HBV携带孕妇经替比夫定治疗后Th1和Th2细胞因子变化情况

孟晓庆

洛阳北方企业集团有限公司职工医院妇产科，河南省洛阳市 471000

乙型肝炎病毒(HBV)感染女性约占HBV感染者的45%[1]，7%的孕期女性为慢性乙型肝炎患者，其中半数以上为HBeAg阳性[2]。目前，该领域研究多集中于HBV携带孕妇母婴阻断方面，而对产后肝功能水平和HBV血清学变化的研究较少[3]。Th1和Th2细胞因子分别介导细胞免疫和体液免疫反应，Th1和Th2细胞因子相互抑制，维持体内正常免疫平衡状态。免疫耐受期HBV感染的孕妇体内以Th2型应答模式为主，Th1/Th2失衡是无法正常清除病毒和相关感染细胞的主要原因之一[4]。本研究在孕中晚期给予HBV携带孕妇替比夫定干预治疗，观察治疗前后ALT、HBV血清学指标以及Th1、Th2细胞因子的动态变化情况，为HBV携带孕妇的干预治疗提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2016年5月—2017年12月在本院就诊并分娩的HBV携带孕妇58例。入选标准：(1)HBV-DNA阳性≥1年，孕前≥3次、孕期≥2次检查血清ALT、AST在正常范围；(2)无抗病毒治疗史；(3)分娩后在本院肝内科随诊。排除标准：(1)存在HBV之外其他肝炎病毒感染者；(2)存在HIV、梅毒、疱疹病毒感染者；(3)长期服用免疫抑制剂，合并肝癌或其他恶性肿瘤者。患者年龄21～37岁，平均年龄(29.3±2.5)岁。本研究经伦理委员会批准，研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法 患者于孕中晚期(26～30周)开始接受替比夫定(诺华制药有限公司，国药准字H20070028)治疗，600mg/d，服药至产后4～8周，转入肝内科进行下一步治疗。分别于治疗前、分娩前、产后4～8周，抽取患者空腹肘静脉血5ml，使用全自动生化分析仪检测ALT水平；Elisa法定量检测HBsAg、HBeAg水平，试剂盒购于上海康朗生物科技有限公司；实时荧光定量PCR 检测HBV-DNA水平。多亚基细胞因子检测试剂盒检测血清Th1细胞因子(γ干扰素、IL-2、TNF-α)水平和Th2细胞因子(IL-4、6、10)水平，试剂盒购于上海宝英生物科技有限公司。上述操作严格按试剂盒说明进行。

2 结果

2.1 不同时间段孕产妇血清ALT水平 替比夫定治疗前ALT水平为(22.9±7.4)U/L，分娩前为(19.8±6.2)U/L，产后复诊时为(35.1±6.6)U/L。产后ALT正常水平34例(58.62%)；≥1×ULN 24例(41.38%)，其中(1～2)×ULN 15例、≥2×ULN 8例、>10×ULN 1例。

2.2 HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比较 见表1。替比夫定治疗前、分娩前、产后患者HBeAg水平之间差异无统计学意义(P>0.05)；分娩前和产后HBsAg水平均明显低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；分娩前和产后HBV-DNA水平均明显低于治疗前，产后HBV-DNA水平明显高于分娩前，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 不同时间段HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比较

注：与治疗前相比，aP<0.05；与分娩前相比，bP<0.05。

2.3 Th1和Th2细胞因子水平比较 见表2。分娩前和产后γ干扰素水平均明显低于治疗前，产后γ干扰素水平明显低于分娩前，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗前和分娩前IL-2、TNF-α水平间差异无统计学意义(P>0.05)，产后IL-2、TNF-α水平明显高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前和分娩前IL-4、IL-6、IL-10水平间差异无统计学意义(P>0.05)，产后IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 不同时间段Th1和Th2细胞因子水平比较

注：与治疗前相比，aP<0.05；与分娩前相比，bP<0.05。

3 讨论

HBV感染患者妊娠始终是一个广泛关注的问题，孕期HBV的活性和免疫状态均会出现变化。相关研究显示，HBeAg在免疫耐受期呈阳性且HBV-DNA≥106拷贝/ml的孕期女性分娩后ALT水平升高率为30%～40%，且多发于产后1～2个月；HBeAg阳性女性产后ALT水平升高率为65%～70%，而HBeAg阴性女性产后ALT水平升高率约为30%[5]；孕中晚期给予拉米夫定治疗的HBV感染女性产后ALT水平升高率为65%[6]。本研究显示，HBV感染女性产后ALT维持在正常水平的比例为58.62%，高出正常水平的比例为41.38%，略低于上述研究，说明孕中晚期使用替比夫定干预治疗有助于降低HBV感染女性产后ALT水平异常的发生率。

本次研究中分娩前孕妇HBV-DNA水平明显低于替比夫定治疗前，说明替比夫定有助于降低HBV-DNA拷贝数；产后HBV-DNA水平较分娩前明显升高，但与替比夫定治疗前相比明显降低，而HBsAg水平与分娩前相比略有上升，可能与产后体内免疫水平变化有关。Th1细胞及相关因子可活化巨噬细胞，介导高强度的迟发型变态反应，发挥细胞杀伤作用，与细胞免疫和炎症组织损伤有关。Th2细胞及相关因子可诱导肥大细胞、嗜酸性粒细胞分化和抗体形成，抑制体内炎症反应进程，避免对机体的过度损伤[7]。相关研究显示，免疫应答中Th2细胞因子限制了Th1细胞因子介导的病理性损伤，在维持体内免疫系统的平衡中发挥重要作用[8]。健康女性孕期体内细胞免疫功能下降，免疫耐受性提升，对维持正常妊娠状态具有促进作用。本研究显示，替比夫定干预治疗前和分娩前Th1细胞因子中IL-2、TNF-α均呈低表达，产后表达水平明显提升，处于高表达状态；替比夫定干预治疗前γ干扰素水平最高，之后逐渐下降，产后水平最低；干预治疗前和分娩前Th2细胞因子中IL-4、IL-6、IL-10均呈低表达状态，产后表达水平明显升高；Th1细胞因子中IL-2、TNF-α和IL-4、IL-6、IL-10的变化趋势一致，总体呈动态平衡状态。相关研究显示，HBeAg阳性的乙肝患者接受替比夫定治疗过程中，用药12周起完全应答组患者Th1细胞因子水平明显提升，Th2细胞因子水平明显降低，提示替比夫定治疗后可通过调节Th1/ Th2细胞因子的平衡状态，提升Th1细胞因子的免疫反应，抑制HBV-DNA的复制。本研究中孕中晚期给予替比夫定干预治疗，产后Th1和Th2细胞因子呈同步上升趋势，与上述研究结论存在差异，可能与孕期免疫耐受有关，具体机制需进一步深入研究。