血浆可溶性脂蛋白受体相关蛋白1水平与冠心病严重程度的关系*

田雅楠，胡 娜，史 菲，宋海玖，丁振江△，孙王乐贤，单伟超，张 英

(1.承德医学院附属医院本部心脏内科，河北承德，067500；2.承德医学院附属医院南区心脏内科，河北承德，067500；3.河北省承德市中医院内一科 067500)

探寻新的生物标志物以协助诊断冠心病和评估其风险一直是近些年研究热点[1]。低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoprotein receptor-relatedprotein-1,LRP-1)是低密度脂蛋白受体家族(LDL receptor super family,LDLRs)中的功能最多的一员，是在所有细胞均有表达的跨膜受体。多项研究表明LRP-1发挥着促进动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进展和抗AS形成的双重作用[2-7]。近期研究发现，LRP-1的可溶性形式sLRP-1可能是一种新的AS标志物[8]。本研究通过测定在承德医学院附属医院心内科接受冠脉造影的患者血浆sLRP-1水平，旨在探讨sLRP-1与冠心病临床和冠状动脉病变严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年6-11月在承德医学院附属医院心内科病房接受冠脉造影的250例住院患者。其中对照组(50例)，经冠脉造影排除冠状动脉粥样硬化，冠心病患者200例。将冠心病患者分为稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)组42例和急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)组158例。据冠状动脉造影结果分为单支病变组(67例)、双支病变组(48例)、三支病变组(56例)和左主干病变组(29例);根据冠状动脉造影Gensini积分，采用三分位数法将患者分为三组:冠状动脉造影Gensini积分4～42分为低Gensini分值组(66例)，Gensini积分43～78分为中Gensini分值组(67例)，Gensini积分79～130分为高Gensini分值组(67例)，具体临床资料见表1。SAP的诊断根据人民卫生出版社出版的《内科学》第9版：有劳力性心绞痛的症状，冠状动脉造影显示存在直径狭窄程度大于或等于50%的稳定性病变。ACS的诊断标准按美国心脏病学会/美国心脏病协会(ACC/AHA)制定的诊断标准(2007年)，所有患者均有阵发性或持续性心前区疼痛，并经冠脉造影、心电图、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(CTNI)等检查确诊。ACS的患者选取冠状动脉造影显示存在直径狭窄程度大于或等于50%的病变或不稳定性斑块。排除标准：(1)入院前2个月服用过抗生素及炎症抑制药；(2)合并感染性疾病、风湿免疫性疾病、甲状腺疾病、发热、恶性肿瘤以及严重肝、肾及其他器官功能不全、脑血管及周围血管疾病、阿尔茨海默病；(3)合并有外伤手术；(4)合并休克、弥散性血管内凝血等危重状态；(5)不愿意接受冠脉造影者等。

1.2 方法 所有入选患者入院次日清晨空腹采集外周静脉血4 mL，室温下静置20 min后于3 000 r/min离心12 min分离血浆。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中sLRP-1水平。sLRP-1 ELISA试剂盒购自上海蓝基生物有限公司，货号E01S0268，生产批号20180917。所有入选患者常规检测身高、体质量、肝肾功、血脂、血糖和记录病史。

1.3 冠状动脉造影和冠状动脉Gensini积分 冠状动脉造影采用Judkins 法，由至少两位医师独立分析冠状动脉病变情况，以病变血管段与参照血管段直径百分比计算狭窄程度，以直径狭窄程度大于或等于50% 定义为冠状动脉病变。根据病变累及的范围，将病变严重程度分为单支病变、双支病变、三支病变及左主干病变组。依据以下方法计算Gensini积分[9]：首先根据冠状动脉直径狭窄程度制订不同的权重系数：≤25%，为1分；26%～50%，为2分；51%～75%，为4分；76%～90%，为8分；91%～99%，为16分；100%为32分。再根据病变在每个分支的不同节段制订不同的权重系数：LM为5分；LAD近段、中段和远段分别为2.5分、1.5分和1.0分；LCX近段和远段分别为2.5分和1.0分；RCA、第一对角支、钝缘支、心尖支、后降支为1.0分；后侧支、第二对角支为0.5分。最后将狭窄权重系数与节段权重系数相乘，总分为各分支血管积分之和。

2 结 果

2.1 所有入选患者的一般资料 对照组、SAP组及ACS组患者一般资料比较，三组间性别、年龄、吸烟史、体质量指数(BMI)、冠心病家族史、冠心病危险因素差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 所有入选患者一般临床资料比较

FPG：空腹血糖；TC：总胆固醇；TG：三酰甘油；HDL-C：高密度脂蛋白；LDL-C：低密度脂蛋白

2.2 不同冠心病临床严重程度组血浆sLRP-1水平的比较 对照组、SAP组、ACS组患者血浆lg sLRP-1水平组间比较差异有统计学意义(F=30.51，P<0.05)。ACS组血浆lg sLRP-1水平高于对照组及SAP组(P<0.05)，而SAP组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 不同冠状动脉病变支数血浆sLRP-1水平的比较 单支病变组、双支病变组、三支病变组、左主干病变组患者血浆lg sLRP-1水平组间比较差异无统计学意义(F=1.41，P>0.05)。见表 3。

表2 不同冠心病临床严重程度组血浆sLRP-1水平(μg/mL)

a：P<0.05，与对照组比较；b：P<0.05，与SAP组比较

表3 不同冠状动脉病变支数血浆sLRP-1水平的比较(μg/mL)

2.4 冠心病不同 Gensini 积分组血浆sLRP-1水平的比较 冠心病患者低Gensini分值组、中Gensini分值组、高Gensini分值组血浆lg sLRP-1水平组间比较差异无统计学意义(F=0.16，P>0.05)。见表4。

表4 不同Gensini积分分组血浆sLRP-1水平的比较(μg/mL)

3 讨 论

准确评估冠心病的严重程度对临床治疗和判断预后有着重要的意义。本研究结果显示，ACS患者血浆中sLRP-1水平明显高于SAP组和对照组，说明sLRP-1能反映冠心病的临床严重程度。LRP-1的两个主要功能是内吞其众多配体如脂蛋白(VLDL、LDL)、蛋白酶/抑制剂复合物(MMP9、MMP13、TSP2/MMP2等)、细胞因子和生长因子(PDGF、TGF-β)等和调控血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)和转化生长因子-B(TGFB)两个信号通路[10]。膜型基质金属蛋白酶(MT-MMPs)和炎症因子可使LRP-1完整的α链脱落入血浆，形成sLRP-1，其拥有着全部LRP-1的配体结合位点，可作为细胞表面LRP-1配体清除的竞争性抑制剂[11]。sLRP-1本身可作为炎症因子，通过激活P38 MAPK、JNK 和IKK-NF-κB通路，诱导TNF-α、MCP-1/CCL2的表达[12]。本研究发现sLRP-1在ACS患者血浆中升高，推测其机制可能是通过抑制MMPs的清除和诱导TNF-α、MCP-1/CCL2等炎症因子的表达，参与ACS的发生和发展。

本研究结果显示，冠心病患者血浆sLRP-1与冠脉病变支数及Gensini积分无关，故不能反映冠状动脉粥样硬化严重程度。LRP-1的功能取决于其配体的类型。研究发现，LRP-1内吞是胆固醇脂进入细胞的重要途径，与其他LDLR不同的是，LRP-1的内吞不受细胞内脂质浓度的负反馈调节[2]，LRP-1通过12/15-脂氧酶参与LDL的氧化过程[3]，且LRP-1在血管平滑肌细胞聚集形成泡沫细胞的过程中发挥重要作用[4]，故LRP1一直被认为起促进AS进展的作用。然而其他研究发现，巨噬细胞LRP-1基因敲除小鼠的动脉粥样硬化病变反而更加严重[5]，这些巨噬细胞的炎症因子如白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达增加[6]。文献[7]也证实，LRP-1发挥着抗AS的作用。由此可见，LRP-1在AS中发挥着双重作用。sLRP-1拥有LRP-1全部的配体结合位点，推测sLRP-1在冠状动脉粥样硬化中也发挥着双重作用。此外，有报道sLRP-1在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者的肺泡灌洗液中表达明显升高，表明sLRP-1为急性炎性反应的指标[13]。AS为多种炎症因子参与的慢性炎症性疾病，虽然LRP-1参与了AS的形成、发生和发展，但sLRP-1作为一种急性炎症因子，可能在AS的发生、发展中无明显变化，因此与冠状动脉粥样硬化病变严重程度无明显相关性。