1例抗E、抗N、抗Dia三抗联合疑难配血分析

王晓宁，孙 岩，卢伟伟，刘 冰

(吉林大学第一医院 输血科，吉林 长春130021)

1 案例分析

患者，男，65岁，因血友病贫血入院，常规进行输血检测时发现患者血型：O型 RhD阳性、不规则抗体筛查阳性。进一步鉴定抗体，并进行交叉配血试验，满足患者输血需求。

1.1 试剂与仪器

抗-A、抗-B试剂(批号 20170509、20190510)(上海血液生物医药有限公司)、抗-N 试剂(批号20160811、20180810) (上海血液生物医药有限公司)、抗-M试剂(批号20161221、20181220) (上海血液生物医药有限公司)、抗-D(IgM)试剂(批号20161811、20181114) (上海血液生物医药有限公司)、抗-C 试剂(批号20163003、20181103) (上海血液生物医药有限公司)、抗-c 试剂(批号20163103、20181106) (上海血液生物医药有限公司)、抗-E 试剂(批号20163202、20181106) (上海血液生物医药有限公司)、抗-e 试剂(批号20163303、20181227) (上海血液生物医药有限公司)、ABO 反定型试剂 (批号20185313、20180712) (上海血液生物医药有限公司)、筛选细胞(批号20187014、20180717) (上海血液生物医药有限公司)、谱细胞 (Saquin)(批号8000248526、20180705)、谱细胞 (REAGENS)(批号731811、20180716)、抗-Dia (批号8000238598、8000232510)(上海血液中心自制) 、抗球蛋白试剂(批号20165002、20180725) (上海血液生物医药有限公司)、抗-IgG(批号20175102、20190629) (上海血液生物医药有限公司)、抗-C3d(批号20165201、20180727) (上海血液生物医药有限公司)、聚凝胺试剂 (批号20167507、20181208) (上海血液生物医药有限公司)、细胞洗涤离心机(日本久保田)、水浴箱。

1.2 方法抗体

血型鉴定均采用试管法，鉴定采用试管法、抗人球蛋白法，交叉配血采用盐水、聚凝胺、抗人球蛋白法互相验证[1]。

2 结果

2.1 血型鉴定

ABO血型、M、N型血清学测定，结果见表1，Rh五分型、Dia 、Dib血清学测定结果见表2。

表1 ABO血型血清学测定结果

表2 Rh五分型、Dia血清学测定结果

综合表1、表2血清学结果分析，患者血型为：O型、“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”。

2.2 抗体筛查及鉴定结果

2.2.1不规则抗体筛选试验

试管法进行不规则抗体筛选试验，结果见表3。

表3 不规则抗体筛选结果

在盐水介质中，通过抗筛谱分析发现抗-N抗体，进一步进行谱细胞鉴别，鉴定其抗体的特异性。

2.2.2谱细胞鉴定试验

应用匈牙利进口谱细胞(REAGENS)(批号731811、20180716)鉴别其抗体的特异性，结果见表4(患者自身IS、抗人球卡、-2ME卡法中均阴性)。

表4 谱细胞鉴定结果

进口谱细胞与患者血清反应,反应格局见表4。结果表明存在抗-E 抗体(IgG),抗-N抗体(IgM)，抗-Dia抗体(IgM)。

2.2.3谱细胞排除抗体

由于抗-E抗体经常联合抗-c抗体[2]，因此为保证患者输血安全，进一步排除了抗-c抗体。

2.3 交叉配血结果

筛选O型，“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”献血员，与患者标本进行交叉配血。采用盐水介质、聚凝胺、抗人球蛋白卡法三种方法配血，结果相合。

3 讨论

本次案例是一例罕见的三抗联合的配血案例，患者先后产生了抗-E抗体、抗-N抗体、抗-Dia抗体。抗-E抗体是Rh血型系统中较为常见的血型，根据国内相关报告，RhE抗原阴性人群比例约为46%[3]，产生输血反应的案例也有很多报道。随着对抗体筛查和Rh同型输注问题的重视，这类问题在逐渐减少。

本案例中单克隆检出抗-N，抗-N同抗-M比起来相对稀少[4，5]，通过2-ME破坏发现为IgM的抗-N,大多数抗-N是天然抗体IgM型,在25℃以上没有活性，37℃凝集消失，因此在抗人球介质中IgM的抗-N一般不会发生明显的配血不合现象。但国内也有IgM型抗-N抗体导致交叉配血的案例分析[6]。因此单一使用抗人球法配血，将会漏检部分盐水，因此针对盐水抗筛阳性的配血案例，要选用多种介质进行交叉配血试验，保证试验的准确性，避免因输血而产生相关抗体，提高输血安全。

根据 Layrisse等的描述Dia是1955年在委内瑞拉的一个家系中发现[7]。随着研究的深入，发现这一血型和南美印第安人关系密切，而在欧洲血统的人群中罕见[7，8]。1967年Thompson等报道了有两例可检测其对偶抗原Dib的抗体[9]。根据Dia的分布及频率大量研究发现，它可以作为人类学的标记。Dia几乎是蒙古人种中独有的，而在那些罕见的例外中,往往难以排除蒙古血统祖先的存在。在东南亚人群中，Dia的频率从2%-12%不等[10]，中国约为5%[11]，日本人中的频率比中国人群稍高约为10%[12]。因此在献血员中筛选Dia (-)的血并不困难，在12袋O型献血队员中筛选“CCDee/MM”、Dia (-)的红细胞悬液1袋，应用盐水、聚凝胺、抗人球卡法三种配血方式配血，主侧、次侧均无凝集、无溶血，配血相合。3天后，患者再次提出输血要求，复查盐水抗筛：凝集减弱为1+，认为为患者选取的“CCDee/MM”、Dia (-)血液，有很好的输注效果。

综上所述，在抗体筛选和交叉配血时，不能单一依靠一种方法，不同的方法对不同类型的抗体的敏感度不同，可能漏检抗体或造成假阴性结果。