血液细胞培养及血清降钙素原检测对菌血症的诊断价值

罗春伟

既往，临床上主要是通过体温、红细胞沉降率、C反应蛋白以及白细胞计数等传统诊断指标对菌血症进行诊断，但上述诊断指标存在耗时较长以及敏感性、特异性较低等缺陷，不利于临床应用［1～3］。此外，由于危重症患者普遍存在不同程度的全身炎症反应，加上细菌感染可能与非细菌感染的临床表现相似，易相互混淆，在一定程度上增加了传统诊断指标的局限性。因此，寻找一种更有诊断价值的实验室指标对诊断菌血症具有重要意义。近年来，越来越多的学者发现血清降钙素原（PCT）可能是一具有潜在诊断价值的指标，可作为细菌性感染疾病的早期诊断和鉴别诊断指标［4］。鉴于此，本研究旨在比较血液细胞培养或血清PCT单独及其联合检测对菌血症的诊断价值，为临床提供一种有效的诊断菌血症的方法。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2017年8月～2018年8月我院收治的80例菌血症患者作为试验组。纳入标准［5］：①符合菌血症相关诊断标准，年龄≥18岁；②无临床资料缺失；③入院前已接受相关治疗。排除标准：①因其他原因导致的体温＞38℃；②伴有心、肝、肾等重要脏器功能不全；③无法正常交流或存在精神疾病；④正参与其他研究者。其中男48例，女32例，年龄21～59（38.52±7.45）岁。

另取我院同期接受体检的80例健康者作为对照组。其中男50例，女30例，年龄22～59（38.59±7.48）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。所有研究对象已知情同意，且经医院伦理委员会批准。

1.2研究方法 分别采集试验组发热24、48、72 h时，以及同时点对照组的静脉血5 ml，采用双抗免疫夹心化学发光法检测PCT水平，具体操作以试剂盒说明书为准（试剂为上海酶联生物科技有限公司产品）。同时，使用BacT／ALERT3D分析仪（购自法国生物梅里埃公司）进行试验组发热24、48、72 h时血液细胞培养，采用ATB Expression细菌鉴定分析仪（购自法国生物梅里埃公司）及其配套试剂进行细菌种类的鉴定；对所有实验结果予以全面质量控制，保证实验结果的准确、可靠。

1.3观察指标 分析血液细胞培养诊断菌血症的结果，其标准参照《全国临床检验操作规程》［6］第3版的要求进行，即血液细胞培养鉴定出菌株，且继续培养5 d细胞仍未呈阴性生长。比较发热不同时点两组的血清 PCT阳性率，其阳性标准为 PCT＞0.5μg／L［7］。受试者工作特征（ROC）曲线分析血液细胞培养及血清PCT水平的曲线下面积、敏感度、特异度。

1.4统计学方法 采用SPSS 20.0软件对数据进行分析；计数资料以n（%）表示，行χ2检验；计量资料以±s）表示，行t检验；检测的能效行ROC曲线分析；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1血液细胞培养诊断菌血症的结果分析 试验组发热24、48、72 h时阳性率分别为 28.75%（23／80）、57.50%（46／80）、95.00%（76／80），即随着采血时点的不断延迟，其血培养阳性率随之升高。见表1。

2.2不同时点两组血清PCT阳性率比较 实验组发热24、48、72 h时的血清PCT阳性率分别与同时点的对照组比较，差异有统计学意义（均P＜0.01）。见表2。

2.3诊断菌血症的ROC曲线分析 试验组血液细胞培养联合血清PCT水平检测诊断菌血症的曲线下面积、敏感度、特异度与单独进行血液细胞培养或血清PCT水平检测比较，差异有统计学意义（均P＜0.05）。见表3。

表1 试验组血液细胞培养诊断菌血症的结果分析

表2 两组不同时点血清PCT阳性率比较／n（%）

表3 单独或联合检测诊断菌血症的ROC曲线分析

3 讨论

血培养是目前国内外公认的诊断菌血症的金标准，但该诊断方式所需的时间较长，且受外界多种因素影响，难以达到早期、快速诊断疾病的要求［8］。特别是菌血症患者的临床症状往往不明显，且进展迅速，大部分患者在实验室指标尚未出现阳性结果时，病情已经恶化，从而失去最佳抢救时机，不利于患者预后。目前，我国大多数医疗机构开始实施全自动血培养仪进行血培养，但随着临床医生对首次确诊率的要求逐渐升高，单纯的血培养已无法满足临床需求。因此，寻找一种更加快速、准确、有效的诊断方式显得至关重要。PCT属于一种糖蛋白，亦是降钙素的前体，由116个氨基酸组成，本身无激素活性，在正常状态下主要是由甲状腺滤泡旁细胞内合成，其可在蛋白酶的作用下裂解成为由57个氨基酸组成的氨基PCT、32个氨基酸的降钙素及21个氨基酸的降钙蛋白。不少研究报道证实，PCT可作为全身细菌感染的有效标志物之一。

本研究血液细胞培养诊断结果显示，发热24 h时阳性率为28.75%，48 h时为57.50%，72 h时为95.00%，即随着采血时间的延迟，其血培养阳性率随之升高。这说明血液细胞培养应用于菌血症的诊断中具有一定的价值，但首次阳性率较低，其主要原因有：①采血时间不合理（应以急性发病期或抗生素使用前作为最佳的采血时间）；②血培养瓶质量低下和（或）血培养仪的灵敏度较低；③采血量较少或（和）接种至培养瓶过程中菌株暴露死亡［9］。由此可知，改进上述问题可提高阳性率。本研究血清PCT检测显示，发热24、48、72 h时的血清PCT阳性率分别比对照组高（均P＜0.05），这表明血清PCT水平检测对诊断菌血症具有较高的价值。究其原因，PCT属于11号染色体上降钙素1基因（CALC-1）表达产物之一，其在正常生理状态下，由于甲状腺外CALC-1的表达受到抑制，因此血清中几乎无法检测到PCT，一旦机体处于细菌感染状态时，会诱导全身多种组织的多种类型细胞的CALC-1表达，促进了PCT的连续性释放，导致PCT浓度的急剧增加。另外，在室温条件下体内外的PCT稳定性较好，不易被降解，且不会受机体内激素水平的影响，可于短时间内被检测到。因此，PCT可作为一项有效评估细菌感染的敏感指标，可在细菌感染性发热以及非细菌感染发热中发挥显著的作用［10］。此外，本研究还显示，血液细胞培养联合血清PCT水平检测诊断菌血症的ROC曲线下面积、敏感度、特异度比各自单独检测诊断价值更高。这说明血液细胞培养联合血清PCT水平检测可有效提高早期诊断菌血症的敏感度、特异度。其主要原因可能与上述两种诊断方式具有协同作用有关。

综上所述，血液细胞培养与血清PCT水平检测均可单独作为菌血症的诊断指标，但两项联合检测对诊断菌血症尤具价值。