著优势，更容易被孕妇所接受，在降低出生缺陷率等方面发挥着重要作用。但在临床中，无创DNA检测并不能完全取代羊水穿刺检查，临床应将其作为一种辅助手段，对于检测结果提示异常的患者，应建议孕妇进行羊水穿刺诊断，保证诊断准确率，避免误诊和漏诊情况的发生。

表1 两种检查方式的检出率对比

综上所述，对孕妇采用无创DNA检测具有较高的准确率，使用价值高，值得在临床进一步推广使用。