抗AB对ABO血型效价及新生儿溶血病的影响

曹明鹏 杨 劲 何安华 李尊严 赵 震 田 丰

O型孕妇常需在16～28 周检测IgG抗体效价来预判新生儿出生后是否会患有新生儿溶血病，是因孕妇与体内婴儿ABO血型若不合，孕妇体内的特异性IgG抗体可通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿血循环中的红细胞发生反应，特异性结合在胎儿红细胞表面，致敏的红细胞在胎儿脾脏被巨噬细胞吞噬，破坏，从而导致新生儿黄疸、贫血、水肿、肝脏肿大，甚至死亡等溶血性症状[1]。抗AB是O型孕妇血清中区别抗A和抗B的另一种抗体，现被认为是一种交叉反应性抗体[2]。O型孕妇体内IgG抗AB抗体在IgG抗A、抗B抗体效价检测时也会被包含其中，但其作用尚不明确。笔者通过对比32 例O型的孕妇体内IgG抗AB抗体的变化，分析抗AB效价与新生儿溶血病的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2018年5月1日-2019年1月31日来我院临床产科门诊产前检查中16～28周O型孕妇其丈夫为非O型，进行ABO血型效价检测。其中RhD均为阳性，不规则抗体检测均为阴性。

1.2 仪器与试剂 0.2 mol/L 2-巯基乙醇，A/B型RhD(+)献血员压积红细胞（自制），0.5%标准A1/B型RhD(+)悬浮红细胞（上海血液生物医药有限责任公司）、长春博迅微柱凝胶检测系统（包涵卡式离心机，恒温孵育器，微柱凝胶卡等），37 ℃水浴箱。

1.3 检测方法 采用2-巯基乙醇裂解，37 ℃吸收微柱凝胶法。主要步骤如下：①2-巯基乙醇裂解：取2.5 mLO型孕妇血清于试管中，再加入等量的2-巯基乙醇，混匀后密封置于37 ℃温浴箱中1 h。②解封：1 h后将试管从水浴箱取出并解封，并使其在空气中静置10 min，使2-巯基乙醇挥发干净。③IgG抗A、抗B抗体效价检测：取出1.5 mL裂解后的O型孕妇血清，倍比稀释后在微柱凝胶卡中分别加入50 微升AB型丈夫0.5%悬浮红细胞，50 微升0.5%标准A1 型悬浮红细胞，50 微升0.5%标准B型悬浮红细胞，以此分别测出与丈夫红细胞，与标准A1 型红细胞，与标准B型红细胞反应的效价。④吸收IgG抗AB抗体：取0.5 mL裂解液两份，一份加入1 mLA型献血员压积红细胞，另一份1 mL B型献血员压积红细胞，37 ℃温浴箱中吸收2 h。⑤离心后所得上清液重复步骤④，检测吸收是否完全：若A型献血员压积红细胞吸收后的上清液与A型红细胞在微柱凝胶卡中不反应，则表示吸收完全，同理可知B型献血员压积红细胞吸收后的上清液是否吸收完全。⑥测定吸收后IgG抗AB效价：取吸收后上清液，倍比稀释后分别加入0.5%B/A1 型RhD(+)悬浮红细胞，A型红细胞吸收后的上清液用B型红细胞反应，B型红细胞吸收后的上清液用A1 型红细胞反应，在微柱凝胶卡中测定IgG抗AB效价，分别记录为吸收后与标准A1 细胞、吸收后与标准B细胞。

1.4 统计学方法 运用SPSS 20.0 统计学软件分析数据，计数资料使用卡方检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 32 例O型孕妇（丈夫血型为AB型）测定IgG抗AB效价 其中IgG抗AB不同效价组的效价分布见表1。去除抗AB影响后共有11 例效价发生变化，2 例效价降低了2 个滴度，其余9 例效价均降低了1 个滴度，结果见表2。

表1 32例抗AB检测效价滴度分布情况 (例)

表2 11例抗AB影响情况分析

2.2 按照与丈夫红细胞反应效价分组比较 4 组各组间存在抗AB的差异有统计学意义（χ2=8.062，fisher检验值=0.045），见表3。

表3 抗AB存在于抗丈夫红细胞血型效价分组比较

2.3 新生儿溶血病的发生按存在抗AB分组比较 按存在抗AB分组比较，差异有统计学意义（χ2=10.929，fisher检验值=0.002），见表4。

表4 抗AB存在与发生新生儿溶血病关联情况

3 讨 论

新生儿溶血病的发生会受到多因素的影响[3]。比如新生儿的基础情况，孕妇的ABO血型效价及孕妇IgG抗体亚型等。

抗AB是O型孕妇血清中区别抗A和抗B的另一种抗体，未经免疫的孕妇血液中也可以少量存在。吸收放散试验在输血相容性检测中准确性和实用性很高[4～5]，故检测抗AB影响时采用了吸收技术。本次研究发现32例O型孕妇其丈夫为AB型的ABO血型效价中有11例存在抗AB的影响（占31.25%），其中针对于丈夫细胞的效价中有2例效价1:256，其中2例存在抗AB的影响（占100%）；12例效价为1:128，其中6例存在抗AB的影响，占50%；15例效价为1:64，其中2例存在抗AB的影响（占13.33%）；3例效价为1:32，其中1例存在抗AB影响（占33.33%）。其中高效价1:64以上的共9例。说明孕妇与丈夫红细胞效价越高存在抗AB的影响也越多，高ABO血型效价孕妇生育新生儿后发生新生儿溶血可能会与抗AB的存在有关。但抗AB的存在不都会发生新生儿溶血病，可能与抗AB的IgG亚型有关，也可以解释为什么低ABO血型效价的孕妇生育新生儿后也可以发生新生儿溶血病。本次回顾性分析未对抗AB的IgG亚型进行鉴别，后续会对O型其丈夫为A或B型的孕妇进行抗A、抗B及抗AB的IgG亚型进行检测，试图寻找出其IgG亚型与新生儿溶血病的关联。本次研究选取的32对夫妻为孕妇为O型，丈夫为AB型的样本，这样避免了新生儿出现纯合子的情况，以此来防止稀释新生儿溶血病的发生率。临床产科门诊产前检查中对16～28周O型孕妇其丈夫为非O型（而本次研究是其中的一种情况即孕妇为O型，丈夫为AB型）进行ABO血型效价检测。并把检测结果作为孕中期孕妇服用中药茵陈蒿汤的标准，并对高效价的孕妇进行追踪检测服药效果[6～7]，服药的目标是减少新生儿溶血病的发生。

综上所述，O型的孕妇血清中含有三种抗体：抗A，抗B，抗AB（是一种交叉反应性抗体）。抗AB在16～28 周O型孕妇检测ABO血型效价时会影响效价。本次研究回顾分析了ABO IgG抗体中的抗AB对ABO血型效价高低的影响。进一步说明孕妇血清中存在IgG-抗AB，由于实验中抗AB对效价影响有1 个和2 个滴度的影响，但这并不表示其不存在0-1 之间的滴度影响而实验中并未检出的可能，即抗AB在人体内含量存在个体差异性。