短管兔耳草化学成分的研究（Ⅱ）

张晨辉李 敏谢雄雄张 迟任玲玲朱继孝曾金祥*朱玉野钟国跃

（1.江西中医药大学中药资源与民族药研究中心，江西 南昌 330004； 2.浙江省食品药品检验研究院，浙江 杭州 310052）

藏药是我国传统医药的重要组成部分，尤其对某些特殊疑难病症（如风湿病、心血管病、胃病等）显示出其他药物无可替代的作用［1］。短管兔耳草系玄参科兔耳草属植物Lagotis brevitubaMaxim.的干燥全草，主要分布于青海、西藏、甘肃等地，其应用历史悠久，是著名藏药洪连的基原植物［2］，藏医学在临床上用于治疗肾炎、高血压、动脉粥样硬化症、全身发烧、肺病、湿热泻痢、阴道流黄黑色液物、综合性毒性中毒、心热等［3］，具有极高的药用价值，被《四部医典》列为藏草药之首。现代药理研究表明短管兔耳草具有降尿酸、抗肿瘤、抗炎、保肝等多种生物活性［4-8］。本实验对短管兔耳草的化学成分进行研究，从中分离得到11个化合物，其中，化合物2～4、6～7、10 为首次从该植物中分离得到，化合物1、5、8～9、11 首次从兔耳草属植物中分离得到，可为其开发利用提供物质基础。

1 材料

薄层色谱硅胶及柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；ZF-I 型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）；LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；SZ-93A 型双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；SHB-Ⅲ型循环水式真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；旋转蒸发仪（瑞士步琪公司）；BT25S 型电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；AX-600 型核磁共振波谱仪（以TMS为内标，瑞士布鲁克公司）；YMC-Pack ODS 半制备柱（250 mm×10 mm，5 μm，日本YMC 公司）；YMC C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，日本YMC公司）。试剂均为分析纯（广东汕头市西陇化工股份有限公司）。

短管兔耳草购于成都荷花池药材市场，经江西中医药大学钟国跃教授鉴定为玄参科兔耳草属植物短管兔耳草Lagotis brevitubaMaxim.的干燥全草。

2 提取与分离

取10 kg 干燥全草，粉碎，渗漉，提取液减压浓缩得浸膏，加水混悬至无明显颗粒，石油醚萃取，水层减压浓缩得浸膏（385 g），硅胶拌样，经硅胶柱（200～300 目，二氯甲烷-甲醇＝100∶0～0∶100），得8 个流份（Ⅰ～Ⅷ）。流份Ⅴ经硅胶柱（200～300 目，二氯甲烷-甲醇＝10∶1～1∶5），得10 个流份Ⅴ-1～Ⅴ-10。Ⅴ-6 经ODS 柱（水-甲醇＝80∶20～0∶100），得4 个流份Ⅴ-6-1～Ⅴ-6-4，Ⅴ-6-3经过Sephadex LH-20 柱（二氯甲烷-甲醇＝1∶1），得3 个流份Ⅴ-6-3-1～Ⅴ-6-3-3，Ⅴ-6-3-2经半制备HPLC（甲醇-水＝40∶60），得化合物8（13.6 mg）。Ⅴ-8 经ODS 柱（水-甲醇＝80∶20～0∶100），得4 个流份Ⅴ-8-1～Ⅴ-8-4，Ⅴ-8-3 经过Sephadex LH-20 柱（二氯甲烷-甲醇＝1∶1），得4个流份Ⅴ-8-3-1～Ⅴ-8-3-4，Ⅴ-8-3-2 经 半制备HPLC（甲 醇-水＝45∶55），得化合物 11（57.9 mg）；Ⅴ-8-3-3 经半制备HPLC（甲醇-水＝45∶55），得化合物1（21.8 mg）；Ⅴ-8-3-4 经ODS柱（水-甲醇＝70∶30～0∶100），得4 个流份Ⅴ-8-3-4-1～Ⅴ-8-3-4-4，Ⅴ-8-3-4-2 经半制备HPLC（甲醇-水＝45∶55），得化合物2（11.2 mg）；Ⅴ-8-3-4-4 经半制备HPLC（甲醇-水＝45∶55），得化合物6（7.5 mg）。Ⅴ-10 经硅胶柱（200～300 目，二氯甲烷-甲醇＝20∶1～1∶5），得4 个流份Ⅴ-10-1～Ⅴ-10-4，Ⅴ-10-4 经Sephadex LH-20 柱（二氯甲烷-甲醇＝1∶1），得5 个流份Ⅴ-10-4-1～Ⅴ-10-4-5，Ⅴ-10-4-2 经半制备HPLC（乙腈-水＝20∶80），得化合物10（22.7 mg），经2 次制备（甲醇-水＝40∶60），得化合物9（6 mg）；Ⅴ-10-4-3 经半制备HPLC（甲 醇-水＝45∶55），得化合物 4（941.8 mg）、5（66 mg）；Ⅴ-10-4-4 经半制备HPLC（乙 腈-水＝20∶80），得化合物 3（108.2 mg）；Ⅴ-10-4-5 经半制备HPLC（甲醇-水＝32∶68），得化合物7（27.5 mg）。

3 结构鉴定

化合 物1：白色粉末。ESI-MSm／z：529.5［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.74（d，J＝15.9 Hz，1H，H-7″），7.63（m，2H，H-2″，6″），7.42（m，3H，H-3″，5″），6.54（d，J＝15.9 Hz，1H，H-8″），6.23（m，1H，H-3），5.63（m，1H，H-1），5.10（m，1H，H-4），4.63（d，J＝7.9 Hz，1H，H-1′），4.57（d，J＝11.8 Hz，1H，H-10），4.34（d，J＝11.8 Hz，1H，H-10），4.07（d，J＝8.1 Hz，1H，H-7），3.93（dd，J＝8.1，6.1 Hz，1H，H-6），2.72（m，1H，H-5），2.64（dd，J＝10.9，3.6 Hz，1H，H-9）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：92.9（C-1），140.8（C-3），105.8（C-4），38.0（C-5），83.5（C-6），73.4（C-7），79.4（C-8），49.9（C-9），66.3（C-10），99.8（C-1′），74.7（C-2′），77.9（C-3′），71.4（C-4′），77.9（C-5′），62.7（C-6′），135.7（C-1″），129.3（C-2″），130.0（C-3″），131.6（C-4″），130.0（C-5″），129.3（C-6″），118.7（C-7″），146.6（C-8″），168.2（C-9″）。以上数据与文献［9］一致，故鉴定为baldaccioside。

化合 物2。白色粉末。ESI-MSm／z：493.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.74（d，J＝15.9 Hz，1H，H-7″），7.64（m，H-2″，6″），7.43（m，H-3″，4″，5″），6.59（d，J＝15.9 Hz，1H，H-8″），6.38（d，J＝5.6 Hz，1H，H-3），5.10（m，1H，H-1），5.09（m，1H，H-4），5.05（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），4.77（d，J＝7.7 Hz，1H，H-1′），4.29（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），3.92（m，1H，H-6），3.37（brs，1H，H-7），2.69（m，1H，H-9），2.32（m，1H，H-5）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：95.6（C-1），141.8（C-3），103.7（C-4），39.0（C-5），79.5（C-6），62.8（C-7），63.5（C-8），43.6（C-9），64.5（C-10），100.3（C-1′），74.8（C-2′），77.9（C-3′），71.5（C-4′），78.5（C-5′），63（C-6′），135.8（C-1″），130.0（C-2″，6″），129.4（C-3″，5″），131.6（C-4″），118.6（C-7″），146.7（C-8″），168.4（C-9″）。以上数据 与文献［10］一致，故鉴定为globularin。

化合 物3：白色粉末。ESI-MSm／z：553.0［M＋H］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.69（d，J＝2.0 Hz，1H，H-2″），7.23（dd，J＝8.5，2.1 Hz，1H，H-6″），6.95（d，J＝7.9 Hz，1H，H-5″），6.93（d，J＝12.9 Hz，1H，H-7″），6.35（dd，J＝6.0，1.8 Hz，1H，H-3），5.88（d，J＝12.9 Hz，1H，H-8″），5.08（m，1H，H-4），5.05（m，1H，H-1），4.97（d，J＝12.7 Hz，1H，H-10），4.74（d，J＝7.9 Hz，1H，H-1′），4.21（d，J＝12.7 Hz，1H，H-10），3.95（m，1H，H-6），3.65（brs，1H，H-7），3.88（s，6H，-OCH3），2.66（m，1H，H-5）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：95.6（C-1），141.8（C-3），103.7（C-4），39.0（C-5），79.5（C-6），62.7（C-7），63.4（C-8），43.6（C-9），64.0（C-10），100.2（C-1′），74.8（C-2′），78.5（C-3′），71.6（C-4′），77.8（C-5′），63.0（C-6′），129.2（C-1″），112.0（C-2″），149.7（C-3″），151.7（C-4″），114.9（C-5″），126.2（C-6″），145.3（C-7″），117.4（C-8″），167.9（C-9″），56.3（-OCH3），56.5（-OCH3）。以上数据与文献［11］一致，故鉴定为10-O-［3，4-二甲氧基-（Z）-肉桂酰基］-梓醇。

化合 物4：白色粉末。ESI-MSm／z：553.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.65（d，J＝15.9 Hz，1H，H-7″），7.22（d，J＝2.0 Hz，1H，H-2″），7.17（dd，J＝8.3，2.0 Hz，1H，H-6″），6.96（d，J＝8.3 Hz，1H，H-5″），6.44（d，J＝15.9 Hz，1H，H-8″），6.36（dd，J＝6.0，1.8 Hz，1H，H-3），5.08（m，1H，H-4），5.07（d，J＝5.6 Hz，1H，H-1），5.00（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），4.76（d，J＝7.8 Hz，1H，H-1′），4.28（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），3.95（dd，J＝7.9，1.2 Hz，1H，H-6），3.68（dd，J＝12.0，6.0 Hz，1H，H-7），3.88（s，3H，-OCH3），3.87（s，3H，-OCH3），2.66（dd，J＝9.7，7.6 Hz，1H，H-5）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：95.6（C-1），141.8（C-3），103.7（C-4），39.0（C-5），79.4（C-6），62.8（C-7），63.6（C-8），43.6（C-9），64.3（C-10），100.2（C-1′），74.8（C-2′），78.4（C-3′），71.4（C-4′），77.8（C-5′），63.0（C-6′），128.7（C-1″），111.5（C-2″），150.6（C-3″），152.8（C-4″），112.5（C-5″），124.1（C-6″），146.8（C-7″），116.1（C-8″），168.8（C-9″），56.4（-OCH3），56.5（-OCH3）。以上数据与文献［11］一致，故鉴定为10-O-［3，4-二甲氧基-（E）-肉桂酰基］-梓醇。

化合 物5：白色粉末。ESI-MSm／z：495.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.72（d，J＝16.0 Hz，1H，H-7″），7.63（m，2H，H-2″，6″），7.41（m，3H，H-3″，4″，5″），6.56（d，J＝16.0 Hz，1H，H-8″），4.97（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），4.81（d，J＝9.2 Hz，1H，H-1），4.67（d，J＝7.9 Hz，1H，H-1′），4.22（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），4.19（d，J＝9.2 Hz，1H，H-3），3.91（dd，J＝12.0，1.7 Hz，1H，H-6），3.67（dd，J＝11.9，5.9 Hz，1H，H-7），2.41（dd，J＝9.1，7.4 Hz，1H，H-9），2.07（m，1H，H-5），1.80（m，1H，H-4），1.63（m，1H，H-4）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：98.0（C-1），62.8（C-3），23.9（C-4），38.3（C-5），73.1（C-6），62.3（C-7），63.3（C-8），43.5（C-9），64.5（C-10），99.8（C-1′），74.8（C-2′），78.4（C-3′），71.4（C-4′），77.9（C-5′），63.0（C-6′），135.7（C-1″），130.0（C-2″），129.3（C-3″），131.6（C-4″），129.3（C-5″），130.0（C-6″），146.7（C-7″），118.6（C-8″），168.5（C-9″）。以上数据与文献［12］一致，故鉴定为globularidin。

化合 物6：白色粉末。ESI-MSm／z：523.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.67（d，J＝15.9 Hz，1H，H-7″），7.57（d，J＝8.4 Hz，2H，H-2″，6″），6.96（d，J＝85 Hz，2H，H-3″，5″），6.42（d，J＝16.0 Hz，1H，H-8″），6.36（d，J＝6.0 Hz，1H，H-3），5.00（m，2H，H-1，4），4.99（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），4.75（d，J＝7.9 Hz，1H，H-1′），4.27（d，J＝12.6 Hz，1H，H-10），3.97（d，J＝8.2 Hz，1H，H-6′），3.92（dd，J＝12.0，2.2 Hz，1H，H-6′），3.51（d，J＝6.5 Hz，1H，H-7），2.66（m，1H，H-9），2.30（m，1H，H-5）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：95.6（C-1），141.8（C-3），103.8（C-4），39.0（C-5），79.4（C-6），62.9（C-7），64.3（C-8），43.6（C-9），63.6（C-10），100.3（C-1′），74.8（C-2′），78.4（C-3′），71.4（C-4′），77.8（C-5′），63.6（C-6′），128.3（C-1″），131.1（C-2″），115.4（C-3″），163.2（C-4″），115.4（C-5″），131.1（C-6″），146.5（C-7″），115.8（C-8″），168.9（C-9″），55.9（-OCH3）。以上数据与文献［13］一致，故鉴定为10-O-对甲氧基-（Z）-肉桂酰基-梓醇。

化合物7：黄色粉末。ESI-MSm／z：422.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.67（d，J＝16.0 Hz，1H，H-7），7.18（d，J＝2.0 Hz，1H，H-2），7.14（dd，J＝8.3，2.1 Hz，1H，H-6），6.94（d，J＝8.3 Hz，1H，H-5），6.45（d，J＝15.9 Hz，1H，H-8），5.12（dd，J＝9.9，3.3 Hz，1H，H-4′），3.83（s，3H，-OCH3），3.82（s，3H，-OCH3），1.26（m，3H，H-6′）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：128.9（C-1），111.4（C-2），150.7（C-3），152.8（C-4），112.6（C-5），124.0（C-6），146.4（C-7），116.8（C-8），168.7（C-9），95.8（C-1′），71.6（C-2′），71.0（C-3′），75.5（C-4′），69.4（C-5′），18.2（C-6′），56.4（-OCH3），56.5（-OCH3）。以上数据与文献［14］一致，故鉴定为兔耳草苷B。

化合物8：白色粉末。ESI-MSm／z：310.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.71（d，J＝16.0 Hz，1H，H-7），7.60（m，2H，H-2，6），7.40（m，3H，H-3，4，5），6.55（d，J＝16.0 Hz，1H，H-8），5.12（d，J＝3.7 Hz，0.5H，H-α），4.54（d，J＝7.8 Hz，0.5H，H-β）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：135.7（C-1），129.2（C-2，6），130.1（C-3，5），131.6（C-4），146.5（C-7），118.7（C-8），168.6（C-9），β-D98.3（C-1′），74.8（C-2′），77.9（C-3′），72.0（C-4′），75.4（C-5′），65.1（C-6′），α-D94.0（C-1′），76.2（C-2′），73.8（C-3′），70.7（C-4′），71.8（C-5′），65.0（C-6′）。以上数据与文献［15］一致，故鉴定为6-O-（E）-肉桂酰基-α／β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物9：白色粉末。ESI-MSm／z：520.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.15（d，J＝8.4 Hz，1H，H-5），7.03（d，J＝2.0 Hz，1H，H-2），6.95（d，J＝1.9 Hz，1H，H-2′），6.92（dd，J＝8.3，2.0 Hz，1H，H-6），6.81（dd，J＝8.2，2.0 Hz，1H，H-6′），6.77（d，J＝8.1 Hz，1H，H-5′），4.76（d，J＝4.1 Hz，1H，H-7），4.71（d，J＝4.5 Hz，1H，H-7′），4.25（m，2H，H-9，9′），3.87（s，3H，-OCH3），3.86（s，3H，-OCH3），3.17（m，2H，H-8，8′）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：137.4（C-1），133.7（C-1′），111.6（C-2），110.9（C-2′），150.9（C-3），149.1（C-3′），147.5（C-4），147.3（C-4′），118.0（C-5），116.0（C-5′），119.8（C-6），120.1（C-6′），87.5（C-7），87.1（C-7′），55.5（C-8），55.3（C-8′），72.7（C-9），72.6（C-9′），102.8（C-1″），74.9（C-2″），78.2（C-3″），71.3（C-4″），77.8（C-5″），62.5（C-6″），56.4（-OCH3），56.73（-OCH3）。以上数据与文献［16］一致，故鉴定为松脂酚-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物10：白 色粉末。ESI-MSm／z：692.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：6.73（s，2H，H-2′，6′），6.67（s，2H，H-2，6），4.78（d，J＝4.2 Hz，1H，H-7），4.73（d，J＝4.4 Hz，1H，H-7′），4.26～4.34（m，2H，H-9，9′），3.91～3.95（m，2H，H-9，9′），3.87（s，6H，-OCH3），3.86（s，6H，-OCH3），3.11～3.18（m，2H，H-8，8′）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：133.0（C-1），104.8（C-2，6），149.3（C-3，5），136.2（C-4），87.2（C-7），55.7（C-8），72.8（C-9），56.8（3，5-OCH3），139.5（C-1′），104.5（C-2′，6′），154.4（C-3′，5’），135.5（C-4′），87.6（C-7′），55.5（C-8′），72.9（C-9′），57.0（3′，5′-OCH3），105.3（C-1″），75.7（C-2″），78.3（C-3″），71.3（C-4″），77.8（C-5″），62.5（C-6″）。以上数据与文献［17］一致，故鉴定为syringaresinol-4′-O-β-D-monoglucoside。

化合物11：白 色粉末。ESI-MSm／z：370.0［M＋H］＋。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.59（d，J＝15.9 Hz，1H，H-7），7.37（brs，2H，H-2，5），7.25（d，J＝8.4 Hz，1H，H-6），6.59（d，J＝15.9 Hz，1H，H-8），β-D4.97（d，J＝4.3 Hz，1H，H-1′），α-D4.41（d，J＝11.7 Hz，1H，H-1′），3.81（s，3H，-OCH3），3.79（s，3H，-OCH3）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：126.8（C-1），110.3（C-2），151.0（C-3），149.0（C-4），111.5（C-5），123.1（C-6），144.9（C-7），115.4（C-8），166.6（C-9），55.6（-OCH3），55.6（-OCH3），α-D92.3（C-1′），72.9（C-2′），72.2（C-3′），70.6（C-4′），69.3（C-5′），64.0（C-6′），β-D97.0（C-1′），76.4（C-2′），74.7（C-3′），73.6（C-4′），70.2（C-5′），64.0（C-6′）。以上数据与文献［18］一致，故鉴定为6-O-（3，4-二甲氧基-（Z）-肉桂酰基）-α／β-D-吡喃葡萄糖苷。

4 结论

本研究从短管兔耳草中分离得到了11 个化合物，其中化合物2～4、6～7、10 为首次从该植物中分离得到，化合物1、5、8～9、11 为首次从兔耳草属植物中分离得到，主要为环烯醚萜类、苯丙素类及其聚合物。结合现代药理研究［4-8］，课题组推测苯丙素类及环烯醚萜类化合物可能为短管兔耳草降尿酸、抗肿瘤及保肝活性的物质基础。目前，关于环烯醚萜与苯丙素聚合后形成聚合物的药理研究较少，其与短管兔耳草生物活性之间有何联系也不明确，今后将对两者的关联性进行研究，以期更好地阐释短管兔耳草的活性物质基础。