BD 全自动血培养仪假阳性的几种情况分析及处理

辽宁省辽阳市第三人民医院 （辽宁 辽阳 111000）

内容提要： 目的：分析对BD血培养仪的假阳性几种状况分析和处理。方法：根据仪器在应用过程当中所遇到的假阳性情况设计两个相关实验进行调查总结相关的处理方法：①血培养仪阳性对照实验；②血培养仪回收实验。结果：对实验一进行分析，BD血培养仪，自动化连续监测系统存在允许延迟上机的功能，数据之间比较，P＜0.05；对实验二进行分析，当细菌浓度有足够大的时候，如果血液不足1mL，则也可以检测出菌血症；如果标本量超过1L，细菌量增大，血液标本量增加，仪器报阳时间越短，数据相互比较，P＜0.05。结论：BD血培养仪自动化连续监测系统存在延迟上机的功能，血液标本量越大，那么仪器报阳的时间也就越短，如果不能及时地放置血培养瓶，仪器仍然存在报阳的情况，报阳的总时间会延长。

BD血培养仪具有较高的自动化程度，在进行工作的过程中，主要原理是通过细菌所生成的二氧化碳和荧光指示剂相结合，结合物主要是荧光底物，能够在LED灯的照射作用之下产生荧光，而且仪器每隔15min会进行一次检测，对测试槽的吸光度进行检验分析结果[1]。而位于培养一中的培养瓶，可以根据某特定时间当中的吸光度的值对吸光度变化曲线进行绘制，并将其作为细菌生长曲线，曲线的斜率可以对培养瓶底物质的变化进行反映，在达到一定斜率的时候，对阳性结果进行汇报，然后进行细菌涂片、染色、转种等相关工作，通过仪器的不断震荡等能够使细菌获取更多的营养。本文主要基于此分析BD全自动培养仪出现假阳性的几种情况，并分析相关的处理策略。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择的仪器为BD BACTEC 9120型全自动血培养仪，两个实验所应用的细菌来源于大肠杆菌ATCC25922。理论细菌浓度达到106cfu/mL的时候，涂片可观察到细菌，因此血培养阳性瓶细菌浓度需要超过106cfu/mL时仪器进行提示，血培养瓶当中存在细菌生长就可以进行下一步的试验。仪器的血培养瓶阳性试验所选择的标本为1mL 0.5麦氏单位的大肠杆菌菌液，并将其接种在培养瓶当中，同时将此瓶和没有接种标本的培养瓶同时放入仪器当中进行检测，阳性瓶需要在3d之内报阳，而没有接种的培养瓶一般始终为阴性。如果不能及时放置血培养瓶，则仪器始终为阳性，报阳结果总时间会出现延长。将培养瓶放置到系统之前会出现报阳时间延长，并且显示出假阴性的情况，然后进行鉴定和药敏试验。为进一步对仪器报阳状况加以分析，设计两个小实验进行进一步的探究。

1.2 方法

①实验1：选择浓度为1010cfu/mL的0.5麦氏单位的大肠杆菌细菌悬液10mL放置在4批次20只血培养瓶当中，并且根据不同时间所放置的血培养瓶依次放置在仪器当中，对报阳的时间进行观察和记录。

②实验2：关于阳性瓶不同细菌浓度和报阳时间关系的实验。首先将0.5麦氏单位的大肠杆菌悬液倍比稀释成为一定的浓度的细菌悬液，然后选择10mL分别加入到不同批次的20只血培养瓶当中，对报阳时间进行比较。

1.3 统计学分析

本文采用统计学软件IBM SPSS25.0对本文中所有的资料标本数据进行统计学检验，文中的所有计量资料均选择采用±s表示，同时选择采用t值对所有的计量值进行检验；本文中的所有计数资料均选择采用n、%进行表示，并且以χ2检验文中的所有计数值；本文的等级资料均采用秩和检验和Ridit分析进行检验，同时以Z值加以表示；P＜0.05说明差异存在统计学意义。

2.结果

从实验1的结果来看，延迟放置血培养瓶的时间为30min，报阳时间为（29.25±4.25）h，延迟放置血培养瓶时间为6h，报阳时间为（27.45±3.82）h，延迟放置血培养瓶时间为12h，报阳时间为（23.05±2.16）h，延迟放置血培养瓶时间为24h，报阳时间为（15.45±2.7）h。

实验结果显示4批次20只血培养瓶仪器都能够正常报阳，培养瓶放置到系统之中之前出现一定程度的生长，未出现假阴性读数，只是总培养时间会存在相对延长，因此结果说明，BD血培养仪，自动化连续监测系统存在允许延迟上机的功能，数据之间比较，P＜0.05。

从实验2的结果进行分析可以得出，加入血培养瓶中细菌浓度为103，报阳时间为（66.25±83.45）h，加入血培养瓶中细菌浓度为104，报阳时间为（45.28±7.64）h，加入血培养瓶当中细菌浓度为105，报阳时间为（30.25±7.24）h，加入血培养瓶中细菌浓度为106，报阳时间为（27.45±5.81）h，加入血培养瓶中细菌浓度为107，报阳时间为（25.12±4.58）h，加入血培养瓶当中细菌浓度为108，报阳时间为（22.35±3.61）h。

实验结果显示4批次20只血培养瓶的仪器都能正常报阳，机器在细菌对数生长期可以及时报阳，能够有效地排除存在假阳性的可能，而且大多数临床感染的细菌生长周期为15min。因此结果能够说明，当细菌浓度有足够大的时候，如果血液不足1mL，则也可以检测出菌血症；如果标本量超过1mL，细菌量增大，血液标本量增加，仪器报阳时间越短，数据相互比较，P＜0.05。

3.讨论

本文主要对BD血培养仪进行血液细菌培养的相关应用情况进行简单的探讨，同时总结相关的体会。临床上因为各种病原菌的生长习性和环境存在差异，这也会导致在临床检验的过程中明明存在涂片看见细菌的情况，但是实验室却无法培养出来的结果[2]。考虑因为可能存在苛养菌和厌氧菌等情况，所以需要对微生物的生长条件和环境进行细微的改善，实验室硬条件能够解决这些问题，但是真菌当中的一些菌种的培养所需时间相对较长，甚至有些需要在10d以上血培养报阳性，而形成的血流感染的真菌培养阳性率也会随之增高。因为仪器本身存在问题也可能会导致血培养仪在进行检验的过程中出现假阳性，在进行检验的过程当中，因为血培养仪的培养槽存在不洁净，会出现假阳性；如果温度和湿度存在不合理，或者在进行培养的过程当中存在较大的一切噪声，在极端气候条件之下，也会出现假阳性的情况；因为人为对培养品检验状态进行改善，这样也可能会导致出现假阳性；除此以外，因为检验的白细胞浓度相对较高也容易出现假阳性。所以针对于此，BD血培养仪需要通过专门的负责人进行维护，做好整体的清洁和维护工作，如果存在异常，应该进行及时的处理。BD血培养仪虽然存在有延迟上机的功能，但是在培养瓶的运送当中，需要尽量减少延迟的时间；在进行正常的工作过程当中需要注意了解细菌的生长情况，了解细菌的特性，这能在很大程度上避免出现实验误差，保证计算的准确性。

综上所述，BD血培养仪自动化连续监测系统存在延迟上机的功能，血液标本量越大，那么仪器报阳的时间也就越短，如果不能及时地放置血培养瓶，仪器仍然存在报阳的情况，报阳的总时间会延长。