3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫的室内毒力测定

韩 慧，毛瑞卿，赵志国，张利军，高玲玲，郭艳琼

（山西农业大学农学院，山西太谷030801）

梨小食心虫（Grapholita molesta Busck），简称梨小，属鳞翅目卷蛾科小食心虫属，是一种严重为害桃、梨等果树的世界性蛀果类害虫，在我国广泛分布。近年来，由于农业产业结构的调整，果园栽培模式和管理措施的变化等因素，梨小食心虫在我国各地大发生[1]，尤其是在桃李混栽区域发生危害情况最为严重。梨小食心虫是一种钻蛀类害虫，整个幼虫期均在果实或幼嫩新梢中度过，幼虫期难防治，因此，卵期和成虫期是防治的关键时期[2]。蔡明飞等[2]通过3 种高效杀卵药剂对梨小食心虫卵的室内触杀试验表明，3 种药剂对卵的防治效果很低，甚至无效。

目前，生产上防治梨小食心虫的措施主要是化学防治、物理防治和生物防治，物理防治主要是果实套袋和诱杀，生物防治是利用天敌昆虫防治和近些年来兴起的“仿生治虫”，由于物理防治和生物防治成本高，见效慢，易受气候条件影响，目前生产上多使用化学防治。由于长期不合理使用化学农药，导致梨小食心虫已经产生了抗药性[3]。

本试验选用目前生产中防治梨小食心虫常用的3 种杀虫剂，对梨小食心虫卵和成虫进行毒力测定，为后续梨小食心虫的研究提供试验基础。

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验在山西农业大学农学院生物安全与生物防治实验室进行，供试虫源为室内人工饲养的梨小食心虫种群。采用人工饲料在智能人工气候箱（宁波海曙赛福实验仪器厂）饲养[4]，饲养条件为温度26 ℃、光周期L∶D＝15∶9、相对湿度60%～80%、光照强度4 800 lx[5]。供试虫卵为初产24 h 以内的卵，供试成虫为羽化48 h 以内的成虫。

1.2 药剂

有机磷杀虫剂马拉硫磷（Malathion）99.5%原药，美国SIGMA 公司；邻甲酰氨基苯甲酰胺类杀虫剂氯虫苯甲酰胺（Chlorantraniliprole）99.5%原药，美国SIGMA 公司；拟除虫菊酯类杀虫剂溴氰菊酯（Deltamethrin）99.5%原药，美国SIGMA 公司；将上述原药分别以丙酮溶解，配制成母液（10 mg/mL），现配现用。

1.3 试验方法

1.3.1 药剂对梨小食心虫卵的毒力测定 采用浸渍法处理梨小食心虫虫卵[6]，将配制好的母液稀释成系列质量浓度，马拉硫磷质量浓度为5，10，50，100，200 μg/mL，氯虫苯甲酰胺质量浓度为1，10，50，100，500，600，800 μg/mL，溴氰菊酯质量浓度为1，5，10，50，100 μg/mL，以丙酮处理为对照，每个处理20 粒卵，重复3 次，将待处理的卵放入药剂中浸泡5～10 s 后，确保卵都接触到药剂，用吸水纸吸取卵纸表面多余的药剂，放入干净已经灭菌的培养皿中，并放入湿润的脱脂棉球，卵纸不能碰到棉球或沾上水，将培养皿放入正常饲养环境下，72 h 后观察结果。卵粒变黑视为死亡，卵粒颜色透明或发白并且有小孔，视为孵化。

1.3.2 药剂对梨小食心虫成虫的毒力测定 采用药膜法处理成虫[7]，将母液配制成系列质量浓度，马拉硫磷质量浓度为1，5，10，50，100，500 μg/mL，氯虫苯甲酰胺质量浓度为1，5，10，20，50，80，100，150，200 μg/mL，溴氰菊酯质量浓度为1，5，10，50，100 μg/mL，以丙酮处理为对照，每个处理7 头成虫，重复3 次。将配制好的药液转移到直径8 cm 的指形管中，倒入药液后，倾斜试管缓慢滚动，使药液在试管内壁上形成一层均匀的药膜，药膜面积占试管面积的4/5，待试管内药液变干，将待处理成虫放入试管中，加入带有蜂蜜水的棉花补充营养，避免成虫饥饿死亡，将试管口用棉花塞好，放入培养箱中，24 h后观察成虫的死亡情况，参照《中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则杀虫剂第8 部分：滤纸药膜法》（NY/T 1154.8—2007），用镊子或毛笔轻触靶标的身体，以虫体不动为死亡标准。

死亡率＝（处理前样品总数-处理后样品总数）/处理前样品总数×100% （1）

校正死亡率＝（处理死亡率-对照死亡率）/（1-对照死亡率）×100% （2）

1.4 数据分析

采用SPSS 22.0 软件进行单因素方差分析（one-way ANOVA），采用Tukey 多重比较法进行差异显著性检验，采用Probit 回归计算致死中浓度（LC50）、毒力回归方程。

2 结果与分析

2.1 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫卵的室内触杀效果

比较3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫卵的测定结果发现，马拉硫磷和氯虫苯甲酰胺对于卵的致死效果差，溴氰菊酯对于卵的致死效果高。在同质量浓度（100 μg/mL）下，溴氰菊酯处理的死亡率达到85%，而马拉硫磷处理的死亡率仅为45%，氯虫苯甲酰胺处理的死亡率只有6.67%（表1）。

表1 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫卵的室内触杀效果 %

2.2 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫卵的毒力测定

由表2 可知，3 种不同类型杀虫剂溴氰菊酯对梨小食心虫卵的毒力最高，致死中浓度为16.81 μg/mL，是毒力最低的氯虫苯甲酰胺的33.4 倍；其次是马拉硫磷，LC50值为218.17 μg/mL，毒力是氯虫苯甲酰胺的2.57 倍。

表2 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫卵的毒力测定

2.3 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫成虫的室内触杀效果

由表3 可知，马拉硫磷对于成虫的防治效果最好，溴氰菊酯次之，氯虫苯甲酰胺的防治效果最差。在同质量浓度（50 μg/mL）下，马拉硫磷处理的死亡率为100%，溴氰菊酯处理的死亡率达到了85.71%，氯虫苯甲酰胺处理的死亡率仅为9.52%。

表3 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫成虫的室内触杀效果 %

2.4 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫成虫的毒力测定

表4 3 种不同类型杀虫剂对梨小食心虫成虫的毒力测定

从表4 可以看出，3 种不同类型杀虫剂中马拉硫磷对成虫的毒力最高，LC50为3.08 μg/mL，是毒力最低的氯虫苯甲酰胺的42.46 倍；其次是溴氰菊酯，致死中浓度为23.52 μg/mL，毒力是氯虫苯甲酰胺的5.56 倍。

3 结论与讨论

本试验结果表明，3 种不同类型杀虫剂处理梨小食心虫的卵，马拉硫磷的致死中浓度为218.17 μg/mL，氯虫苯甲酰胺的致死中浓度为561.51 μg/mL，溴氰菊酯的致死中浓度为16.81 μg/mL；溴氰菊酯对梨小食心虫卵的室内触杀效果较好，100 μg/mL的溴氰菊酯死亡率达到85%，其次是马拉硫磷，氯虫苯甲酰胺的触杀效果最差。梨小食心虫的卵主要是通过孵化后幼虫钻到果实内部危害，造成果实容易早期脱落，后期果实内部充满粪便，不堪食用[8]。梨小食心虫还可钻蛀新梢，造成新梢死亡，影响果树生长[9]。所以，防治梨小食心虫的关键时期是卵期、老熟幼虫期、成虫期。卵主要产在树梢顶端叶片背面或者果实的萼洼处和果柄处，老熟幼虫越冬及化蛹主要在树干处，其他各代老熟幼虫主要在树干的向阳面且不易淋雨的地方，土壤化蛹极少[10]。已经有试验证明，现有药剂对梨小食心虫卵的防治效果较差[2]，主要由于梨小食心虫的卵壳具有保护功能，所以，杀虫剂难以接触到卵的内部。拟除虫菊酯类杀虫剂目前应用于梨小食心虫防治中较多，其作用于昆虫的神经轴突。已经有试验证明，高效氯氰菊酯对卵具有高效触杀作用[11]。有机磷类杀虫剂是作用于昆虫的乙酰胆碱酯酶或乙酰胆碱受体，破坏正常的神经冲动传导[12]，对虫、螨有较高的防治效果。马拉硫磷进入到虫体后会被氧化成马拉氧磷，从而更能发挥毒杀作用。氯虫苯甲酰胺属于双酰胺类杀虫剂，是新型的化学药剂，作用机制与其他药剂不同，作用机制是激活昆虫鱼尼丁（肌肉）受体，过度释放细胞内钙离子，使昆虫瘫痪[13]。本试验结果表明，马拉硫磷和氯虫苯甲酰胺对于卵的防效低的原因，可能是由于其不能完全穿透卵壳，无法直接作用于梨小食心虫。

对于梨小食心虫成虫，马拉硫磷的致死中浓度为3.08 μg/mL，氯虫苯甲酰胺的致死中浓度为130.78 μg/mL，溴氰菊酯的致死中浓度为23.52 μg/mL，说明马拉硫磷对于成虫的防治效果最好，溴氰菊酯次之，氯虫苯甲酰胺的防治效果最差。梨小食心虫的成虫期是其快速繁殖期，也是目前生产上防治的关键时期[14]。叶片是产卵的主要场所，除苹果和海棠等果树外，在梨树、桃树、杏树的叶背面产卵[15]。成虫期的梨小食心虫寻求配偶，此时使用化学农药防治，会有很好的防治效果。有机磷杀虫剂对鳞翅目昆虫的毒性很强，生产中很早就开始使用有机磷杀虫剂防治梨小食心虫[16]。蔡明飞等[2]研究表明，毒死蜱能够有效防治梨小食心虫成虫。本试验中使用马拉硫磷对梨小食心虫成虫的毒力也很高。溴氰菊酯是拟除虫菊酯类杀虫剂，是使用天然菊素人工合成农药，因效果好，残留低，被大力推广，但在本试验中对梨小食心虫的防治效果较差，可能是由于溴氰菊酯主要以触杀和胃毒为主，害虫有一定的趋避与拒食作用，导致其药效降低[17]。氯虫苯甲酰胺是2001 年新上市的新型高效广谱杀虫剂，对人畜低毒，持效期长[18]。在本试验中对梨小食心虫的防治效果较差，可能是氯虫苯甲酰胺主要以胃毒方式发挥作用[19]，本试验中梨小食心虫可能没有取食氯虫苯甲酰胺，导致效果较差。此试验为后续试验提供了参考依据，同时也为生产中使用杀虫剂防治梨小食心虫提供了科学依据。因此，使用化学药剂防治梨小食心虫，卵期可以采用溴氰菊酯防治，成虫期可以采用马拉硫磷进行防治。