牙周机械治疗对牙周病患者龈沟液中碱性磷酸酶水平的影响

哈丽娅， 古丽努尔·阿吾提， 徐 隽， 赵 今

(新疆医科大学第一附属医院牙周黏膜科， 乌鲁木齐 830054)

牙周病是一类牙周组织的慢性感染性疾病，牙菌斑是牙周病的始动因子[1]。ALP为成骨细胞的功能酶, 是成骨细胞成熟的标志, 与骨组织钙化密切相关。GCF中ALP来自牙周膜细胞和细菌的几种同工酶, 多是龈下G-菌代谢产生，牙周膜细胞中本身就含有大量的ALP, 当牙周膜细胞破裂或通透性增高时, 外溢到龈沟液内[2]。牙周机械治疗是当前牙周疾病治疗的主要方式[3]。本研究旨在评估牙周机械治疗前后牙周病患者龈沟液中的ALP的活性，为在一定程度上借助龈沟液ALP活性监测牙周基础治疗效果提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2017年9月-2018年12月就诊于新疆医科大学附属口腔医院牙周科的患者65名为研究对象，男性38名，女性27名，平均年龄(47.38±11.45)岁。纳入标准[4]: (1)就诊前12个月内未进行过牙周治疗, 近3个月内未服用抗生素, 无明显错牙合畸形、开口呼吸、口内剩余牙数不少于24颗; (2)患者除患牙周病外全身健康, 无糖尿病、心血管疾病和血液性疾病等系统性疾病；(3)女性非月经期、妊娠期, 并无口服避孕药史; (4) 无吸烟史。本研究开始前获得新疆医科大学生物医学伦理委员会审查批准，所有患者进入试验前均签署知情同意书。

1.2 分组方法参照1999年国际牙周病分类研讨会制定的标准[5]将纳入研究的65名牙周病患者分为3组，其中牙龈炎组20名，慢性牙周炎(CP)组27名， 侵袭性牙周炎(AgP)组18名。

1.3 方法

1.3.1 检查方法 所有研究对象在治疗前和牙周机械治疗2个月后接受全口牙周状况检查及记录，包括:全口菌斑指数(plaque index， PLI)、出血指数(bleeding index，BI)、探诊深度(probing depth, PD)，所有检查均由同一名有经验的医师完成。

1.3.2 龈沟液采集方法[6]所有研究对象治疗前选最深位点采集龈沟液，取样位点无龋齿、不良修复体和食物嵌塞。取样前30 min用AE240电子天平称取2 mm×10 mm自制滤纸条的重量。患者漱口后隔湿取样位点,用尖探针刮除龈上菌斑，气枪吹干牙面，将称重后的滤纸条插入患者龈下至遇轻微阻力为止，30 s后取出再次称重后密封于Ep管，记录其差值，-70℃低温保存。治疗前和治疗后2个月的GCF均在每位对象的同一位点取样。

1.3.3 牙周机械治疗方法 所有研究对象治疗前龈沟液采集后开始接受牙周机械治疗，包括龈上洁治术、局麻下分象限超声+手工龈下刮治和根面平整术，治疗后每两周进行牙周维护，包括口腔卫生指导和预防性洁治，机械治疗2个月后采集患者同一位点的龈沟液样本。

1.4 患者龈沟液中ALP活性的测定方法[7]采用磷酸苯二钠法检测样本中ALP活性。将储存好的样本从-70℃冰箱中取出, 室温解冻, 再加入100 μL PBS, 在4℃1 200 r/min离心10 min , 取10 μL上清液，按ALP活性测试试剂盒说明书方法操作检测ALP活性。

2 结果

2.1 3组患者牙周机械治疗前和治疗2个月后取样位点的牙周临床指标的比较与治疗前比较，3组患者GCF取样点牙周临床指标PLI、PD、BI均降低，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 3组患者治疗前后GCF取样位点牙周临床指标的比较

注：与治疗前比较，*P<0.01。

2.2 3组患者治疗前后GCF中ALP活性的比较与治疗前比较，牙周机械治疗2个月后牙龈炎组、CP组和AgP组患者GCF中ALP活性均降低, 差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 3组患者治疗前后GCF中ALP活性的比较

注：与本组治疗前比较，*P<0.05。

2.3 3组患者GCF中A LP活性与BI、PD的相关性牙龈炎组、CP组、AgP组患者GCF中ALP活性与PD呈正相关，r分别为0.996、0.90和0.968 , ALP活性与BI无相关性，见表3。

表3 各组GCP中ALP水平与牙周临床指标的相关性

3 讨论

流行病学及微生物学研究表明, 菌斑微生物与牙周炎发病密切相关[8-9]。本研究结果表明, 牙龈炎组，CP组和AgP组患者的ALP活性、PLI、PD、BI在牙周机械治疗后2个月均比治疗前降低,证实牙周基础治疗可获得较满意的临床效果，说明牙周病患者经过牙周基础治疗后, 临床症状明显好转, 牙周临床指标均有不同程度下降, 这与Dougudomdacha等[10]的报道基本一致。ALP是一种非特异性的水解酶, 能够将对应底物去磷酸化, 即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去, 生成自由羟基和磷酸根离子, 这类底物包括多种蛋白、核酸、生物碱, 也是较早用于临床诊断的酶。牙周膜细胞中含有丰富的碱性磷酸酶, 发生炎症时牙周组织破坏, 牙周膜细胞破裂, 释放出ALP, 龈沟液内ALP水平升高[11-12]。

本研究显示，GCF中ALP水平和牙周袋深度呈正相关且具有统计学显著性，提示牙周袋越深，ALP水平越高，牙周病的程度越重[13]。牙周机械治疗后，3组的ALP活性均降低，在牙龈炎组中变化最大，其次是CP组，然后是AgP组。这与洁治、刮治和根面平整术后牙龈炎组疾病炎症明显减轻相一致，因为与CP和AgP不同，牙龈炎不涉及更深的牙周组织，局部因素和促进炎症的微生物量可以更有效地去除[14]。然而，在AgP病例中单独刮治和根面平整术不能改变宿主免疫缺陷和组织侵袭性微生物的存在[15]。因此，牙周机械治疗不能完全有效地控制侵袭性牙周炎，这也与本研究究发现的龈沟液中ALP水平变化最小的结果一致。

综上所述，GCF中ALP活性在牙龈炎，慢性牙周炎和侵袭性牙周炎病例中增加，并且在牙周机械治疗后显著降低。这表明ALP水平在一定程度上可以作为疾病风险标志物，其变化有助于监测治疗结果。