贵阳4 291例医院机会性筛查HPV感染状况分析

邹文兵，周芝华，曹政媛△

(1.贵航贵阳医院检验科 550009；2.贵州省贵阳市妇幼保健院检验科 550003)

人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一种双链环状 DNA 病毒，根据病毒的生物学及流行病学特征，将其分为高危型HPV(HR-HPV)和低危型HPV(LR-HPV)。LR-HPV常引起一般良性病变，HR-HPV多导致高度鳞状上皮内病变和宫颈癌。研究表明，90% 以上的宫颈癌患者癌组织中存在HR-HPV感染，且在不同地区和人群中HPV型别分布有差异[1]。本文通过对贵州省贵航贵阳医院妇科就诊女性患者进行HPV感染机会性筛查，了解医院机会性筛查人群HPV 感染的流行病学特征，以为本地区宫颈癌防治提供重要依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2017年1-12月在贵航贵阳医院门诊及住院进行HPV检测的女性患者共4 291例，年龄16～80岁，平均(37.30±10.80)岁。所有研究对象均有性生活史，获得患者知情同意后，自愿接受各项检查。每位研究对象均检测15种HR-HPV和6种LR-HPV。

1.2方法

1.2.1样本采集及保存 采样由妇科医生完成。扩阴器暴露宫颈口，棉签擦去阴道及宫颈口分泌物，将采集刷置于宫颈口处，紧贴宫颈口顺时针轻柔转动4～5周，慢慢取出采集刷，将其放入装有细胞保存液(潮州凯普生物化学有限公司)的样品管中，在管口处沿刷柄折痕将宫颈刷柄折断，宫颈刷头留在洗脱管中，旋紧管盖，做好样本标识，并保持样品管直立放置，立即送检或放置4 ℃冰箱中，两周内进行检测。

1.2.2HPV基因分型 HPV基因分型检测采用凯普HPV分型检测试剂盒，利用PCR及导流杂交原理，经过宫颈组织样本DNA分离提取、PCR扩增、杂交及显色等步骤，对15种HR-HPV(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68)和6种LR-HPV(HPV6、11、42、43、44、81)进行基因分型。检测结果阳性者为膜条上对照点及杂交点均出现清晰可见的蓝紫色图点，并根据膜条HPV分型分布图判断样本感染型别。 每一批样本同时扩增阳性对照和阴性对照。

1.3统计学处理 采用SPSS17.0软件进行统计分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1HPV感染状况 4 291例HPV检测患者中，年龄小于31岁1 385例(32.28%)，31～<41岁1 303例(30.37%)，41～<51岁1 089例(25.38%)，51～60岁383例(8.92%)，>60岁131例(3.05%)。HPV感染773例，感染率为18.01%(773/4 291)，HR-HPV感染705例，感染率为16.43%(705/4 291)；LR-HPV感染113例，感染率为2.63%(113/4 291),其中有45例为HR-HPV和LR-HPV混合感。不同年龄段间HPV感染率、HR-HPV感染率及LR-HPV感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。各年龄段HPV感染情况见表1。

2.2HPV混合感染状况 单一型别HPV感染620例，占总感染人数80.21%(620/773)，其中单一HR-HPV感染553例，占71.54%(553/773)，单一LR-HPV感染67例，占8.67%(67/773)。多重HR-HPV感染107例，占总感染人数13.84%(107/773)，最高检出六重感染，HR-HPV和LR-HPV混合感染45例，占总感染人数5.82%(45/773)，LR-HPV混合感染1例，占总感染人数0.13%(1/773)。不同年龄段HPV多重HR-HPV感染比较，差异有统计学意义(χ2=11.42，P=0.02)，见表2。

表1 各年龄段HPV感染情况[n(%)]

2.3HPV亚型分布情况 21种HPV型别均被检出，共检出998感染人次，其中HR-HPV感染877人次，LR-HPV感染121人次。在HR-HPV型别感染中居前3位的是HPV52、HPV16、HPV39型，分别占总感染人次的16.33%(163/998)、13.43%(134/998)、13.13%(131/998)，占HR-HPV感染人次的18.59%(163/877)、15.28%(134/877)、14.94%(131/877)，前3位合计占HR-HPV感染人次的48.80%(428/877)；在LR-HPV型别感染中居前3位的是HPV81、HPV11、HPV6，分别占总感染人次的6.11%(61/998)、1.90%(19/998)、1.70%(17/998)，占LR-HPV感染人次的50.41%(61/121)、15.70%(19/121)、14.05%(17/121)，前3位合计占LR-HPV感染人次的80.16%(97/121)。各年龄段HPV亚型分布情况，见表3。

表2 各年龄段HPV单一和多重感染情况[n(%)]

表3 各年龄段HPV亚型分布情况[n(%)]

续表3 各年龄段HPV亚型分布情况[n(%)]

3 讨 论

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤，在女性恶性肿瘤中发病率仅次于乳腺癌，居第2位，全球每年约有50万宫颈癌新发病例，其中80%发生在发展中国家，我国每年新增病例约15万，研究发现其发病率有逐年升高趋势，已严重威胁女性健康[2-3]。国内外研究显示，HR-HPV型HPV持续感染是导致宫颈癌的最主要原因[4-5]。本研究采用PCR及导流杂交技术检测21种常见HPV 基因型，是直接针对病因的检查，能够将已患宫颈癌或癌前病变的患者及存在潜在风险的患者及时筛选出来，以便早期干预，同时可明确本地区机会性筛查人群HPV基因型流行病学特征。

本研究结果显示，贵阳地区4 291例就诊女性HPV感染率为18.01%，HR-HPV感染率为16.43%，LR-HPV感染率为2.63%。与马永岚等[6]报道武汉地区HPV感染率18.9%结果相一致，但明显低于王一羽等[7]报道延安地区HPV感染率40.54%，表明HPV 感染率在不同地区和人群中有差异，本地区主要以HR-HPV感染为主。徐文波等[8]发现玉溪地区HPV感染有年龄差异，主要为21～<31岁、31～<40岁。本研究中，年龄小于或等于20岁的患者仅有10例，由于人数过少，未单独分组，而不同年龄段间HPV感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)，表明本地区HPV感染与年龄无关。

本研究表明，在本区域内单一型别HPV感染最常见，占总感染人数80.21%，且主要以单一HR-HPV感染为主，占71.54%。多重HR-HPV感染占总感染人数的13.84%，最高检出六重感染，HR-HPV和LR-HPV混合感染占总感染人数5.82%。年龄大于60岁组，多重HR-HPV感染占33.33%，明显高于其他年龄组，提示随着年龄增大，更容易引起HPV多重感染，这可能是因为机体免疫力降低，激素水平下降，生殖道屏障作用失衡等因素增加了机体对HPV易感性。有学者研究表明，多重HPV亚型混合感染可增加宫颈癌变风险[9]，但也有学者认为HPV多重感染与宫颈病变严重程度无明显相关[10-11]。因此，要加强对多重HPV感染患者的随访，积累更多数据，对各种影响因素进行更深层次研究，同时还要从各HPV型别对宿主的致病机制等方面进行深入研究。但是，多重HPV感染，必然会增加病毒载量，会使感染情况更复杂，因此对待多重HPV感染患者应更加谨慎并及时干预治疗。

全球范围内女性HPV感染亚型分布存在地域性差异[12-13]。本研究显示，本地区21种HPV基因型别均被检出，常见HR-HPV感染亚型为HPV52、HPV16、HPV39型，占HR-HPV感染的48.80%；常见LR-HPV感染亚型为HPV81、HPV11、HPV6型，占LR-HPV感染的80.16%；除年龄大于60岁、41～<51岁组HPV16检出率最高，其余各年龄段均以HPV52检出率最高。这与国内大部分地区整体分布趋势相近[14-15]，但HPV感染率排序有所不同，这可能是研究人群、检测手段等不同造成的。提示临床应更加重视本地区常见HPV亚型的预防及治疗。目前HPV九价疫苗已问世，可有效预防HR-HPV(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV5型)及LR-HPV(HPV6、HPV11)引起的持续感染，但还不足以完全覆盖本地区常见HPV亚型。因此，研发针对本国本地区各适龄人群的疫苗，对降低宫颈癌的发病率，提高女性健康水平有着重大意义。

综上所述，HPV检测在宫颈癌及相关疾病的早期诊断、干预治疗等方面起着重要作用，对有性生活的女性应加强HPV筛查意识，定期体检，以期早发现病变，及时接受治疗，从而实现降低宫颈癌及癌前病变发病率及病死率。