非洲猪瘟监测样品采集、 保存及运输

丁 飞 李师师 匡利平

（佳和农牧股份有限公司， 湖南长沙 410016）

样品采集是非洲猪瘟疫病监测过程中十分重要的一项内容，样品的质量好坏会直接影响实验室的检测结果。为保证实验室检测结果的准确性，本文从检测样品的采样前准备、采样方法、样品采集与处理、样品的保存与运输等技术环节进行介绍，以供广大畜牧兽医工作者参考和借鉴。

1 采样原则

非洲猪瘟的采样需要关注以下4 个方面：①样本来源全面；②采样方式安全可靠；③采样时间间隔科学合理；④采样数量分批分段。

1.1 样本来源

非洲猪瘟威胁时期，检测对象不仅包括猪只，还应包括猪场环境（如大门、走廊、用具、栏舍、出猪台等），场内工作人员及外来人员、车辆、物资等，通过全方位无死角严格监控，让PCR 检测结果充当“显微镜”“放大镜”。样本来源一般可分为猪只、环境、人员、车辆、物资等5 大类。

1.2 采样方式

猪只样本采集主要包括鼻拭子、猪血液、唾液、组织等，环境、车辆、人员、物资的采样可通过棉拭子蘸取生理盐水后采样。

1.3 采样时间间隔

非洲猪瘟病毒感染的潜伏期为4～19 d，如果在日常监测过程中血液样本中没有检出非洲猪瘟病毒阳性，并不代表猪群绝对安全，有可能正处于疾病潜伏阶段，建议在猪群正常的情况下，采集猪的唾液样本进行PCR检测，每隔21 d 采样检测1 次。

1.4 采样数量及采样频率

不同监测类别、采样对象、样品类型及采样时间见表1。

2 采样前的准备和采样

检测非洲猪瘟病毒需要采集的样本一般分为棉拭子样本和非棉拭子样本2 大类，从外部环境、车辆、人员、物资采集的样本多为棉拭子样本；检测猪只时，采集的样本有棉拭子、血样、唾液、组织等。

表1 不同监测类别、 采样对象、 样品类型及采样时间

2.1 采样前准备

2.1.1 采样人员准备

采样人员必须洗手消毒，戴上一次性PE 手套、一次性口罩，穿上一次性防护服、一次性鞋套，带上采样所需的所有物品到达洗消点。

2.1.2 采样物品准备

医用无菌棉签、装有生理盐水的1.5 mL 离心管、真空采血管、不褪色油性记号笔、离心管盒、手术剪、镊子、75%酒精棉球、喷壶、样品箱、样品密封袋、冰袋、消毒桶等。

2.2 采样方法

2.2.1 环境样本

不同环境样本采样点/区域及采样后处理方法见表2。

2.2.2 人员样本

人员样本采样点/区域、采样方法及采样后处理方法见表3。

2.2.3 车辆及驾驶人员采样

车辆及驾驶人员采样点/区域、采样方法及采样后处理方法见表4。

2.2.4 猪群的采样

猪群采样点/区域、采样方法见表5。

2.2.5 物资样本

物资样本采样点/区域、采样方法及采样后处理方法见表6。

表2 不同环境样本采样点/区域及采样后处理方法

表3 人员样本采样点/区域、 采样方法及采样后处理方法

表4 车辆及驾驶人员采样点/区域、 采样方法及采样后处理方法

表5 猪群采样点/区域、 采样方法

表6 物资样本采样点/区域、 采样方法及采样后处理方法

3 样品的保存和运输

样品采集后须以最快最直接的途径送往实验室。如果样品能在采集后24 h 内送达实验室，则可放在4℃左右的容器中运送。若在24 h 内不能将样品送往实验室，需将样品放置于 -20℃以下冻结保存数小时后再送检，并且保证运输过程中的低温状态（可将样品放置于含有冰袋的保温箱或泡沫箱中密封）。