LTB4和BLT1在类风湿关节炎中的作用

魏志萍

河南护理职业学院，河南安阳 455000

关节炎可以分为炎症性和非炎症性。类风湿性关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎为主要特征的自身免疫疾病，在临床上表现为关节肿胀、畸形，甚至功能丧失[1]。白三烯B4（LTB4）是一种炎症脂质介体，由花生四烯酸经5-脂氧合酶（5-LO）和LTA4-水解酶（LTA4H）作用产生[2]。LTB4 有两个G 蛋白偶联受体：BLT1（高亲和力）和BLT2（低亲和力），并且LTB4 可以诱导趋化性、脱粒和粘附等炎性相关反应[3]。研究发现BLT1 在中性粒细胞上高度表达，并且可以调节LTB4 在中性粒细胞中的活性[4]。经检测，鼠BLT1 与人类BLT1 相似，并且通过对BLT1 缺陷小鼠研究发现，在BLT1 缺陷小鼠的中性粒细胞中LTB4 可发挥全部活性[5]。BLT1除了存在于中性粒细胞中，还可以在巨噬细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、活化的T 细胞以及肥大细胞中表达[6-8]。BLT2 在人的白细胞中大量表达，但在鼠类体内却很难检测到[9]。虽然BLT2 在体内介导LTB4 功能中的作用尚不清楚，但是研究发现BLT2与第二种脂质配体12-（S）-hydroxy-5Z，8E，10E-十七碳三烯酸（12-HHT）的亲和力比BLT1 高[10]。

使用动物模型研究类风湿关节炎的致病机制可为临床治疗提供依据。有研究表明LTB4 和BLT1 在小鼠类风湿关节炎发病机制中具有非常关键的作用[11]。现对LTB4 和BLT1 对类风湿关节炎的作用的最新研究作如下综述，以期为临床治疗类风湿关节炎提供理论基础。

1 LTB4-BLT1在胶原诱导的关节炎中的作用

Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）动物模型在目前研究中广泛使用，通过将完全弗氏佐剂（CFA）与Ⅱ型胶原蛋白（CII）充分乳化，制成CII 乳剂进行皮内注射，进而引发关节炎[12]。C. Han 等[13]通过对大鼠CIA 模型进行研究，发现在CIA 发病早期滑膜中检测到BLT1 mRNA 表达，并且BLT1 在外周血单个核细胞中表达较高。W.H. Shao[14]通过BLT1基因敲除（Blt1-KO）CIA 小鼠研究BLT1 在CIA 发病中的作用，发现Blt1-KO 小鼠体内T 细胞和B 细胞的表达完全无CIA 症状，但其体内抗CII 抗体的表达却与CIA 模型小鼠相一致，这表明BLT1 的抑制与CII 胶原抗体的产生无关。此外，在CIA 模型小鼠的滑膜组织中检测到CD3+T 细胞的表达，在Blt1-KO 小鼠滑膜组织中并未检测到[11，14]。这些数据表明，BLT1 可能通过促使T 细胞进入关节组织，从而在关节炎发病机制中发挥关键作用。

2 LTB4和BLT1在K/BxN血清转移性关节炎中的作用

K/BxN 血清转移性关节炎小鼠模型是将识别MHC II 类分子呈递的牛核糖核酸酶肽的T 细胞受体（TCR）转基因KRN 小鼠与NOD 小鼠交配来制作的，K/BxN 小鼠从约5 周龄起自然发展为关节炎[15]。中性粒细胞进入关节需要BLT1，M. Chen 等[16]经过研究发现，在K/BxN STA 模型中，Blt1-KO 小鼠可以完全抑制关节炎的发展，如果将野生型小鼠的中性粒细胞过继转移至Blt1-KO 小鼠中则可引发小鼠出现关节炎症状，表明在关节炎的发病过程中中性粒细胞是BLT1 的关键应答细胞。此外，5-LO 和LTA4H 作为LTB4 合成的关键酶，在关节炎的发展过程中也发挥着非常重要的作用。如果将野生型小鼠的中性粒细胞过继转移至5-LO 基因敲除（Alox-5-KO）小鼠中同样可引发小鼠出现关节炎症状，表明中性粒细胞也是产生LTB4 的主要细胞[16]。

在Blt1-KO 小鼠中，野生型小鼠的中性粒细胞过继转移可以导致趋化因子的产生，并使Blt1-KO小鼠的中性粒细胞聚集到关节中，该发现首次证明一旦关节炎发病，则BLT1 对于嗜中性粒细胞进入关节不再是必须的，趋化因子可以促进和趋化中性粒细胞进入关节[4]。此外，CC 类趋化因子受体1（Ccr1）和CXC 趋化因子受体2（Cxcr2）基因敲除也可以抑制小鼠关节炎早期和晚期的发展，如果同时敲除CCR1 基因和CXCR2 基因的小鼠完全不会产生关节炎的症状[17]。此外，我们发现C5a-C5aR途径可以诱导中性粒细胞产生LTB4，而ICs 通过激活FcγR 诱导中性粒细胞产生IL-1β[18]。因此，在K / BxN STA 模型中，BLT1 在关节炎发展的早期促使第一个嗜中性粒细胞进入关节，一旦中性粒细胞进入关节，则会激活FcγR 的免疫复合物从而产生IL-1β，进而诱导关节内的细胞（如成纤维样滑膜细胞和巨噬细胞）产生趋化因子如CCR1 配体和CXCR2 配体，促进关节内嗜中性粒细胞的产生和聚集。有研究[19]采用活体多光子成像技术，对K/BxN STA 模型小鼠关节进行观察，从而发现C5aR，BLT1，CCR1 和CXCR2 这四种趋化因子受体协同调节中性粒细胞在IC 介导的关节炎中的产生。在关节炎的起始阶段，由关节内皮产生的C5a 启动嗜中性粒细胞的粘附，随后BLT1 介导的第一个嗜中性粒细胞渗入关节，CCR1 促进嗜中性粒细胞在关节内皮上的附着，而CXCR2 保证了嗜中性粒细胞的存活和增殖活动。

3 LTB4-BLT1在RA发病机制中的作用

LTB4-BLT1 途径在关节炎动物模型中参与类风湿关节炎的发病，并且抑制该途径能够显著改善关节炎症状。因此，探索LTB4-BLT1 在RA 中的作用，可能为RA 的治疗提供新的方向。Gursel 等[20-21]研究表明，RA 患者体内LTB4 表达明显升高，活动期RA 患者血清中LTB4 表达水平显著高于非活动期RA 患者。此外，与骨性关节炎（OA）患者相比RA 患者的滑液中的LTB4 的表达水平显著升高，但是RA 患者外周血液中性粒细胞释放LTB4 的量却与正常中性粒细胞一样[22]。RA 患者滑膜组织中BLT1 和BLT2 mRNA 的表达高于OA 患者，并且BLT2 mRNA 在滑膜内衬细胞（如滑膜巨噬细胞和FLS ）中高度表达[23]。此外，在成纤维样滑膜细胞（FLS）中主要表达的LTB4 受体为BLT2，LTB4 通过BLT2 诱导RA FLS 产生TNF 和IL-1 从而发挥作用[24]。然而，BLT1 mRNA 的表达与关节炎动物模型相似，主要在关节滑液中[23]。

LO 是产生LTB4 所必须的酶，研究表明RA 患者滑膜组织中5-LO 的表达显著高于OA 患者，且5-LO 主要表达于RA 滑膜内衬的巨噬细胞，嗜中性粒细胞和肥大细胞中，经过糖皮质激素治疗可降低RA 关节组织内5-LO 的表达[25]。这些数据表明，LTB4 是在关节内被诱导产生的，并通过其受体BLT1 和BLT2 促进了RA 的发病。

4 结论

LTB4-BLT1 途径对关节炎动物模型及RA 患者均有明显的治疗作用，表明对LTB4-BLT1 途径的阻断可能是RA 等关节炎患者的一种治疗策略。但是，迄今为止的临床试验表明，与传统的DMARDs相比，口服LTB4 受体和5-LO 抑制剂的临床效果并不是太理想，因此有人认为LTB4-BLT1 途径在RA 患者的治疗作用是有限的。但是这并不意味着否定LTB4-BLT1 途径在RA 治疗中的效果，我们可以进行更适合的临床试验的设计，以探索其治疗途径。我们可以通过探索该途径是否仅针对RA 患者的早期阶段，或仅针对血清反应阳性的患者。因此，我们需要进一步的临床研究来阐明LTB4 和BLT1在人类RA 发病机制中的作用。