AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测乙肝表面抗原的性能评价

2019-08-27 08:06邵淑丽丛海燕曲业敏耿建利孙胜波王明义
中国医学装备 2019年8期
关键词:化学发光精密度分析仪

邵淑丽 丛海燕 曲业敏 耿建利 孙胜波 王明义*

中国是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染高发区, 该病毒感染的临床血清学标志物是乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)。HBsAg浓度与感染水平和疾病严重程度大致相关,据调查,HBsAg在人群中的携带率已高达15%,在全球范围内普遍流行,且HBV感染的流行率约为3.5%[1-2]。HBV感染常引起慢性肝炎的发生,最终可能发展为肝硬化和肝癌[3]。因此,实验室准确和及时诊断HBV感染对其治疗和预后有重要的临床意义。

目前,HBsAg的检测多采用化学发光分析法,而国内化学发光免疫检测起步较晚,医院多使用国外仪器及配套试剂,检测成本高,患者经济负担重。基于此,本研究对AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测HBsAg的性能进行评价。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集2019年1-3月威海市立医院125例患者的125份血清检测标本,对AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪定量检测项目HBsAg的精密度、线性范围、符合率以及携带污染率进行性能评价,以雅培i2000型全自动化学分析仪检测HBsAg的结果为对照,评价AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测HBsAg的性能。

1.2 仪器与试剂

AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪(威海威高生物有限公司)及HBsAg配套试剂及标准品(批号20190122)、质控品(批号20181105)均购自北京康彻斯坦生物公司。i2000型全自动化学分析仪(美国雅培)及HBsAg配套试剂(批号93097L100)、标准品(批号88550FN00)、质控品(批号81216A)均购自上海昆涞生物科技有限公司。

1.3 检测方法

1.3.1 精密度

室内质量控制均为在控情况下进行HBsAg批内精密度及批间精密度评价。①批内精密度评估:分别收集低值、高值2个水平的血清,即水平1(C1)、水平2(C2),将各水平血清充分混匀后每个水平重复测定20次,计算标准差(standard deviation,SD)、变异系数(coefficient of variation,CV)值;②批间精密度评估:对稳定分装后的C1、C2样本每日进行2个批次,每次重复5次,连续测试2 d;③判定标准:不精密度CV值小于或等于厂商给定的10%为符合要求。

1.3.2 线性检测范围

AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪的线性范围为0~400 IU/ml。选择一份HBsAg低浓度的患者血清标本和一份HBsAg高浓度的患者血清标本,低浓度血清标本接近检测范围下限,高浓度血清标本接近检测范围上限,患者低值血清(L)标本与患者高值血清(H)标本按比例关系配置成系列浓度血清(5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H)。对线性样本在检测系统上检测,每个样本重复测定3次,计算平均值。将实测值与预期值进行比较,以预期浓度值为横轴,实际测得浓度值均值为纵轴做线性回归图,计算回归方程:Y=ax+b与相关系数r。相关系数r2≥0.95为符合要求。

1.3.3 准确度

AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪与i200型分析仪0检测仪器间的比对,以i2000型分析仪检测结果为对照,在AutolumiS3000型检测系统上对样本进行检测,每个样本测试1次,评价两者结果的一致性。

1.3.4 携带污染率

收集HBsAg新鲜高值患者血清(H)标本、低值患者血清(L)标本各1份,依次测高值3次(H1,H2,H3)、低值3次(L1,L2,L3),携带污染率计算为公式1:

携带污染率<1%为可接受。

1.4 统计学方法

数据使用Microsoft Excel进行处理,计算均值、SD、CV、回归方程及相关系数等。

2 结果

2.1 精密度验证

该项目低、高值样本的批内精密度分别为6.16%和3.70%,批间精密度分别为6.86%和5.62%,符合临床要求(见表1)。

表1 HBsAg批内和批间精密度结果

2.2 线性检测范围实验

图1 AutolumiS3000型分析仪检测HBsAg的线性范围回归曲线

2.3 准确度

检测125例患者的125份血清标本,以i2000型分析仪检测结果为对照,AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测的定性结果与i2000型分析仪的阳性值符合率为97%,阴性值符合率为100%,总符合率为98.4%,符合AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪的性能要求(见表3)。

表2 AutolumiS3000型分析仪HBsAg的线性范围检测结果

表3 两种分析仪HBsAg检测结果对比

2.4 携带污染率测定

将高值血清和低值血清按照H1、L1、H2、L2、H3及L3测定, 并计算携带污染率,结果为0.006%(见表4)。

表4 携带污染率测定结果

3 讨论

乙型肝炎是慢性肝炎的主要病因,全球约有4亿感染者面临发展为肝硬化和肝癌的风险[4]。当HBsAg存在时个体可能具有传染性,因此对HBsAg的敏感、准确检测是HBV感染诊断和预防疾病传播的关键。

随着医疗技术的进步,目前检测HBsAg的方法有多种,如酶联免疫吸附分析(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、金标法及化学发光法,后者检测的灵敏度、特异度均较高,已成为医院内的主流检测方法[5]。为确保国产AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测结果的准确可靠,本研究对其检测HBsAg的性能进行验证,并按厂商规定标准评价其性能是否能够满足临床实验室要求。

精密度是方法学评价的基础,也是检测系统的基本分析性能之一,因此对精密度的验证必不可少[7-8]。本研究实验结果表明,AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪对HBsAg的检测精密度较好,其高值、低值样本批内精密度(3.70%、6.16%)和批间精密度(5.62%、6.86%),均低于仪器厂商规定标准10%,且在允许范围之内,表明该仪器的检测重复性较好,结果稳定可靠。在线性检测范围验证中,AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测HBsAg的线性相关系数为0.9975,>0.95,线性评价相关性良好。在准确度实验中,其与i2000型分析仪同时检测125份标本时,两者检测结果总符合率为98.4%。但有研究发现,不同型号及厂商的免疫检测仪器测定HBsAg结果符合率为94%,但本实验符合率高,表明该仪器检测结果准确性高,仪器性能较好,也有可能与操作人员、实验环境和试剂存放时间等因素有关[6]。

在自动化检测仪器检测中,加样针重复使用,虽经过多次清洗,但也可能存在交叉污染的可能性。本研究通过携带污染率实验可评价检测结果受到上一样本的影响,且携带污染率为一个常数,不受前后两样本浓度差值大小的影响,能有效反映检测系统携带污染的可能[9-10]。本研究实验中的携带污染率为0.006%,表明该仪器的污染率低,前后两样本间的干扰小,可满足实验室检测要求。

4 结语

AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪的成功研制可大幅降低实验室检测成本,并提高我国自主研发技术水平,对国内仪器自动化研究有重要意义。本研究通过对AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪检测HBsAg的主要性能指标进行验证及评价,证实该仪器的精密度、正确度高,线性范围宽,测定结果稳定性好,故HBsAg的检测可满足临床诊断和科研需要,有较好临床应用前景。

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