何书平
【摘要】目的:为测定饮片厂采购三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量,以三七为研究对象,用高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量。方法:色谱柱为C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为203nm。结果:结果表明,三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷Rl的含量符合2015年版《中国药典》标准。
【关键词】三七;人参皂苷Rb1;人参皂苷Rg1;三七皂苷R1;水分测定;含量测定;高效液相色谱法
【中图分类号】R286.0;0657.72 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714(2020)01-0141-02
三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen的干燥根和根茎。性温,味甘、微苦。归肝、胃经。散瘀止血,消肿定痛。三七是文山的道地药材,俗称“金不换”,皂苷类成份是三七的主要活性成分。自上世纪40年代开始,国内外对三七进行的广泛研究,发现其可降血压、调血脂、改善心肌缺血等多方面的药理作用,目前被广泛应用于临床。
三七粉末(过四号筛)。
1.1实验仪器
Aglient高效液相色谱仪、101-1-S-Ⅱ型电热恒温鼓风干燥箱、称量瓶、BS/BT系列电子天平
1.2试剂
人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、甲醇(色普纯)、乙腈(色谱纯)、纯化水
2.1水分测定
三七水分测定用2015年版《中国药典》0832水分测定法第二法(烘干法),取供试品2-5g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,精密称定,开启瓶盖在100~105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,放冷30分钟,精密称定,再在上述温度干燥1小时,放冷,称重,至连续两次称重的差异不超过Smg为止。根据减失的重量,计算供试品中含水量(%)。
2.2色谱条件与系统适用性试验
色谱柱为C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为203nm。
对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品适量,加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rb10.4mg、人参皂苷Rg10.4mg、三七皂苷R19.1mg的混合溶液,即得。
供试品制备:取2份三七粉末(过四号筛)约0.6g,精密称定,精密加入甲醇50ml,称定重量,放置过夜,置80℃水浴上保持微沸2小时,放冷,在称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定方法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪测定。
3.1水分测定结果
3.2人参皂苷Rh1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品色谱图、三七样品色谱图(图1、2)
圖1 人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品色谱图
图2 三七样品色谱图
3.3含量结果
测量对照品溶液和供试品溶液中待测物质的峰面积,按下式计算含量:含量(CX=CR×AX/AR,见表1、表2。
本次实验对中药饮片厂采购三七对照2015年版《中国药典》,用HPLC法对其进行含量测定,按干燥品计算,含人参皂苷Rg1(C42H72014)、人参皂苷Rb1(C54H92033)、三七皂苷R1(C47H80018)总量不得少于5.0%。收购三七符合药典规定的含量,保证饮片的安全发放。