沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能和脂肪酶活性的影响

■刘艳丰 唐淑珍 聂存喜 王文奇* 王承敏

(1.新疆畜牧科学院饲料研究所，新疆乌鲁木齐830013；2.石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000)

沙棘于1977年列入《中国药典》后，科研工作者对沙棘汁、沙棘油及其提取物进行大量的研究,证实了沙棘含有多种维生素、微量元素、氨基酸和生物活性物质，是一种对人体健康有潜在益处的膳食纤维和药物化合物[1]。每千克沙棘叶中，含有胡萝卜素724 mg、类胡萝卜素290 mg、维生素C 1 270 mg、黄酮类9 178 mg，由此可见，沙棘黄酮是沙棘中重要的活性成分。黄酮属多酚类化合物,根据化学结构，沙棘黄酮以槲皮素和异鼠李素黄酮醇及其苷类为优势活性成分。沙棘黄酮具有强抗氧化剂和抗菌性能[2]，提高免疫系统[3-4]，显著增加抗高脂血症[5]。刘艳丰等[6]研究表明，在阿勒泰羊日粮中添加不同剂量的沙棘叶黄酮，可以提高阿勒泰羊的日增重；提高净肉率；提高血清总蛋白和免疫因子。但在不同脂肪含量的日粮中，沙棘黄酮对阿勒泰羊羔羊的脂肪代谢等是否有影响尚不清楚。本试验旨在前期研究的基础上，在阿勒泰羊羔羊不同脂肪含量的日粮中添加沙棘黄酮，通过生产性能、屠宰性能和脂肪代谢酶含量等评价沙棘黄酮的作用，为沙棘黄酮的科学利用和功能性饲料添加剂的开发提供参考。

1 材料和方法

1.1 试验材料

沙棘黄酮(总黄酮含量50%，经检测其它成分主要是纤维等）。

1.2 试验动物分组

选取健康的5月龄体重相近的阿勒泰羊冬季出生的公羔羊40只，随机分成4组，每组分10个重复，每个重复1只，经方差分析，组间试验羊差异不显著。本试验于2017年5月到7月在新疆福海县某养殖合作社开展，预试期10 d，正试期60 d。试验饲粮在参照农业部行业标准“NY/T 816—2004肉羊饲养标准”的基础上，结合新疆地方品种——阿勒泰羊的特点配制。试验饲粮采用采用玉米-棉粕-豆粕和苜蓿-麦草型全价颗粒饲料，单因素完全随机试验设计，Con1组、Con2组分别饲喂低脂饲粮、高脂饲粮（高脂日粮脂肪含量增加25%），LSL组、HSL组为试验组，分别在Con1和Con2中添加质量分数为0.25%的沙棘黄酮，全部制成孔径为0.6 cm的全价颗粒饲料。基础饲粮和营养水平见表1。

1.3 饲养管理

采用标准化肉羊圈舍进行饲喂，每只羊的占地面积为2.4 m2。每天喂料2 次（9：00、18：00）。所有试验羊均自由采食和饮水，由专人负责饲养管理。按照常规防疫程序进行防疫和圈舍消毒。

1.4 指标测定和分析

1.4.1 生长性能指标

收集饲粮和剩料，详细记录各组每天采食量，计算平均采食量、料肉比等生长性能指标。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

于试验正式期的第1 d、第20 d、第40 d和第60 d，晨饲前称试验羊只体重量，用于计算日增重。

日增重=某一时间段(期末质量-初始质量)/天数。

精料样品于烘箱65 ℃烘至质量恒定，粉碎后过筛保存。参照《饲料分析及饲料质量检测技术》[7]分析干物质(DM)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)等指标(见表1)。

1.4.2 屠宰性能指标

于第61 d，从各组选取3只试验羊进行屠宰。宰前禁食24 h，禁水2 h，宰后采集背最长肌并称重，液氮带回实验室，-80 ℃保存。胴体进行分割，将骨骼、肌肉、脂肪、尾脂和皮下脂肪等分别称重和记录，用于后续计算。

1.5 统计分析

数据用Microsoft Excel 2010整理，采用SPSS 20.0软件的one-way Anova 过程进行方差分析，并采用Duncan's法进行多重比较，以P=0.05为差异显著性标准，结果以“平均数±标准差”表示。

2 结果和分析

2.1 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能的影响

表2 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能的影响

由表2 可知，在1～20 d 和1～60 d，Con2 的日增重最高，与其它组均差异显著（P＜0.05），在1～60 d，LSL日增重比Con1 降低2.5%，HSL 日增重比Con2 降低14.3%。在1～40 d，Con2 和LSL 的日增重均与Con1、HSL 差异显著（P＜0.05），HSL 与Con1 也差异显著（P＜0.05）。Con2 和HSL 干物质采食量均与Con1、LSL 差异极显著（P＜0.01），Con1的干物质采食量与LSL差异极显著（P＜0.01），有机物采食量的趋势与干物质采食量一致。料肉比HSL组最高，Con2组最低。

2.2 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔屠宰性能的影响

表3 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔屠宰性能的影响（%）

由表3 可知，沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔的屠宰性能有影响。屠宰率HSL 组最高，与Con2 组差异显著(P＜0.05)，与LSL 组差异虽无统计上差异，但P＜0.1。骨骼占胴体的比重，HSL 组最高，与Con1 组差异极显著（P＜0.01），与Con2 组差异显著(P＜0.05)；LSL 组与Con2 组差异显著(P＜0.05)。肌肉占胴体的比重，HSL 组和LSL 组均与Con2 差异显著(P＜0.05)，分别增加6.25%和6.19%。脂肪占胴体的比重，Con2 组 最 高，与HSL 组 和LSL 组 均 差 异 显 著(P＜0.05)，HSL 组和LSL 组脂肪占胴体比重分别降低15.93%和12.97%。其它指标各组间差异不显著（P＞0.05）。

2.3 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔背最长肌营养成分的影响

表4 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔背最长肌营养成分的影响

由表4可知：沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔背最长肌的营养成分有影响。HSL组和LSL组脂肪均比Con1组低，且差异显著（P＜0.05）。HSL组和LSL组黄酮含量均比Con1、Con2组高，且差异极显著（P＜0.01）。HSL组和LSL组饱和脂肪酸含量均比Con1、Con2组低，且差异显著（P＜0.05）。HSL组不饱和脂肪酸含量比Con1组高，差异显著(P＜0.05)。其它指标各组间差异不显著（P＞0.05）。

2.4 沙棘黄酮对背最长肌的酶活和蛋白的影响

表5 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔背最长肌的酶活和蛋白的影响

由表5 可知：Apo-A100、Apo-B100、ACC 等各组间差异不显著（P＞0.05）。Con1组、Con2组PPAR-γ的含量高于LSF 且差异显著（P＜0.05）；而p-AMPK 正好相反，LSF 较高，与Con1 组、Con2 组均差异显著（P＜0.05）。饲喂高脂肪含量的日粮的p-AMPK 酶活均比饲喂低脂肪日粮的高，而且差异显著（P＜0.05），与沙棘黄酮添加无关。

3 讨论

3.1 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能的影响

本试验表明，添加脂肪能明显增加日增重，胴体中脂肪含量也较高，但在高脂肪日粮中添加沙棘黄酮，日增重显著降低，脂肪含量也显著降低。原因可能是沙棘黄酮具有抑制脂肪的作用，能在合理范围内降低FASN表达量、抑制脂肪酸的合成、减少动物体脂沉积、提高瘦肉率。

在低脂肪含量日粮中，添加沙棘黄酮对日增重没有影响，但提高了采食量，刘艳丰等（2014）[6]研究表明在脂肪含量不高的日粮，添加0.25%～0.50%的沙棘叶黄酮，可以提高阿勒泰羊羔羊采食量，与本文的研究结果具有一致性。国内外关于沙棘黄酮的研究报道较少，李垚等(2008)[8]研究报道日粮中添加0.20%沙棘黄酮极显著降低了肉仔鸡的腹脂率。通过降低过氧化物酶体增殖物激活受体(PPART)基因的表达来降低FAS 基因的表达(夏蕾等，2009)[9]。本试验表明，沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔的脂肪沉积在表观上也有降低作用，与李垚、夏蕾等在单胃动物上的研究基本一致。表明，沙棘黄酮的降脂效果与动物品种无关，但作用机理是否一致还需进一步研究。

3.2 沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔背最长肌的酶活和蛋白的影响

脂肪的合成和分解的酶活影响最为关键的是激素和日粮(单安山等，2004)[10]。FAS 表达水平的升高可显著增加甘油三酯在体内的沉积而导致肥胖(Mcneel等，2000)[11]。夏蕾等(2009)[9]在断奶仔猪日粮中添加0.1%沙棘黄酮可通过降低过氧化物酶体增殖物激活受体(PPART)基因的表达来降低FAS 基因的表达量，继而减少东北民猪腹部脂肪的沉积；但谢伟华等(2009)[12]研究结果表明，小鼠脂肪组织FAS mRNA 表达量在山楂黄酮处理后显著升高，说明山楂黄酮能促进脂肪组织和肌肉组织的脂肪酸合成。PPAR-γ刺激前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞，而且与成熟脂肪细胞内脂肪形成密切相关。PPAR-γ可通过活化脂肪细胞中乙酰辅酶A等促进脂肪细胞中甘油三酯增加，导致脂肪细胞体积增大（常彦飞等，2013）[13]。本试验中，添加沙棘黄酮均降低了PPAR-γ的含量，尤其是日粮脂肪含量较低时，抑制效果更明显，从而影响脂肪合成，沙棘黄酮通过PPAR-γ影响脂肪合成效果是否与饮食中高脂肪含量的日粮有关还需要进一步研究。Lee等（2012）[14]等报道，甘草黄酮能够激活AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)，进而调节脂肪代谢限速酶的活性，促进脂肪酸在线粒体的氧化，降低脂肪的沉积以及改善脂质代谢紊乱。李欣益等（2018）[15]研究发现沙棘黄酮对于大鼠的非酒精性脂肪肝病有一定的改善作用,其作用机制是通过调节AMPK-PPARα信号通路发挥作用。本试验中，添加沙棘黄酮也有同样的效果，通过调节AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)酶活，进而调节脂肪代谢限速酶的活性，促进脂肪酸在线粒体的氧化，降低脂肪的沉积。

4 结论

在低脂肪含量日粮中，添加沙棘黄酮对日增重没有影响，但提高了采食量。在高脂肪日粮中，沙棘黄酮对日增重具有抑制作用，对采食量没有明显影响。添加沙棘黄酮，增加骨骼在胴体中的比重，降低脂肪，尤其是皮下脂肪在胴体中的比重，从而提高瘦肉率，尤其是脂肪含量高的日粮。

沙棘黄酮通过调节脂肪酸合成与分解过程中脂肪代谢关键酶的活性来影响脂肪含量，通过调节p-AMPK-PPAR-γ信号通路发挥作用，从而降低皮下脂肪的含量。饲喂高脂肪含量日粮的p-AMPK 酶活均比饲喂低脂肪日粮的高，是否与沙棘黄酮添加量有关需要进一步研究。