鼻咽癌患者肿瘤组织中浸润性树突状细胞表面分子表达及临床价值

赵振宇 孙建海

(湖北省第三人民医院肿瘤科，武汉 430033)

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是指位于鼻咽腔顶部、侧壁的恶性肿瘤，我国是鼻咽癌高发国，发病率居耳鼻咽喉部位的恶性肿瘤之首[1]。NPC的临床常见症状为鼻塞、涕中带血、耳闷堵感、听力下降、复视和头痛[2-3]，临床上多采用放疗治疗NPC，放疗后对残余的癌灶可手术切除[4]，对于原发灶已经控制的患者，也可以行颈部淋巴结清除术[5-6]。研究表面，T细胞亚群等组成的免疫系统在恶性肿瘤的发生和发展中发挥了关键作用，树突状细胞(infiltrating dendritic cell，IDC)作为抗原呈递细胞，其增殖和成熟是激活T细胞亚群活化和增殖的重要条件，其表面分子的异常表达参与了恶性肿瘤的发生和发展过程[7-8]。在多种恶性肿瘤组织中已经发现恶性肿瘤组织中肿瘤IDC表面分子表达水平降低，功能低下，导致肿瘤细胞的免疫耐受[9]。本研究检测了患者鼻咽癌组织中IDC的表达，分析IDC表达水平与临床分期、淋巴结转移等的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2013年1月-2018年12月湖北省第三人民医院肿瘤科收治的鼻咽癌患者86例为观察组，同期收集鼻息肉患者86例为对照组。观察组年龄(51.48±3.87)岁，男性52例，女性34例，12例合并高血压病，14例合并高脂血症，3例合并糖尿病；对照组年龄(52.27±4.01)岁，男性55例，女性31例，14例合并高血压病，11例合并高脂血症，4例合并糖尿病。两组患者年龄、性别和合并症差异无统计学意义(P>0.05)。本研究已经征得我院伦理委员会批准。

1.2 纳入标准及排除标准[9]观察组纳入标准：(1)病理诊断明确为鼻咽癌；(2)年龄≥18岁；⑶患者知情同意将病变组织用于本研究。排除标准：(1)鼻咽癌术后复发；(2)合并其他恶性肿瘤；(3)转移性鼻咽部肿瘤；(4)感染；(5)肝肾功能不全；(6)心脑肺等重要脏器功能不全；(7)溃疡性结肠炎等免疫系统疾病；(8)鼻咽部其他重大病变；(9)其他重大病变。对照组为鼻息肉至我院进行手术切除的患者，均无上述重大疾病，亦无其他重大病变，年龄为18～65岁之间，且知情同意参与本研究。

1.3 观察指标临床病理特征：包括临床分期、淋巴结转移和肿瘤细胞分化程度，鼻咽癌组织、鼻息肉组织中IDC密度及其表面分子表达水平，包括MHC-Ⅱ和CD54阳性表达率。取相应组织(鼻咽癌组织或鼻息肉组织)，行免疫组化染色，随机取5个视野(×400)，计算IDC密度，取5个视野的均值作为该患者的肿瘤IDC密度。同时，取相应组织(鼻咽癌组织或鼻息肉组织)，经RPMI1640培养基消化，形成细胞悬液，采用流式细胞仪检测肿瘤IDC表面分子MHC-Ⅱ和CD54的表达水平。

2 结果

2.1 两组患者组织中肿瘤IDC密度及表面分子表达水平的比较与对照组比较，观察组患者肿瘤IDC密度降低，MHC-II和CD45阳性表达率均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度及其表面分子表达与临床分期的关联性不同临床分期的鼻咽癌患者肿瘤IDC密度、MHC-Ⅱ和CD54阳性率间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，表现为临床分期越高，肿瘤IDC密度及MHC-Ⅱ和CD54阳性率越低，见表2。

表1 两组患者组织中肿瘤IDC密度及MHC-II和CD45表达

表2 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度及MHC-II和CD45表达与临床分期的关联性

2.3 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度及其表面分子表达与淋巴结转移的关联性与无淋巴结转移的患者比较，淋巴结转移的患者肿瘤IDC密度、MHC-Ⅱ和CD54阳性率均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度及MHC-II和CD45表达与淋巴结转移的关联

2.4 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度及其表面分子表达与肿瘤细胞分化程度的关联性肿瘤细胞分化程度为中低分化的患者和高分化的患者肿瘤IDC密度、MHC-Ⅱ和CD54阳性率差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

表4 鼻咽癌组织中肿瘤IDC密度和MHC-II、CD45表达与肿瘤细胞分化程度的关联性

3 讨论

肿瘤IDC在其他肿瘤组织中的研究已经肯定了IDC参与了肿瘤细胞的免疫逃脱，但在鼻咽癌患者中缺乏相关研究。本研究结果显示肿瘤IDC密度及其MHC-Ⅱ和CD54阳性率明显降低，且在淋巴结转移和TNM分期高的患者中，这种降低现象更明显。

DC的功能及其在各类疾病中的价值收到越来越多的学者重视。DC是人体功能最强大的抗原呈递细胞，其活化后可以刺激初始型T细胞，启动免疫应答，是特异性免疫启动的关键步骤之一[10-11]。学者发现免疫系统在鼻咽癌的发生和发展中起到关键作用[12-13]。总体表现为免疫力越低，恶性肿瘤病情进展越快；反之，免疫力越高，进展越慢，机体的免疫系统中初始型T细胞可以分化为细胞毒性T细胞，对肿瘤细胞具有较强的杀伤作用。当免疫系统失衡时，细胞毒性T细胞表达水平降低，抑制免疫系统的调节性T细胞水平增高，从而导致肿瘤细胞对免疫系统的免疫耐受，最终导致肿瘤细胞的快速生长和转移。在其他恶性肿瘤患者中的研究发现，恶性肿瘤患者组织中、外周血中DC水平明显降低，且表面分子MHC-Ⅱ和CD54表达率低下[14-15]。MHC-Ⅱ和CD54是DC发挥抗原呈递的关键分子，两者表达率低下，说明DC在恶性肿瘤中不仅表现为数量减少，还多为不成熟的DC[16]。因此，对初始型T细胞的激活能力低下，T细胞不能有效激活，最终导致肿瘤细胞对免疫系统的免疫耐受[17-18]。为此，已有学者提出使用DC干预肿瘤患者的免疫系统，以期改善患者的预后[19-20]。在鼻咽癌患者中，早些年也有研究发现外周血中DC表达低下[21]，但对其表型缺乏进一步研究，且未探讨组织中DC的表达情况，具有一定不足。本研究重点探讨了鼻咽癌组织中肿瘤IDC在鼻咽癌患者中的作用，发现鼻咽癌组织中肿瘤DC表达率低下，MHC-Ⅱ和CD54阳性率降低；并且在淋巴结转移和TNM分期高的患者中，这种降低现象更明显，具有一定的临床意义，为后续的临床干预提供了依据。综上所述，鼻咽癌患者肿瘤组织中肿瘤IDC表达水平降低，多为功能不成熟的细胞，与患者临床病理特征相关，介导了鼻咽癌细胞对机体的免疫耐受。