痰瘀同治法对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

王义强，靳宏光，齐 锋，常立萍*

（长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021）

急性心肌梗死严重影响人类生命健康，及早恢复冠脉血流是治疗的关键，然而缺血心肌血流恢复可能引起一系列的不良事件发生。因此，探讨心肌缺血再灌注损伤的机制并研发有效地防治缺血再灌注损伤的药物是提高疗效的关键。本文通过动物实验，研究中医痰瘀同治法对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与材料

健康雄性SD大鼠50只，体重220～250 g，北京维通利华实验动物公司提供；参红通络颗粒由长春中医药大学附属医院制剂中心提供；肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白T（c-TnT）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 分组及给药

50只SD大鼠随机分成五组，每组10只，A组：假手术组；B组：缺血再灌注组；C组：参红通络颗粒低剂量组；D组：参红通络颗粒中剂量组；E组：参红通络颗粒高剂量组。C、D、E组每次分别给予参红通络颗粒200、400、800 mg/kg，溶于2 mL生理盐水中灌胃，A组、B组给予等量生理盐水，2次/d，连续灌服7天。

1.3 大鼠心肌缺血再灌注模型的制作

2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，固定操作台，胸部术前备皮，记录Ⅱ导联心电图，气管切开插管后接小动物呼吸机，机械辅助通气。沿胸骨左缘0.5 cm切开皮肤，打开胸腔，暴露心脏，剪开心包，暴露动脉圆锥与左心耳根部间的左冠状静脉，以其作为标志，环绕左冠状动脉前降支（LAD）根部用结扎线（穿6/0缝线）在左心耳根部下方2 mm处，以深1.5～2 mm，宽2～3 mm穿过心肌表层，结扎冠状动脉左前降支。线结下置入一个直径约1 mm乳胶管，系紧结扎线，阻断前降支血流。结扎后，迅速将心脏送回胸腔，并挤出胸腔内的空气，关闭胸腔。结扎30 min后剪开结扎线，抽出乳胶管再灌注，造成心肌缺血再灌注损伤模型（假手术组只穿线不结扎），再灌时再次记录Ⅱ导联心电图。缺血及再灌注造模成功的标志是心电图ST段变化和心肌颜色的改变，结扎前降支后心电图ST段抬高大于0.2 mV，局部心肌颜色变灰，再灌注时抬高的ST段回落大于50%，局部心肌颜色变红[1]。

1.4 观察指标

血清CK-MB、cTnI水平的测定；再灌注180 min后，立即腹主动脉取血2 mL，按试剂盒说明检测血清CK-MB、cTnI水平。

1.5 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以“±s”表示，采用t检验；计数资料以例数（n），百分数（%）表示，采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

参红通络颗粒对心肌缺血再灌注大鼠血清CK-MB、cTnI含量的影响，B、C、D、E组血清CK-MB、cTnI水平显著高于A组（P＜0.01），而不同剂量参红通络颗粒组再灌注后血清中CK和cTnI的含量与IR组比较，差异有统计学意义（P＜0.05；P＜0.01）。见表1。

表1 各组大鼠血清CK-MB、cTnI含量比较（±s）

表1 各组大鼠血清CK-MB、cTnI含量比较（±s）

注：与A组比较，*P＜0.01；与B组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

A组 B组 C组 D组 E组CK-MB 412.3±56.8 1720.8±332.1* 1127.9±296.7*△ 1076.5±289.6*△△ 832.3±215.0*△△cTnI 4.33±1.78 65.87±12.65* 47.23±12.87*△ 35.17±14.26*△△ 28.68±13.72*△△

3 讨 论

心肌缺血再灌注损伤是指冠脉血管部分和（或）完全急性闭塞后，短时间内重新获得再通时，缺血的心肌虽然恢复正常灌注，而心肌组织损伤反而呈进行性加重的过程。大量的基础研究证实，运用活血化瘀方法可有效改善再灌注损伤[2-3]。

中医学认为心肌缺血再灌注形成之后，其病机是本虚标实，本虚为气虚、阳虚、阴虚；标实为痰浊、气滞、血瘀，我们结合已故国医大师任继学教授提出的伏邪理论，并结合国家中医临床研究基地阶段性研究成果，认为痰瘀是心肌缺血再灌注损伤发生发展过程中的重要病理因素。在心肌缺血再灌注的发生发展过程中，痰瘀是自始至终存在的病理状态，在临床前期（心肌缺血再灌注前），痰瘀蕴结成毒，伏于血络；临床期（心肌缺血再灌注后）痰瘀伏络，久而不愈，壅塞脉络，正不胜邪，触动而发。因此有效的干预痰瘀伏邪是治疗心肌缺血再灌注损伤的有效方法。参红化浊通络颗粒根据痰瘀伏于人体至虚之处的特点，由人参、红景天、瓜蒌、半夏、丹参、水蛭、降香等组成，具有益气活血、豁痰通络之功，方以人参为君药，大补元气，尤补脾肺之气，脾为生痰之源，肺为储痰之器，因气能生血，亦能行血，故脾肺气血充足，痰浊不生，行血有力；丹参、红景天为臣药，健脾益气，活血化瘀；佐以瓜蒌、半夏、水蛭等以健脾燥湿，行气豁痰，活血定痛；使之以降香，取其走窜通行，引诸药归心经，入血络，使药效直达病所。我们在前期的研究中已证实，基于痰瘀伏邪理论指导的参红通络颗粒对血脂异常及颈动脉粥样硬化均具有较好的临床疗效。本研究发现，参红通络颗粒可以明显降低心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤标志物水平，对缺血心肌具有保护作用。