脑梗死患者血浆晚期糖基化终产物、一氧化氮水平与颈动脉粥样硬化的关系研究

翟 云，杨 柳，任薇薇，吴金萍

脑梗死是指多种原因引起局部脑组织缺血、缺氧，脑细胞出现坏死，神经功能受损的神经科疾病，好发于中老年人，发病基础为动脉粥样硬化(atherosclerosis， AS)，而AS发生与血管内皮损伤及炎症反应等密切相关[1]。晚期糖基化终产物(advanced glycation end products， AGEs)是非酶糖基化反应的终末产物，可通过在细胞外基质沉积、免疫炎症反应及氧化应激反应等损伤血管[2]。一氧化氮(nitric oxide， NO)是参与血管功能调节的气体信号分子，可平衡血管舒缩、炎症反应，是内皮功能评估的重要指标之一[3]。目前，国内关于脑梗死患者AGEs、NO水平与AS发生关系的研究较少，而颈动脉是反映AS的窗口，所以本研究通过检测脑梗死患者血浆AGEs、NO水平及颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis， CAS)程度，分析脑梗死患者血浆AGEs、NO水平与CAS的关系，初步探讨血浆AGEs、NO水平在CAS发展及脑梗死程度中的作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月—2019年1月西安工会医院收治的符合纳入及排除标准的112例脑梗死作为脑梗死组；另选取同期来该院体检，且性别和年龄与脑梗死组匹配的健康体检者50例作为对照组。脑梗死组男61例，女51例；年龄52～80(64.83±7.93)岁。体质量指数(body mass index, BMI)21.21～29.78(25.32±2.62)kg/m2。对照组男28例，女22例；年龄51～78(63.10±7.23)岁；BMI 20.58～29.41(25.01±2.85)kg/m2。两组性别、年龄及BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

根据美国国立卫生研究院卒中评定量表(NIH stroke scale, NIHSS)[4]评分评价病情程度，脑梗死112例中轻度44例(NIHSS 0～15分)，中度38例(NIHSS 15～30分)，重度30例(NIHSS 30～45分)。轻度男23例，女21例；年龄53～76(64.50±7.62)岁；BMI 21.21～28.56(25.41±2.67)kg/m2。中度男22例，女16例；年龄52～80(64.76±8.02)岁；BMI 20.96～29.78(25.22±2.43)kg/m2。重度男16例，女14例；年龄55～78(65.37±7.58)岁；BMI 22.39～29.35(25.33±2.61)kg/m2。不同病情程度脑梗死患者性别、年龄及BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。超声检查结果显示脑梗死112例中粥样斑块形成76例，非粥样斑块形成36例。粥样斑块形成男40例，女36例；年龄52～76(64.25±7.36)岁；BMI 21.21～29.78(25.46±2.42)kg/m2。非粥样斑块形成男21例，女15例；年龄55～78(65.03±8.12)岁；BMI 21.35～29.54(25.20±2.81)kg/m2。粥样斑块形成与非粥样斑块形成脑梗死患者性别、年龄及BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准同意执行。

1.2纳入及排除标准 纳入标准：①符合脑梗死诊断标准[5]，并经影像学检查证实诊断；②年龄<80周岁。排除标准：①合并严重系统性疾病者；②近期有手术史、心肌梗死史及创伤史者；③合并恶性肿瘤者。

1.3检查方法

1.3.1血浆AGEs及NO水平检测：采集所有受试者空腹静脉血3～5 ml，并进行抗凝处理，3000 r/min离心10 min，收集上清液，待检测。采用酶联免疫吸附试验法检测血浆AGEs水平，试剂盒购自上海一研生物科技有限公司。采用硝酸还原酶法检测血浆NO水平，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3.2超声检查：患者取仰卧位，肩下用枕头垫高使颈部维持仰伸状态，头部偏向检查对侧，采用彩色多普勒超声诊断仪(日本ALOCKA公司)进行经颈动脉超声检查，双侧均查，探头频率7～10 MHz，测量颈总动脉分叉处内中膜厚度(intima-medium thickness， IMT)。颈总动脉分叉处IMT≥1.2 mm视为粥样斑块形成[6]。

1.4观察指标 比较脑梗死组和对照组、不同病情程度脑梗死患者血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT，粥样斑块形成与非粥样斑块形成脑梗死患者血浆AGEs和NO水平，并采用Spearman等级相关分析对血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT与脑梗死病情程度关系以及血浆AGEs、NO水平与脑梗死患者粥样斑块形成关系进行分析。

2 结果

2.1脑梗死组和对照组血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT比较 脑梗死组血浆AGEs水平及颈总动脉分叉处IMT高于对照组，血浆NO水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 脑梗死患者和健康体检者血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT比较

注：AGEs为晚期糖基化终产物，NO为一氧化氮，IMT为内中膜厚度

2.2不同病情程度脑梗死患者血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT比较 不同病情程度脑梗死患者间血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT总体比较差异有统计学意义(P<0.01)。轻度脑梗死患者血浆AGEs水平和颈总动脉分叉处IMT低于中度和重度脑梗死患者，血浆NO水平高于中度和重度脑梗死患者，差异均有统计学意义(轻度vs中度：q=3.563、P=0.001，q=4.777、P<0.001，q=2.466,P=0.016；轻度vs重度：q=7.569、P<0.001，q=10.444、P<0.001，q=5.081、P<0.001)；中度脑梗死患者血浆AGEs水平和颈总动脉分叉处IMT低于重度脑梗死患者，血浆NO水平高于重度脑梗死患者，差异有统计学意义(q=4.316、P<0.001，q=5.855、P<0.001，q=2.117、P=0.038)。见表2。

表2 不同病情程度脑梗死患者血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT比较

注：AGEs为晚期糖基化终产物，NO为一氧化氮，IMT为内中膜厚度；与轻度比较，aP<0.05，bP<0.01；与中度比较，cP<0.05，dP<0.01

2.3血浆AGEs、NO水平和颈总动脉分叉处IMT与脑梗死病情程度关系 Spearman等级相关分析结果显示，血浆AGEs水平与脑梗死病情程度呈正相关(r=0.616，P<0.001)，血浆NO水平与脑梗死病情程度呈负相关(r=-0.667，P<0.001)，颈总动脉分叉处IMT与脑梗死病情程度呈正相关(r=0.401，P=0.008)，见图1～图3。

图1 血浆晚期糖基化终产物与脑梗死病情程度Spearman等级相关分析

图2 血浆一氧化氮与脑梗死病情程度Spearman等级相关分析

图3 颈总动脉分叉处内中膜厚度与脑梗死病情程度Spearman等级相关分析

2.4粥样斑块形成与非粥样斑块形成脑梗死患者血浆AGEs和NO水平比较 粥样斑块形成脑梗死患者血浆AGEs水平高于非粥样斑块形成脑梗死患者，血浆NO水平低于非粥样斑块形成脑梗死患者，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表3。

表3 粥样斑块形成与非粥样斑块形成脑梗死患者血浆AGEs和NO水平比较

注：AGEs为晚期糖基化终产物，NO为一氧化氮

2.5血浆AGEs、NO水平与脑梗死患者粥样斑块形成关系 Spearman等级相关分析结果显示，血浆AGEs水平与脑梗死粥样斑块形成呈正相关(r=0.695，P<0.001)，血浆NO水平与脑梗死粥样斑块形成呈负相关(r=-0.697，P<0.001)，见图4和图5。

图4 血浆晚期糖基化终产物与脑梗死粥样斑块形成Spearman等级相关分析

图5 血浆一氧化氮与脑梗死粥样斑块形成Spearman等级相关分析

3 讨论

AGEs是指无酶条件下，脂肪、核酸、蛋白质羰基与还原糖醛糖经一系列反应产生的稳定化合物，AGEs与其相应受体作用后，可介导多种病理过程[7]。有研究显示，脑梗死患者AGEs水平明显升高，且AGEs水平升高是脑梗死患者短期预后不良的危险因素[8]。NO属于一种舒血管因子，由内皮细胞分泌，能通过使鸟苷酸环化酶激活，抑制血管平滑肌细胞增殖，起到舒张血管作用；另外，NO还可通过抑制内皮细胞与中性粒细胞作用、抑制血小板凝集，阻止血栓形成[9]。有研究显示，脑梗死患者NO水平明显低于健康者，认为NO水平异常与脑梗死发生可能存在一定关系[10]。本研究结果显示，脑梗死组血浆AGEs水平高于对照组，血浆NO水平低于对照组，差异有统计学意义。不同病情程度脑梗死患者间血浆AGEs和NO水平总体比较差异有统计学意义。轻度脑梗死患者血浆AGEs水平低于中度和重度脑梗死患者，血浆NO水平高于中度和重度脑梗死患者；中度脑梗死患者血浆AGEs水平低于重度脑梗死患者，血浆NO水平高于重度脑梗死患者，差异有统计学意义。提示血浆AGEs和NO水平可能与脑梗死发生和发展相关。Spearman等级相关分析结果显示，血浆AGEs水平与脑梗死病情程度呈正相关，血浆NO水平与脑梗死病情程度呈负相关。进一步证实血浆AGEs和NO参与脑梗死发生、发展。

IMT是早期AS监测的常用指标，对于心脑血管事件发生的预测具有重要价值。本研究结果显示，脑梗死组颈总动脉分叉处IMT高于对照组，差异有统计学意义；不同病情程度脑梗死患者间颈总动脉分叉处IMT总体比较差异有统计学意义；轻度脑梗死患者颈总动脉分叉处IMT低于中度和重度脑梗死患者，中度脑梗死患者颈总动脉分叉处IMT低于重度脑梗死患者，差异有统计学意义，与既往大多数研究结果一致[11-12]。

CAS是脑梗死发病基础，超过70%的脑梗死患者由CAS引起，若能早期检测并发现CAS，有助于脑梗死的预防及治疗[13]。本研究超声检查结果显示脑梗死112例中粥样斑块形成76例，非粥样斑块形成36例，粥样斑块形成脑梗死患者血浆AGEs水平高于非粥样斑块形成脑梗死患者，血浆NO水平低于非粥样斑块形成脑梗死患者。提示血浆AGEs和NO水平可能与粥样斑块形成、AS进展有关。Spearman等级相关分析结果显示，血浆AGEs水平与脑梗死粥样斑块形成呈正相关，血浆NO水平与脑梗死粥样斑块形成呈负相关。提示血浆AGEs水平可促进AS进展，而血浆NO水平与其作用相反，能延缓AS进展。分析AGEs促进AS的可能原因：①AGEs在血管基底膜细胞外基质积聚，并形成交联，促进微血管及大血管并发症发生；②AGEs通过修饰脂质，减少NO合成，诱导细胞凋亡，削弱血管反应性；③AGEs通过与相应受体结合，增加内皮素1表达，减少依前列醇表达，使内皮细胞平衡受到破坏，并可激活免疫炎症反应，促使AS发生[14-15]。分析NO延缓AS进展的可能原因：①NO作为内源性血管舒张剂，能对血管紧张度及局部血流量进行调节，使血管维持稳态；②NO具有抗血栓作用，能影响血小板聚集功能，促进已聚集血小板解体，减少纤溶酶原激活剂抑制物1等促血栓因子产生；③NO可通过抑制NF-κB激活及转移，降低血管壁炎症反应；④NO具有清除自由基、抗氧化及血管重塑作用，对血管内皮功能具有保护作用[16-19]。

总之，血浆AGEs水平升高、NO水平降低与脑梗死的发生和发展密切相关，其机制可能是通过血浆AGEs水平升高、NO水平降低促进CAS进展而实现。血浆AGEs、NO水平检测可了解CAS进展情况，且对评估脑梗死患者病情程度具有重要意义。