复方牛磺酸滴眼剂对紫外照射眼损伤模型兔眼的修复作用及其剂量组合优化研究

刘锡军，才 凤，肖春莹

（1.辽宁中医药大学附属医院，辽宁 沈阳 110032； 2.辽宁省食品检验检测院，辽宁 沈阳 110015）

牛磺酸是一种特殊的氨基酸，是人体必不可少的营养元素[1]。眼药中的牛磺酸具有强化角膜的自我修复能力和对抗眼疾的作用[2-3]。有研究表明，维生素与眼病的发生及视力关系密切[4]。复方牛磺酸滴眼剂由牛磺酸、盐酸萘甲唑啉、维生素B6、马来酸氯苯那敏组成，外源性的牛磺酸能顺利通过晶体细胞膜，不需要载体，且不消耗能量，对维持眼代谢功能十分重要，临床主要用于防治近视和眼疲劳[5-6]。本研究中通过正交试验筛选出复方牛磺酸滴眼剂对家兔眼刺激损伤后的最佳修复剂量组合，现报道如下。

1 材料

1.1 试药

复方牛磺酸滴眼剂，4种单一成分，9种剂量组合，规格为10 mL，空白基质为透明质酸钠和氯化钠，均由辽宁省药物研究院提供。4种成分为牛磺酸（A）、盐酸萘甲唑啉（B）、维生素 B6（C）、马来酸氯苯那敏（D），以常用量为中剂量，适当增减。因素水平见表1。

表1 样品成分因素水平表（%）

1.2 动物

日本大耳白种家兔50只，普通级，体质量2.1～2.5 kg，雌雄兼用，由中国医科大学第二临床学院医学实验动物中心提供，合格证号为SCXK（辽）2003-0013。

1.3 仪器

UV-1601型紫外灯，功率30 W，波长254 nm，沈阳市东陵灯具厂生产。

1.4 统计学处理[7]

采用SPSS 20.0统计学软件进行分析。计量资料以表示，行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 方法与结果[8]

取家兔45只，随机分为9组，每组5只（10眼）。家兔以兔夹固定，将254 nm波长紫外灯置兔眼前40 cm处照射，照射强度为5000 μW／cm2。第1天上午照射3 h，下午1 h，第2，3天上午照射2 h，下午2 h，共照射12 h，以建立家兔紫外照射眼损伤模型。照射后立即给药，给药时，将家兔眼睑提起，药物滴入结膜囊内，停留10 s以上，中间闭合眼睑3次。每天滴眼药4次，连续6d，每次每眼1滴（0.05 mL），间隔 2 h。另取 5只家兔作为空白对照组（等容量空白基质）。

观察紫外灯照射前及照射后第6天，家兔眼球结膜、角膜、虹膜的受损程度及眼分泌物，参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》（国食药监注[2005]106号，以下简称“化学药原则”）中的评分标准（见表2）进行评分。将每只家兔的睑球结膜、角膜、虹膜的刺激反应分值相加即为该兔眼刺激反应的总积分，将每只家兔眼刺激性反应总积分相加后除以家兔数，即为该受试物对家兔刺激性的最后分值。分析样品对模型兔眼球结膜、角膜、虹膜及分泌物的影响，结果见表 3至表 6。优化的剂量组合分别为 A2B2C2D2，A2B2C2D3，A2B2C2D2，A2B2C2D2。

表2 兔眼刺激损伤评分标准

3 讨论

目前，对于药物的安全性评价，大多采用“化学药原则”，该方法由于具有客观、全面的特性，广泛用于药物的刺激性评价，且效果良好。刘彦群等[9]曾将1%的壳聚糖液滴入家兔眼睛，观察家兔的眼角膜、虹膜、结膜变化，用该评价标准对壳聚糖进行评价，结果表明，1%的壳聚糖对家兔眼部无刺激。本试验中参照该标准设计，结果对家兔眼球结膜、角膜、虹膜及分泌物有影响的是牛磺酸、盐酸萘甲唑啉和维生素B6。优化剂量组合为A2B2C2D2，即牛磺酸1%、盐酸萘甲唑啉0.02%、维生素B60.02%、马来酸氯苯那敏0.03%。以上结果表明，优化剂量的复方牛磺酸滴眼剂治疗眼疲劳作用明显，这为该药治疗眼疲劳的适应证提供了实验基础。

表3 对模型兔眼球结膜的影响（分值）

表4 对模型兔眼角膜的影响（分值）

表5 对模型兔眼虹膜的影响（分值）

表6 对模型兔眼分泌物的影响（分值）