全自动固相萃取-气相色谱法同时测定茶叶中4种有机磷类农药残留

郝欣刘鑫齐娜陈向斌云环高峰范斐

(1.北京海关技术中心，北京 100026；2.上海屹尧仪器科技发展有限公司，上海 201108)

1 前言

我国是茶叶的故乡，茶农为了提高茶叶的产量，预防茶树病虫害，常常使用农药来解决该问题。有机磷农药虽然可以预防和除去茶叶上的害虫，随之而来的会造成茶叶中有机磷农药的残留[1，2]。有机磷农药是农药中极为重要的一类化合物。有机磷农药可因食入、吸入或经皮肤吸收而中毒，引起中枢神经系统症状，严重时可因肺水肿、脑水肿、呼吸麻痹而死亡，重度急性中毒者还会发生迟发性猝死[3，4]。

目前，茶叶中有机磷类农药残留检测方法中，大部分是将提取液直接进行色谱分析，缺少分析前的样品净化处理。众所周知，茶叶样品中含有大量色素等杂质，不经过净化处理的样品会使分析仪器的进样口、色谱柱以及检测器收到污染，影响分析的准确性和稳定性以及仪器的使用寿命。

本实验采用全自动固相萃取仪对茶叶样品进行分析前的净化处理。该方法自动化程度高，操作简单，净化效果好，有效降低了茶叶本底干扰，适合于茶叶中多种有机磷农药残留的日常检测工作。

2 实验部分

2.1 样品

茶叶样品用粉碎机粉碎后过2.0mm圆孔筛。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样容器内，密封并于0～4℃保存。

2.2 仪器

EXTRA全自动固相萃取仪(上海屹尧仪器科技发展有限公司)；气相色谱仪，配有FPD检测器(美国安捷伦公司)。

2.3 试剂

正己烷，丙酮均为色谱纯；无水硫酸钠：650℃灼烧4h；毒死蜱、杀螟硫磷、水胺硫磷、杀扑磷单个标准溶液100 μg/mL；活性炭(3mL/250mg)固相萃取柱；蒸馏水。

2.4 方法建立

准确称取粉碎茶叶样品0.5g(精确至0.001g)于10mL试管中，加入1～1.5mL水，浸泡10min，加入1g无水硫酸钠，用2×2mL乙酸乙酯提取2次，每次振荡2min，离心3min，收集上层有机相，残渣再用2mL乙酸乙酯/正己烷(V/V，1/1)提取1次，合并上层有机相于ASPE样品管中，采用活性炭(3mL/250mg)固相萃取柱(使用活性炭小柱前在小柱填料上端装入1cm高的无水硫酸钠)，经过EXTRA全自动固相萃取仪富集、净化。

固相萃取净化过程：用4mL乙酸乙酯活化小柱后，将提取液全部转移至小柱中，再用4 mL乙酸乙酯和2 mL乙酸乙酯/正己烷(V/V，1/1)洗脱。

全自动固相萃取净化条件，见表1。

表1 全自动固相萃取方法净化程序表

续表1

收集全部流出液，40℃下氮吹浓缩至近干，乙酸乙酯定容至1mL。上述实验重复进行6次。

气相色谱条件：

色谱柱：DB-1701 30m × 0.32mm × 0.25μm；柱温(程序升温)：100℃ 以10℃/min升温到190℃，保持5min，5℃/min升到220℃，保持5min，20℃/min升到300℃，保持5min；进样口温度：270 ℃；检测器温度：250℃；分流比：5∶1；进样量：1.0 μL。

2.5 线性关系

1 mg/L混合标准溶液配制：

分别从浓度为100 mg/L的毒死蜱、杀螟硫磷、水胺硫磷、杀扑磷单个标准储备液中，各移取0.1 mL于10 mL容量瓶中，丙酮定容至刻度，配制成浓度为1mg/L的4种有机磷类农药混合标准溶液，避光，-18℃下保存。

基质混合标准工作溶液配制：

用空白样品基质溶液配制成浓度分别为10、20、100、160、200 ng/mL的混合标准工作溶液，用于标准工作曲线的绘制。具体结果见表2。

表2 茶叶基质4种有机磷苯类混标校正曲线及相关系数表

2.6 加标回收率

在茶叶样品中分别加入40μg/kg、200μg/kg、300μg/kg的4种有机磷类农药混合标准溶液，重复测定6次，采用基质标准曲线定量，平均回收率及RSD见表3。

表3 茶叶中4种有机磷类化合物回收率和精密度结果

3 结论

本实验采用全自动固相萃取仪对茶叶中4种有机磷类农药进行净化。建立了使用全自动固相萃取-气相色谱法检测茶叶中有机磷类农药残留的方法。该方法具有自动化程度高，萃取效率高、精密度好，操作简单等优点，适用于茶叶中有机磷类农药残留的日常检测工作。