南天竹根浸液的急性毒理实验*

邱志洁 王 滔 李茹茹 颜珍瑜

中药南天竹根，又名钻石黄、土黄连、山黄连等，据《福建民间草药》记载，其性苦寒，具有清热除湿、祛风止痒、止咳化痰等功效，常用于治疗急性黄疸、各类风湿痛、疮疡毒肿等疾患。前期研究小组用被动皮肤过敏方法[1，2]来建立大鼠 I型过敏反应动物模型， 使用南天竹根浸液进行干预处理，结果显示小鼠背部皮肤过敏反应明显降低，血清中的 IgE含量也明显减少， 从而初步肯定了南天竹根浸液对过敏反应的治疗作用及抗过敏机制[3]。 为进一步研究南天竹根浸液临床应用的安全性，本研究将通过小鼠灌胃给药，观察小鼠中毒症状，计算小鼠的半数致死量或最大耐受量，为指导临床用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物40只ICR小鼠，半雄性半雌性，排除特定病原体环境(SPF级)，8～12周龄，体质量18～22 g。由福建中医药大学实验动物中心提供实验动物并饲养于SPF级环境。

1.2 实验药物南天竹根浸液的制备：南天竹根200 g，加水浸泡30 min，煎煮2次，第1次2 h，第2次1.5 h，合并煎液，滤过，离心，浓缩到500 ml滤液备用。0.9%的氯化钠注射液：由福建省第三人民医院提供。

1.3 仪器电子天平(精确到0.01 mg)、医用注射器、组织剪、有齿镊等均由福建中医药大学实验动物中心提供。

1.4 动物分组将40只ICR小鼠随机分成南天竹根浸液组和对照组，每组小鼠20只(半雄性和半雌性)，用3%苦味酸标记小鼠，并在耳朵上使用笼牌进行标记。

1.5 灌胃方法将40只小鼠(半雌性半雄性)禁食12 h，仍然正常饮水，使用南天竹根浸液组以3次/d的频率给予小鼠灌胃，每次给药时间间隔8 h；对照组给予相同剂量的生理盐水对照灌胃。

1.6 半数致死量(LD50)的测定南天竹根浸液组小鼠按最大灌胃体积0.05 ml·g-1给药，3次/d，对照组同上。灌胃后每天早、晚各观察1次，同时连续观察2周。使用 Bliss’s 法观察2组小鼠死亡数量并计算相应的 LD50。动物急性毒理实验观察项目见表1。

表1 动物急性毒理实验观察表

1.7 最大给药量的测定每次给药后，观察以下检测指标:动物自由摄取食物量和饮水量，根据表1观察动物的一般活动和存活情况，并详细记录小鼠自发活动、肌肉运动、对外反应、精神状态、呼吸饮食、大小二便及毛色、分泌物情况等；若在给药时间段内出现小鼠死亡，则要详细记录该时间段内小鼠死亡发生时间、死亡数量和主要毒性反应表现等。通过2周的持续观察，分别记录1、4、7、14 d 体质量变化及小鼠死亡情况。在给药第14天后，处死存活的小鼠并进行逐只处死解剖，肉眼观察心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃、肠以及胸腔、腹腔等重要脏器、器官是否发生颜色变化、形态异常改变以及其他病理改变等。

2 结果

2.1 半数致死量(LD50)的测定结果给药后，小鼠状态正常，观察期间，所有老鼠全部存活，未表现出明显的异常，因此，未测得LD50。

2.2 最大给药量的测定结果小鼠最大给药剂量=0.4(南天竹根浸液最大浓度)×0.5(最大给药体积)×20.4(小鼠平均质量)×3(灌胃次数)×1000(单位统一换算)=122.4 g·kg-1。灌胃给药后，小鼠无明显中毒反应，呼吸、心率、自主和行为活动均无明显异常改变，未观察到眼球出现分泌物、眼球突出等现象，大小二便情况也均无异常。观察期间，实验小鼠摄食饮水正常，体质量增加，一般情况良好。见表2。实验结束后对处死动物进行解剖、形态学观察未见明显的脏器官改变。

表2 南天竹根浸液急性毒理实验小鼠体质量变化 (只，

注：与对照组比较，P>0.05

3 讨论

随着城市化加剧和工业化水平的飞速提升，过敏反应性疾病的患病几率在全世界范围内呈现出逐年增加的势头，过敏性疾病已经成为现阶段各个国家政府部门高度关注的全球性健康问题。世界变态反应组织(World Allergy Organization)在世界首个过敏疾病日发布了对全世界30多个国家进行的过敏性疾病流行病学调查结果，调查结果表示在这30多个国家的12亿总人数中，超过22%的人口患有由传统免疫途径IgE介导的过敏性疾病[4]。近年来我国针对0～24个月城市小儿过敏性疾病也展开了流行病学的调查，其结果显示小儿过敏性疾病的发病率已经超40.9%[5]，过高的发病率在给人们生命健康财产造成威胁的同时，也在经济上带来了沉重的负担。有研究机构调查显示过敏性疾病所造成的社会负担甚至大于艾滋病与肺结核的总和。因此，进一步探索过敏性疾病的发病机制以及积极寻求有效的诊疗手段和治疗方法已成为目前广泛关注和亟需解决的难题。

南天竹根是福建地区特有的一味中药，临床上常用于小儿湿疹、皮炎等疾病的治疗，且疗效显著。前期实验已初步证实了南天竹根对过敏性小鼠皮炎有着良好的治疗作用，本课题进一步研究显示南天竹根浸液作用于小鼠的最大给药量为122.4 g·kg-1，相当于成人用量的195.8倍，从而可以看出南天竹根口服毒性极小，其用量安全可靠。