电感耦合等离子体-质谱法测定长春西汀等5 种原料药中催化剂钯残留*

王荪璇，刘雪峰，王嫦鹤，妙 苗，绳金房

（陕西省食品药品监督检验研究院，陕西 西安 710065）

长春西汀是从长春花植物（小蔓长春花）提取的生物碱，化学名为乙基阿朴长春胺-22-醋酸乙酯[1]。托吡酯为天然单糖基右旋果糖硫化物，化学名为2，3，4，5-双-氧-（1-甲基亚乙基）- β-D-吡喃果糖氨基磺酸酯。盐酸尼卡地平化学名为2，6-二甲基-4-（3′-硝基苯基）-1，4-二氢吡啶-3，5-二羧酸，3- [ β-（N-苄基-N-甲基氨基）] -乙酯-5-甲酯盐酸盐。甲磺酸伊马替尼化学名为4-（4-甲基-1-哌嗪）甲基-N-4-甲基-3-4-（3-吡啶）-2-嘧啶氨基苯基-苯甲酰胺甲磺酸盐。盐酸多奈哌齐化学名为（±）2，3-二氢-5，6-双甲氧基-2- ｛[（1-苯甲基）-4-哌啶基]甲基｝ -1H-茚-1-酮盐酸盐。过渡金属钯或镍作为催化剂，常应用于偶联反应。偶联反应的反应条件温和，官能团容忍性好，产率高，已成为构建碳-碳键及合成联芳类化合物的重要手段[2-4]。近年来，关于对重金属钯广泛应用于药物、天然产物或功能材料的合成研究逐渐增多[5-6]，口服重金属钯毒性很小，但其静脉注射毒性较口服毒性约大70 倍。本课题组建立了相关动物模型，发现大鼠静脉注射氯化钯（PdCl3）的半数致死量（LD50）为3 mg/kg，动物静脉注射或腹腔注射钯盐可产生蛋白尿和酮体尿阳性。本研究中建立了检测长春西汀等5 种原料药中催化剂钯残留的电感耦合等离子体-质谱（ICP-MS）法。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Thermo icAP RQ 型电感耦合等离子体质谱仪（美国热电公司）；ME204 型电子分析天平（万分之一，梅特勒公司）；IKA® C-MAG HP 7 型电热板（德国艾卡公司）；TTL-10B 型超纯水系统（北京同泰联科技公司）；石英烧杯。

1.2 试药

长春西汀原料（A 企业，批号分别为A01，A02，A03）；托吡酯原料（S 企业，批号分别为S01，S02，S03）；盐酸尼卡地平原料（T 企业，批号分别为T01，T02，T03）；甲磺酸伊马替尼（Y 企业，批号分别为Y01，Y02，Y03）；盐酸多奈哌齐（B 企业，批号分别为B01，B02，B03）；钯标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号分别为GSB 04-1743-2004）；硝酸（色谱级，德国默克公司）；高氯酸（分析级，国药集团化学试剂有限公司）；水为高纯水。

2 方法与结果

2.1 工作条件

射频功率：1 500 W；等离子气流量：15 L/min；辅助气流量：1.02 L/min；泵速：40 r/min；进样延迟时间：30 s；氧化物：CeO+ /Ce+ ＜2%；双电荷：Ce+ + /Ce+ ＜2%；测量模式：KED 模式。

2.2 溶液制备

精密量取钯标准溶液（1 000 μg/mL）适量，用5%硝酸溶液定量稀释，并制成含钯元素质量浓度分别为0.625，1.250，2.500，5.000，12.500 ng/mL 的溶液，作为标准曲线溶液。称取原料药各约0.1 g，精密称定，置石英烧杯中，加硝酸20 mL，放置电热板上，以550 ℃加热溶解后，冷却至室温，加高氯酸4 mL，缓慢加热至体积减少至约2 mL，用高纯水冲洗内壁，转移至50 mL 容量瓶中，加高纯水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。取硝酸20 mL，置石英烧杯中，加高氯酸4 mL，缓慢加热至体积减少至约2 mL，用高纯水冲洗内壁，转移至50 mL容量瓶中，加高纯水稀释到刻度，摇匀，即得空白溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察：取标准曲线溶液进样测定，以钯响应强度（Y）为纵坐标、质量浓度（X）为横坐标进行线性回归，得线性回归方程Y=3.2×104X+1.82×102，R2= 0.9998（n=5）。结 果 表 明，钯 的 质 量 浓 度 在0.625 ～12.5 ng/mL 范围内与响应强度线性关系良好。

检测限与定量限确定：取空白溶液连续测定10 次，记录钯元素强度，计算10 次空白溶液中钯元素浓度的标准偏差，以3 倍标准偏差为检测限，10 倍标准偏差为定量限。结果钯元素检测限为0.003 ng/mL，定量限为0.009 ng/mL。按样品取样量0.1 g 计算，供试品的检测限为1.5 μg/kg，定量限为4.5 μg/kg。

重复性试验：取样品（批号为A02）6 份，称取0.1 g，精密称定，置石英烧杯中，照供试品溶液制备方法操作，测定样品中钯残留量。结果6 份样品中钯残留量均值为222.35 μg/kg，RSD=3.12%（n=6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取样品（批号为A02）约0.05 g，精密称定，加入钯标准溶液（50 ng/mL）100，200，300 μL，每个质量浓度平行制备3 份，照供试品溶液制备方法操作，计算回收率。结果见表1。

表1 钯元素加样回收试验结果（n=9）

2.4 样品含量测定

分别取样品，照供试品溶液制备方法操作，测定样品中钯残留量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

目前，测定钯残留量的方法较多，包括原子吸收光谱法，化学发光分析法等[7-10]。其中，原子吸收光谱法操作简便、快速、准确，应用广泛，但在测定微量及痕量金属时，干扰较大，检测限高。ICP-MS 法测定重金属含量近年来研究与应用广泛，其仪器本身可自动排除共存元素的干扰，具有检测灵敏度低、精密度高、重复性好、测定浓度线性范围宽等优点，同时可测定其他多种重金属含量[11-12]。

《美国药典》通则＜232＞和＜233＞中收录了钯残留量，规定日口服剂量不得超过100 μg，同样推荐使用ICPMS 作为钯残留量的检测方法，其回收率应在70% ～150%。本方法的回收率为96.13% ～98.38%，符合药典要求，可作为原子吸收光谱法的替代和补充。

试验前期准备时，需对所使用的容量瓶、移液管等用品使用10%硝酸浸泡过夜，将试验过程中可能带入的影响降低。在样品制备过程中，使用石英烧杯与电热板对样品进行消解[13-16]，不使用微波消解仪进行消解，操作更简便，也减少样品损耗。本研究中建立了5 种原料药中催化剂钯的ICP-MS 检测方法，该方法可为其他原料药中钯残留量的测定提供参考。