利用华支睾吸虫的排卵规律和消炎利胆片提高虫卵检出率的研究*

戴 芳，王 新，黄冬梅，马贞丽

(广西中医药大学附属瑞康医院，广西南宁 530001)

华支睾吸虫病又称肝吸虫病，由于食用未经煮熟且含有华支睾吸虫囊蚴的淡水鱼、虾而感染，是危害人体健康的食源性寄生虫病，华支睾吸虫主要寄生于人体的胆管内，轻度感染者多数症状不明显，严重感染者可出现消化功能紊乱、肝区疼痛、胆结石、黄疸等，晚期患者常伴有肝硬化、肝胆管癌等[1]。华支睾吸虫病在中国主要流行于广东、广西、辽宁和黑龙江等省份，广西近年来发病率逐步上升[2-6]。该病的病原学检查依据是在粪便、胆汁或十二指肠液中检出华支睾吸虫卵，通常采用水洗沉淀法、改良加藤厚涂片法和醚醛沉淀法等方法查找华支睾吸虫卵[7]；而血清学检查一般是采用酶联免疫吸附测定法检测肝吸虫免疫球蛋白G(IgG)抗体，其结果只能作为辅助诊断指标。但在诊疗过程中，肝吸虫IgG抗体阳性的患者中，却有一小部分患者在粪便标本中找不到虫卵，这就给华支睾吸虫病的临床确诊带来很大困难，因此，进一步提高华支睾吸虫虫卵的检出率对提高华支睾吸虫病的临床诊治效果有重要意义。本研究探讨了利用消炎利胆片和华支睾吸虫的排卵规律来提高粪便标本中虫卵的检出率，报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年3月至2018年2月在本院就诊的门诊和住院疑似华支睾吸虫感染患者300例，其中男性210例，女性90例，平均(45.3±23.6)岁，纳入标准：(1)有食生鱼史者；(2)静脉血清肝吸虫IgG抗体阳性者；排除标准：(1)服用驱虫药者。将患者随机分成3组，3组间在年龄、性别上差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2仪器与试剂 光学显微镜购自日本奥林巴斯株式会社，型号CX31；博赛1210酶标仪、湘仪离心机、肝吸虫IgG抗体检测试剂盒均购自中国深圳华康生物工程有限公司；甲醛购自中国广东汕头市西陇化工厂；乙醚购自中国天津市致远化学试剂有限公司；改良加藤厚涂片法寄生虫试剂盒检测制片盒购自中国广州市宜康生物科技有限公司；消炎利胆片购自中国广东新峰药业股份有限公司。

1.3方法

1.3.1血清学检查 收集疑似患者的血清样本，采用酶联免疫吸附测定法检测血样中华支睾吸虫IgG。由专业人员按照试剂盒说明书进行操作，以630 nm下吸光度值(A)大于阴性对照2.1倍为阳性结果。

1.3.2虫卵检测方法 将符合条件的病例随机分为3组，第1组为常规方法留取标本的对照组，即患者连续留取3 d的粪便标本送检；第2组为服用利胆片组，患者按医嘱连续服用利胆片6 d，在服用第4日开始连续留取3 d的粪便标本送检；第3组则根据华支睾吸虫的排卵周期，分别于第1、10、20日留取粪便标本送检。送检的粪便标本均同时采用改良加藤厚涂片法、水洗沉淀法和醚醛沉淀法3种方法检测，只要其中一种方法找到华支睾吸虫卵，即报告为检出华支睾吸虫卵，并对结果进行χ2检验。

1.4统计学处理 应用SPSS16.0统计软件，对3组资料的检测结果用χ2检验进行分析。

2 结 果

2.13组粪便标本华支睾吸虫卵检出率比较 第1组(常规组)病例中有76例检测到华支睾吸虫卵，阳性率为76.0%；第2组(服用消炎利胆片组)病例中有93例找到华支睾吸虫卵，阳性率为93.0%；第3组(利用华支睾吸虫排卵周期检测组)病例中，有91例找到华支睾吸虫卵，阳性率为91.0%。三组的检出率用χ2检验比较，差异有统计学意义(P<0.05)，其中第2组和第3组的检出率明显高于第1组，差异有统计学意义(P<0.05)，而第2组和第3组的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组粪便标本华支睾吸虫卵检出率比较

注：与第1组相比，*P<0.05；与第2组相比，#P>0.05。

3 讨 论

华支睾吸虫病的危害相当大，2009年华支睾吸虫感染被世界卫生组织国际癌症研究机构确定为胆管癌Ⅰ类致癌因素[8]。有报道称从2016-2018年，广西肝吸虫IgG抗体阳性率分别为21.83%、29.88%和36.48%，阳性率逐年增高[6]。该疾病的病原学检查，是以在粪便、胆汁或十二指肠液中检查出华支睾吸虫卵为确诊该病的依据。虽然检测方法学在不断地发展，但粪便中找华支睾吸虫卵的检出率仍然难以让人满意，分析原因有以下几点(1)华支睾吸虫长期寄生在人体的胆道系统，成虫在肝胆管内破坏胆管上皮和黏膜下血管，再加上虫体的分泌物、代谢产物和机械刺激等因素的作用，可引起胆道的一系列病理改变，可表现为胆管炎、胆囊炎和胆结石等，导致胆管不同程度扩张，胆管壁粗糙、增厚，甚至堵塞，虫卵排入肠道不顺畅和排不出来；(2)华支睾吸虫的排卵是有规律的，平均22～34 d为1个周期[9]；(3)部分华支睾吸虫病病例只是轻度感染，虫少排卵也少，检出率也低。因此，必须采取有针对性的措施来进一步提高华支睾吸虫虫卵的检出率。研究表明，消炎利胆片由溪黄草、穿心莲、苦木等多种中草药研制而成的一种中药复方制剂，其中溪黄草有清热利湿、逐瘀利胆的作用；穿心莲、苦木，二者均可清热解毒、燥湿泻火，合用可共奏清热燥湿、逐瘀利胆之功。现代药理学证明，消炎利胆片中的溪黄草、穿心莲还具有抗菌、抗炎、抗病毒、护肝及解热等多种作用，能够有效抑制炎性物质[10-13]。因此，消炎利胆片能刺激肝脏分泌胆汁，促进胆囊收缩，促进胆汁的排泄，减少胆汁的淤积，使胆管内的虫卵能更顺利被排出胆管，本研究中，服用消炎利胆片组检出虫卵率明显高于常规组(P<0.05)，说明利用消炎利胆片的这些功效能明显提高华支睾吸虫卵的检出率。特别是华支睾吸虫严重感染、兼有胆管炎或胆结石的患者，往往会出现胆管壁不光滑或有胆结石的阻塞，导致虫卵排出不顺畅的情况，用消炎利胆片来提高华支睾吸虫卵的检出率效果更为明显。而华支睾吸虫轻度感染者，其粪便中的虫卵较少，本研究中，根据华支睾吸虫的排卵周期、增加检测次数和多点采样粪便标本来提高检出率，分别于第1、10、20天留取粪便标本，检出率达到91.0%，检出华支睾吸虫虫卵率亦明显高于常规组(P<0.05)，说明利用华支睾吸虫的排卵规律间隔一定的时间多次留取大便比连续留取3日的传统方法检出率更高，更利于临床确诊。

综上所述，对于有食用未煮熟的淡水鱼虾史，且肝吸虫抗体阳性者，建议连续服用6日的消炎利胆片，从第4日开始连续留取3日的粪便标本送检；如果不愿口服消炎利胆片者，可分别于第1、10、20日留取粪便标本送检，这两种留取粪便标本的方法较传统方法都能明显提高华支睾吸虫的检出率。这样就有更多的华支睾吸虫病患者能被明确诊断，这不仅能提高华支睾吸虫病的临床诊治效果，也能减少滥用驱虫药物，降低药物对人体的伤害。