口腔清洁护理用品 牙膏中赤藓糖醇含量的测定高效液相色谱法

前言

本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。

本标准由中国轻工业联合会提出。

本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会(SAC/TC492/SC1)归口。

本标准起草单位：上海美加净日化有限公司、福建爱洁丽日化有限公司、苏州市金茂日用化学品有限公司、广州质量监督检测研究院、国家轻工业牙膏蜡制品质量监督检测中心。

本标准主要起草人： 施裔磊、黄强、陈健芬、郭长虹、刘金峰。

本标准为首次发布。

1 范围

本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中赤藓糖醇含量的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。

本标准适用于牙膏、漱口水等口腔清洁护理用品中赤藓糖醇含量的测定。

本标准赤藓糖醇的检出浓度为0.01mg/mL，定量浓度为0.03mg /mL。若取5.0g样品，赤藓糖醇的检出限为200mg/kg，定量限为600mg/kg。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 方法要点

将牙膏用水分散，超声波提取其中的赤藓糖醇成分，然后离心分离并过滤处理，滤液用带示差折光检测器的高效液相色谱仪分析测定，外标法通过峰面积进行定量计算。

4 试剂与标准物质

4.1 除非另有说明，所用试剂均为分析纯的试剂，水为符合GB/T 6682规定的一级水。

4.2 赤藓糖醇对照品

纯度不小于99%。

4.3 乙腈

HPLC级。

4.4 有机相滤膜

0.45μm 。

4.5 水相滤膜

0.45μm。

4.6 标准储备液

称取赤藓糖醇对照品200mg(精确至0.000 1g)，用水溶解并定容至100mL，摇匀，配制成作为含赤藓糖醇2.0mg/mL的标准储备液。

4.7 标准工作液

将标准储备液用水逐级稀释，配制成浓度为0.05 mg/mL，0.1 mg/mL，0.2 mg/mL，0.4 mg/mL，0.5 mg/mL，1.00mg/mL，2.00mg/mL的标准工作液。

5 仪器

5.1 高效液相色谱仪：配示差折光检测器。

5.2 氨基色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)及配套保护柱(4.0mm×10mm，5μm)，或相当的色谱柱。

5.3 磁力搅拌器。

5.4 超声波清洗器：工作频率≥35kHz，功率≥200W。

5.5 离心机：转速≥4 000r/min。

5.6 分析天平：精度0.000 1g。

6 分析步骤

6.1 试样处理

牙膏试样：先挤去大约20mm，再称取5g(精确至0.000 1g)试样于100mL烧杯中，用约80mL水溶解，磁力搅拌至牙膏分散均匀，超声提取10min后，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度。摇匀后，将试样溶液转移至50mL离心管中，4 000r/min以上离心分离10min。冷却至室温后，上清液经0.45μm水相滤膜过滤，备用。

漱口水试样：称取5g(精确至0.000 1g)试样于100mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度。摇匀后，上清液经0.45μm水相滤膜过滤，备用。

6.2 测定

6.2.1 色谱条件参考

按照表1设定液相色谱条件。

表1 液相色谱条件

6.2.2 流动相

乙腈和水按750:250的体积比混合均匀后，经0.45μm有机相滤膜过滤，并超声脱气10min。

6.2.3 标准工作曲线

准确吸取4.7制备的标准工作液20μL，分别注入高效液相色谱仪，按照6.2.1的色谱条件进行测定，以赤藓糖醇的浓度为x轴，其相应的峰面积为y轴，绘制标准工作曲线。

赤藓糖醇标准溶液的液相色谱图，参照附录中的图A.1。

6.2.4 测定

准确吸取20μL经6.1处理的试样溶液，注入高效液相色谱仪测定赤藓糖醇的峰面积，由标准工作曲线找出试样溶液中赤藓糖醇的浓度。

试样溶液的液相色谱图，参照附录A中的图A.2。

7 结果计算

样品中赤藓糖醇的含量X(mg/kg)按式(1)计算：

(1)

式中：X——试样中赤藓糖醇的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

c——试样溶液中对应的赤藓糖醇的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

V——试样定容体积，单位为毫升(mL)；

m——试样的质量，单位为克(g)；

N——稀释倍数；

K——对照品中赤藓糖醇的纯度。

8 回收率

赤藓糖醇在添加浓度10mg/g～40mg/g范围内，本标准方法的回收率在95.7%～103.8%之间。

9 标准偏差

本标准方法的相对标准偏差小于5%(n=6)。

10 允许差

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算数平均值的10%，取其算数平均值作为测定结果。

附 录A

(资料性附录)

液相色谱参考谱图

图A.1 对照品液相色谱图

图A.2 牙膏试样液相色谱图