白酒中乳酸含量检测方法

王晓玉　蒲小兰　安军　王娃金　林书兰

摘要：在本文的介绍中，我们重点提到了白酒中乳酸含量检测实验，通过建立测定白酒中的乳酸含量，得出关于乳酸含量的相应检测方法。研究结果显示白酒中的乳酸在一定浓度范围内与峰面积呈现出良好的线性关系，为此我们需要在检测实验中寻找出更为准确、简便、快速的乳酸含量检测方法，将其应用到日后的白酒乳酸含量检测作业中，使得所测出的乳酸含量数据能够更加真实、可靠。

关键词：白酒;乳酸;含量;检测方法

【中图分类号】R197    【文献标识码】A     【文章编号】1004-7484（2019）10-0220-03

关于白酒中乳酸含量的检测方法研究这一话题，我们进行了对比分析，基于不同试验情况下总结出了不同乳酸含量检测方法的优缺点;其次，酸类物质的出现主要源于白酒中的一些呈香呈味物质，这类物质在白酒微量成分中所占据的比例较大，研究证明一些浓香型白酒的口感受该物质的影响较大;此外，白酒中乳酸含量的多少将会直接影响到白酒品质的好坏，进而受到制酒者的格外关注。可以说对白酒中的乳酸含量进行的检测，将会在很大程度上影响着整个制酒工业的发展，对白酒的勾兑以及一些白酒生产工艺的控制都有着较为深远的影响。

1仪器与试剂

1.1 仪器：高效液相色谱仪（二极管阵列检测器）Agilent1200;十万分之一分析天平;

1.2 试剂：甲醇、乙腈为色谱纯，水为实验室一级用水（超纯水），磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯。乳酸对照品（含量89.9%），Dr. Ehrenstorfer Gmbh;L-乳酸对照品（含量90.08%），阿拉丁;DL-乳酸对照品（含量85%），百灵威;乙酸对照品（含量99+%），Alfa Aesar;

1.3 样品：实验室提供白酒

2 样品测定

2.1 对照品溶液的制备：分别精密称定乳酸对照品80mg、乙酸对照品65mg，置25mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品储备液，精密吸取上述对照品储备液0.125mL，0.25mL，0.5mL，1.0mL，2.0mL各置5mL容量瓶中，用水稀释至刻度，即得对照品工作液，供制作标准曲线用。

2.2 样品制备：方法一：样品直接用0.45μm滤膜过滤，备用。

方法二：取1mL酒样于10mL进口塑料离心管，氮吹（40℃）至剩约0.5mL，再用水稀释至2mL，用0.45μm滤膜过滤，备用。

2.3色谱条件：色谱柱：Agilent，（250mm×4.6mm，5μm）;检测波长210nm，流速为1.0mL/min。

对照品色谱图及光谱

3 色谱条件的确定

3.1 磷酸二氢钾缓冲液pH的选择：其它色谱条件保持不变，分别使用两种pH的磷酸二氢钾缓冲液作流动相，考察出峰情况。

对照品、样品直接用0.45μm滤膜过滤，上机测试，色谱条件：100%0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液作流动相;柱温40℃;进样量20 μL;其中0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液的pH分别调至2.5及2.0，由实验结果可知，两种pH条件下出峰情况无明显差异，故pH，选择2.0。

3.2 流动相的筛选：实验设计了三种流动相：①100%0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液，②甲醇-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（5：95），③乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（1：99）。

对照品照“上述配制乳酸（198.68mg/L）及乙酸（523.5mg/L）单标，样品直接用0.45μm滤膜过滤，上机测试，其它色谱条件：柱温为40℃;进样量为20 μL;0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液的pH为2.0。

三种流动相下标品出峰情况没有明显差异，在第三种流动相下样品目标峰分离度较好，故选用乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（1：99）作为本方法的流动相。

3.3 柱温的选择：样品直接用0.45μm滤膜过滤，上机测试，分别考察柱温40℃和25℃时样品出峰情况。其它色谱条件：流动相为乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（1：99）;进样量20 μL;0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液的pH为2.0。

两种温度对出峰无明显差异，考虑到高温可能影响色谱柱的寿命，故选用25℃。

3.4进样量的选择：样品按两种方法各处理一份，上机测试，分别考察了进样20μL和5μL样品的出峰情况。其它色谱条件：流动为相乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（1：99）;柱温为25℃;0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液的pH为2.0。

两种情况下标品均能能到较好的分离，样品的出峰情况则有两种：①直接过滤进样，进样量大的分离效果比进样量小的稍差;②样品氮吹，这种情况下，进样量不影响出峰效果，均能達到良好分离。

最终确定的色谱条件：色谱柱Agilent，ZORBAX SB-Aq（250mm×4.6mm，5μm）;检测波长210nm;乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（1：99）作流动相;流速1.0mL/min;柱温25℃;进样量20 μL（氮吹除醇）、5 μL（直接进样）。

4样品制备方式的确定

样品水浴/电热板挥干溶剂的处理方式所得结果重现性差且乙酸峰会出现丢失，故考虑采用40℃水浴同时氮吹的方式除醇。

可以发现，无论是水浴/电热板挥干、还是氮吹吹干溶剂的方式，结果均不理想，考虑可能是在挥干溶剂的过程中造成的损失，而水浴或电热板的方式均不能较好的控制除去的溶剂的量，故采用40℃水浴加氮吹的方式除去一定量的溶剂（主要是易挥发的醇）后再用水定容到原体积。实验中考察了氮吹后剩余不同体积的出峰情况：取1mL酒样于10mL进口塑料离心管，40℃氮吹至剩余约0.9mL、0.8mL、0.7mL、0.6mL、0.5mL、0.4mL、0.3mL，再用水稀释至2mL，用0.45μm滤膜过滤，上机测定。

从样品中乳酸及乙酸的分离情况来看，当剩余0.3mL～0.5mL时，均能得到良好分离，当剩余0.6mL～0.9mL时，分离度较差。从定量结果来看，随着剩余体积的减少，含量也随之减少;究其原因，一方面可能是氮吹带来的损失;另一方面，剩余体积越多，除醇越少，峰分离越差，直接影响积分，进而影响定量结果。综合考虑，选择氮吹至剩余0.5mL。氮吹处理方法为：取1mL酒样于10mL进口塑料离心管，40℃氮吹至剩余约0.5mL，再用水稀释至2mL，用0.45μm水相有机滤膜过滤，备用。

5 精密度试验

取一份样品，连续测定6次乳酸的精密度，结果见表3。

结果表明，该方法精密度良好。

6回收率试验

吸取1 mL已知含量的样品，按上述方法二样品处理，结果如表4。

加标回收试验结果表明，该方法准确度高，方法可靠

7 结论与讨论

通过本次对白酒中乳酸含量进行检测实验后，我们可以发现高效液相色谱法不但可以准确无误的检测出白酒中乳酸的含量，同时其还具有检测效率快、检测准确度高等特点。此外，与传统实验中所使用的气相色谱测试法相比，高效液相色谱法适用范围更广。

8 结束语

综上，本文针对“白酒中乳酸含量检测方法”这一话题展开了一个深刻的论述，研究发现白酒中所含有的乳酸成分将会在一定程度上影响着白酒的制酒口感，对白酒制酒工艺以及白酒的品质有着很大的关联性，为此，在实际白酒成分检测作业中，气相色谱法配FID檢测器可以测定白酒中大多数有机酸，但作为四大酸之一的乳酸则在FID上没有响应，查阅相关资料可知，采用高效液相色谱仪直接进样，可同时分析出白酒中乳酸及乙酸的含量，弥补了气相色谱仪不能直接分析乳酸的缺点。基于传在加速检测速度的同时，扩大了样品浓度范围、提高了检测的精密度和准确度，对科学指导白酒生产有着重要的意义。

参考文献

[1]孙艳.应用高效液相色谱技术 有效提升食品检测效率[J].中国食品，2020（08）：118.

[2]熊赛霞.高效液相色谱法的特点及应用[J].现代食品，2020（03）：199-201.

[3]白丽真，刘洪银，刘伟，张帆，朱婷婷，魏金旺.超高效液相色谱法检测白酒中乳酸含量的方法及方法确认[J].酿酒科技，2020（01）：75-77.