抗生素对尿干化学蛋白检测影响分析＊

赵 嫚 袁绪龙 李和楼 刘庆华 张 曼

1.山东第一医科大学第二附属医院，山东 泰安 271000； 2. 首都医科大学附属北京世纪坛医院，北京 100038； 3. 尿液细胞分子诊断北京市重点实验室，北京 100038

尿蛋白是尿液化学成分检查中的重要项目之一，对尿蛋白的检测能够对肾脏及全身其他系统的疾病进行早期排查。正常情况下，由于尿蛋白可被重吸收，因此在健康成人尿中含量很少，为30～130 mg/24 h，当含量异常增加时，能为肾脏、泌尿系统疾及肾脏外疾病的诊断提供较有价值的信息[1]。目前，临床上检查尿蛋白最为常用的方法是尿干化学法，但是这种检测方法易受各种因素的影响而出现假性结果。且目前关于抗生素对尿干化学检测尿蛋白影响的相关研究较少，因此本研究进行相关统计，结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

随机收集2018年8月—2019年1月来我院就诊并进行尿液检查的患者尿液标本1242例，年龄12～78岁。其中，男性585例，女性657例。采样过程严格按照操作规范完成，务必做到清洁，男性避免尿液标本中混入精液或前列腺液，女性避免混入阴道分泌物。送检尿液按要求收集并倒进试管，贴好标签，送到检验科，2 h内检测完并报告。

1.2 检验方法

尿干化学试纸法：采用的仪器为尿干化学分析仪Mejer-700,严格按照尿干化学分析仪的使用操作说明进行规范操作，仪器做好日常保养及质控，结果分为-，+，2+，3+表示。磺基水杨酸法：(1)取3～5 ml新鲜尿液加入试管。(2)滴加磺基水杨酸溶液3～4滴，形成界面。(3)立即观察，如有浑浊，提示尿液中含有蛋白质，浑浊深浅表示含量的多少 ，结果分为-，+，2+，3+表示。尿全自动沉渣法：采用的仪器为尿沉渣分析仪Cobio-xs，尿沉渣分析仪按操作SOP操作文件进行，做好机器保养和质控。人工显微镜镜检法：使用显微镜为日本奥林巴斯显微镜BX-51, 按《全国临床检验操作规程》操作。尿液用一次性吸管反复吹打混匀，然后取一滴尿液滴于玻片上，将玻片置于显微镜下观察计数。

1.3 观察指标与评价标准

(1)干化学法：蛋白阴性；(2)磺基水杨酸法：阴性，清晰不显浑浊；(3)尿沉渣分析仪法，管型 0～1/μl，超过此范围视为阳性；(4)镜检法：管型 0～1 /μl，超过此范围视为阳性。

1.4 统计学处理

以SPSS18.0统计学软件进行数据分析，用χ2检验比较数据，以P≤0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 干化学法测蛋白、磺基水杨酸法测蛋白、尿沉渣自动分析仪和人工显微镜检尿管型结果

干化学法测尿蛋白的阳性率为28.74%，磺基水杨酸法测尿蛋白阳性率为36.07%，尿沉渣仪测管型阳性率为13.12%，显微镜检管型阳性率为7.97%，磺基水杨酸法测尿蛋白阳性率最高，显微镜测管型阳性率最低，见表1,差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 4种检测方法检测尿液结果[n(%)]

2.2 干化学法与磺基水杨酸法测尿蛋白检测结果的比较

在检测的1242份随机尿标本中，干化学检测法阳性(1+～3+)、磺基水杨酸检测法阴性的有12份；干化学检测法阴性、磺基水杨酸检测法阳性(1+～3+)的有103份，见表2，两种方法的检测结果之间差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 干化学法与磺基水杨酸法尿蛋白检测结果的比较 (n)

2.3 抗生素对尿干化学蛋白检测的影响

选取尿干化学检测法与磺基水杨酸检测法均阳性,且使用头孢抗生素治疗的患者65例，分别在头孢抗生素使用前、使用2 h、使用4 h、使用6 h后用尿干化学法和磺基水杨酸法检测尿蛋白。使用头孢抗生素2～4 h对干化学尿蛋白检测会造成假阴性，6 h后影响作用消失。而使用头孢抗生素2～6 h对磺基水杨酸法检测尿液蛋白均没有干扰作用，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 抗生素对尿干化学蛋白的干扰 [n(%)]

3 讨 论

干化学法检测尿蛋白原理:是利用了pH指示剂蛋白质误差法，在pH 3.2的条件下四溴酚蓝产生阴离子，与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化，颜色深浅与蛋白质含量成正比[2]。磺基水杨酸法测尿蛋白原理：蛋白质等电点原理，易促使蛋白形成不溶性沉淀，磺基水杨酸为微生物碱，在酸性条件下，其阴离子可与带正电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀[3-4]。本研究发现磺基水杨酸法测尿蛋白阳性检出率明显高于尿干化学蛋白检测法，有文献报道，尿干化学法对清蛋白敏感，对球蛋白不敏感，且可漏检本周氏蛋白，而磺基水杨酸法与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周氏蛋白等均能发生反应[5]。

管型是蛋白质、细胞及其崩解物在肾小管、集合管内凝固而成的圆柱形蛋白聚体[6]，它的检测对肾脏实质性疾病诊断、治疗和预后观察均有重要意义。本研究发现造尿沉渣分析仪检测管型假阳性率偏高，尿沉渣仪检测管型是应用数码照相机对每份标本捕捉一定数量的数字化画面，然后由自动微粒识别软件进行镜检图像分析处理，模仿人工显微镜镜检方式[7-9]。人工显微镜检法为镜检管型的确证方法，操作简单，但是存在操作繁琐，效率低下的缺点。造成尿沉渣分析仪检测管型假阳性率偏高的原因多为上皮细胞、黏液丝、棉毛、麻纤维等类管型异物、细菌团、非晶形尿酸盐结晶、非晶形磷酸盐结晶和真菌菌丝等[10]，大量白细胞或红细胞有时也可导致仪器病理管型检测结果假阳性。

临床上常常使用大剂量抗生素进行抗感染治疗，头孢类抗生素是广泛使用的一种抗生素。头孢菌素类分子中含有头孢烯的半合成抗生素，属于β-内酰胺类抗生素[11-12]，对细菌的选择作用强，具有抗菌谱广、抗菌作用强、耐青霉素酶、过敏反应少等优点,是一类高效、低毒的重要抗生素。陈克[13]研究发现:使用头孢抗生素1～24 h可以使尿蛋白检测结果出现假阳性，而刘云芳[14]则报道:头孢唑林可使尿蛋白测定结果阳性程度降低。本实验研究发现，尿干化学检测法中，头孢类抗生素使用2～4 h后，尿蛋白阳性率明显降低，在4 h后，假阴性率明显升高，6 h后影响作用消失，但使用头孢抗生素2～6 h对磺基水杨酸法检测尿液蛋白均没有干扰作用。这与刘云芳的研究相似：头孢类抗生素可使尿蛋白阳性检测结果假性降低或呈假阴性。

综上所述，在进行尿蛋白检验时，应根据尿干化学、沉渣分析仪及显微镜检共同判断，对尿蛋白阳性的标本，无论尿沉渣分析仪有无管型提示均应镜检。而对尿蛋白阴性标本，尿沉渣分析仪提示有管型的标本也应镜检，必要时使用磺基水杨酸法进行确证。大剂量使用头孢类抗生素后短时间内不进行尿蛋白的检测，在消除药物的干扰作用后进行检测，提高检测结果的准确性和可信度， 为临床疾病的诊断提供更好的帮助。