危燕平,魏娴,胡鲤萍,肖晓瑜,曾淑芬
厦门长庚医院检验科,福建厦门 361022
呼吸道感染是临床儿科最常见的感染之一,是威胁患儿健康的主要因素,大部分的呼吸道感染由病毒感染引起,呈现一定的季节和地域分布特点[1-2]。呼吸道病毒可以通过空气或飞沫形式传播,在呼吸道黏膜上皮细胞中增殖,引起呼吸道,甚至全身感染,引起多种疾病,呼吸道病毒不但种类繁多,而且引起的临床症状相似,在临床上比较难鉴别[3-4]。该文利用国内常用的直接免疫荧光法(DFA)[5]检测有呼吸道感染症状的患儿鼻咽分泌物中7种常见呼吸道病毒的抗原,针对2018年1月—2019年12月该院3 778例7项呼吸道病毒检测的结果,依各类病毒在不同月份、不同年龄和不同性别的感染阳性率进行统计分析,为临床诊疗及疫情监控提供数据,现报道如下。
方便选取在该院住院治疗的有呼吸道感染症状的儿科患儿3 778例,其中男2 199例,女1 579例,男女比例为1.39∶1,年龄1 d~14岁。该次研究获得医院伦理委员会批准,且患者及其家属均对此知情并签署知情同意书。
检测仪器:BX51型荧光显微镜;试剂:配套试剂。
7对项呼吸道病毒抗原进行监测,分别为呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒 A 型(FLUA)、流感病毒 B 型(FLU-B)、副流感病毒 1 型(PIV1)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)。采用直接免疫荧光法,荧光素(FITC)标记的单克隆抗体与病毒抗原结合,形成稳定的抗原-抗体复合物,在荧光显微镜试剂下观察,阳性结果呈现特异性苹果绿色荧光。
在荧光显微镜下观察到有明亮的苹果绿荧光的细胞为阳性细胞;被伊文斯蓝(Evans蓝)染成红色的细胞为阴性细胞。在20×倍放大荧光显微镜下观察结果,镜下每视野找到≥2个阳性细胞,判为阳性结果。每一孔对应7种呼吸道病毒的其中一种,阴性对照孔除外。
采用SPSS 19.0统计学软件分析数据,计数资料采用率(%)表示,组间比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
在送检3 778例中,共检出771例阳性,总阳性率为20.41%(771/3 778);其中单一病毒阳性率为19.80%(748/3 778);2种或2种以上病毒复合感染的阳性率为0.61%(23/3 778),例数太少,明显低于单一病毒感染,故不作单独排除分析讨论。
在771例阳性病例中,RSV阳性率最高,为9.03%(341/3 778);第 2 名是 ADV,阳性率为 2.94%(111/3 778);第 3名是 PIV3,阳性率为 2.49%(94/3 778);第 4名是FLU-B,阳性率为 2.38%(90/3 778);第 5名是 FLU-A,阳性率为 1.64%(62/3 778);第 6名是 PIV1,阳性率为1.14%(43/3 778);第 7名是 PIV2,阳性率为 0.79%(30/3 778)。
患儿男女性别的呼吸道病毒感染总阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=12.522,P<0.001)。除 PIV1,男女的阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他6种病毒的男女阳性率比较,差异统计学意义(P<0.05)。见表1。
各年龄组间阳性率比较,差异有统计学意义 (P<0.05)。≤1岁和>1岁,≤3岁患儿感染总阳性率较高,见表2。
7种呼吸道病毒感染的总阳性率排名前3的月份分别为2月、1月、12月,这3个月正处于冬季,由此儿童呼吸道病毒感染常好发于冬季,与其他季节比较,阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。
急性呼吸道感染,90%以上的呼吸道感染是由病毒引起[6],病程有自限性,临床治疗无需使用抗生素[7]。研究显示[8],儿童为呼吸道感染的主要发病人群,但不同的地方呼吸道病毒的感染种类和阳性率各不相同。因此,呼吸道病毒病原的检测对于临床诊断和治疗具有重要意义,为临床医师进行合理用药提供依据,对症治疗,缩短病程,从而有效避免临床抗生素的不合理使用的发生。
表1 7种呼吸道病毒男、女阳性率比较(%)
表2 7种呼吸道病毒按照年龄统计分析(%)
表3 7种呼吸道病毒按照月份统计分析(%)
相关研究显示,世界范围内每年感染流感病毒的患者数量巨大,仅欧美国家年感染人数就超过1亿人次。2009年,甲型HINI流感的爆发给医学界带来巨大的困扰,导致疾病爆发的原因主要因对该型流感引起的肺炎病原体每能快速准确的作出鉴别。所以,在呼吸道病毒感染疾病诊断中,为提高诊断准确率,减少误诊及抗生素药物的滥用,儿科呼吸道疾病诊断中,通常进行7项呼吸道病毒检测。在呼吸道感染中,病毒是主要病原体,7项检查指标分别为RSV、ADV、FLU-A、FLUB、PIV1、PIV2及PIV3,而在呼吸道病毒检测中,直接免疫荧光法的检测速度最快,且操作简单,属于特异性呼吸道病毒感染诊断方法。
厦门地区地处福建沿海地区,降雨量丰沛,气候潮湿,冬春季节气温变化幅度较大。而7项呼吸道病毒检测中,流行趋势呈现出不同季节、年龄等变化,因此儿童呼吸道疾病在厦门地区与年龄、季节等因素密切相关。该次研究收集了3 778例呼吸道疾病患儿标本,其检测结果如下:感染按照总阳性率统计显示,抗原检测总阳性率为20.41%,苏玉萍等[9]研究显示,感染抗原检测总阳性率为34.62%、陈玲等[10]研究结果为33.28%,与该次研究结果存在差异,可能与上述研究病例数较少有关;而韩欢等[11]研究总阳性率为21.03%,与该次研究结果基本一致。故RSV被认为是儿童呼吸道病毒感染率最高的病毒之一[12],应引起临床的重视。感染按照患儿男女性别统计显示,女性为17.67%,男性为22.37%,男女的总阳性率相近(χ2=12.522,P<0.001),其中 PIV1的男女的阳性率差异无统计学意义,与韩欢等报导的总阳性率方面,女性为18.15%,男性为19.63%,比较差异无统计学意义(P>0.05),与该次研究结果不一致。分析结果有待在以后的工作中作进一步的追踪分析。感染按照年龄统计显示,以6岁以下的婴幼儿为主,以RSV阳性率最高;6~14岁则以FLU-B阳性率最高,陈玲等在其研究中显示,婴幼儿RSV感染率方面,6岁以下感染率较高,而6岁以上FLU-B感染率较高,与该次研究结果基本一致。上述分析结果提示,7项呼吸道病毒感染的阳性率随着年龄的增加而降低,因此6岁以下患儿是病毒感染预防的重点人群,应引起临床的重视。感染阳性率按照月份统计显示,总阳性率排名前3的月份分别为1月、2月、12月,这3个月正处于冬季,由此儿童呼吸道病毒感染常好发于冬季,与苏玉萍等报导的相似。7种呼吸道病毒阳性率最高的月份分布,除PIV3阳性率最高的月份为5月份外,其他6项的均处于秋冬季节,故可看出呼吸道病毒感染在秋冬季形成高峰。不同季节存在差异,应在呼吸道病毒较高发的冬季做好重点对象的个人防护,以降低病原体对人体呼吸道造成感染的风险。
综上所述,早期快速检出患儿呼吸道感染的病原体,可以及时为临床医生提供诊断依据,并有效减少抗生素的过度使用,为临床高效诊疗儿童呼吸道感染疾病方面具有重要意义。