深圳4~13岁健康儿童低血红蛋白密度参考区间建立及其在缺铁性贫血患儿诊疗中的应用价值

林丽云　杜宇　罗奇智　何萍萍

【摘要】 目的：建立深圳地区4～13岁健康儿童低血红蛋白密度（low hemoglobin density，LHD%）参考區间，并探讨其在儿童缺铁性贫血诊疗中的应用价值。方法：选择2017年6月-2018年1月来深圳龙岗区第二人民医院体检的健康儿童560例作为健康儿童组，并选择同期缺铁性贫血（iron-deficiency anemia，IDA）患儿91例作为IDA组。采用Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪检测血常规，根据红细胞平均血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）计算LHD%，并对结果进行统计分析。结果：健康儿童LHD%为（2.53±0.89）%，95%参考区间为（0.79%，4.27%），其中男性和女性分别为（2.85±0.93）%和（2.14±0.80）%，95%参考区间分别为（1.03%，4.67%）和（0.57%，3.71%），男性高于女性，差异有统计学意义（t=3.176，P<0.05）。健康男性儿童中以7～10岁的LHD%最低，为（2.63±0.84）%，低于其他年龄段，但差异无统计学意义（t=0.616、0.861，P>0.05），女性儿童以11～13岁的LHD%最低，为（2.03±0.70）%，明显低于其他年龄段，但差异无统计学意义（t=0.592、0.773，P>0.05），且7～10岁的男女LHD%含量比较，差异无统计学意义（t=0.382，P>0.05）。IDA患儿治疗前LHD%为（31.62±11.08）%，明显高于健康儿童，差异有统计学意义（t=13.816，P<0.01），其中男患儿为（32.19±11.54）%，女患儿为（30.87±11.06）%，差异无统计学意义（t=0.854，P>0.05）。治疗后，IDA患儿LHD%为（9.61±5.24）%，明显低于治疗前，差异有统计学意义（t=7.912，P<0.05）。当LHD% cut-off值取4.30%时，曲线下面积（AUC）为0.923，敏感性为92.21%，特异性为98.6%;当MCHC cut-off值取322 g/L时，LHD%对IDA患者诊断的敏感性高达84.05%，明显高于MCHC的62.38%，两者比较差异有统计学意义（字2=3.215，P<0.05）。结论：建立了深圳4～13岁健康儿童LHD%参考区间，LHD%对IDA患儿的诊疗具有一定的应用价值，且优于MCHC诊断指标。

【关键词】 儿童; 低血红蛋白密度; 参考区间; 缺铁性贫血; 应用价值

【Abstract】 Objective：To establish the reference interval for the low hemoglobin density（LHD%）of healthy children aged 4-13 years in Shenzhen，and to explore its application value in the diagnosis and treatment of children with iron deficiency anemia.Method：From June 2017 to January 2018，560 healthy children who came to the Second Peoples Hospital of Longgang District in Shenzhen City were selected as the healthy children group，and selected the same iron deficiency anemia（IDA）in children with 91 cases as IDA group.Blood routine was detected by Sysmex XN-9000 automatic hematocyte analyzer，LHD% was calculated according to the mean hemoglobin concentration（MCHC）of red blood cells，and the results were statistically analyzed.Result：The LHD% of healthy children was（2.53±0.89）%，and the 95% reference interval was（0.79%，4.27%），among them，males and females（2.85±0.93）% and（2.14±0.80）% respectively，the 95% reference intervals were（1.03%，4.67%）and（0.57%，3.71%），respectively，males were higher than females，the difference was statistically significant（t=3.176，P<0.05）.Among healthy male children，LHD% between 7 and 10 years old was the lowest（2.63±0.84）%，lower than other age groups，but the difference was not statistically significant（t=0.616，0.861，P>0.05），LHD% of female children aged 11-13 years was the lowest（2.03±0.70）%，significantly lower than that of other age groups，but the difference was not statistically significant（t=0.592，0.773，P>0.05），there was no statistically significant difference in LHD% content between men and women aged 7 to 10 years（t=0.382，P>0.05）.LHD% of IDA children before treatment was（31.62±11.08）%，significantly higher than that of healthy children，with statistically significant difference（t=13.816，P<0.01）.Among them，male children（32.19±11.54）% and female children（30.87±11.06）%，the difference was not statistically significant（t=0.854，P>0.05）.After treatment，LHD% of IDA children was（9.61±5.24）%，significantly lower than that before treatment，the difference was statistically significant（t=7.912，P<0.05）.When the LHD% cut-off value was 4.30%，the area under the curve（AUC）was 0.923，the sensitivity was 92.21%，and the specificity was 98.6%，when the cut-off value of MCHC was 322 g/L，the sensitivity of LHD% to IDA patients was as high as 84.05%，significantly higher than that of MCHC（62.38%），the difference was statistically significant（字2=3.215，P<0.05）.Conclusion：The reference interval of LHD% for healthy children aged 4-13 years in Shenzhen was established，LHD% is of certain application value in the diagnosis and treatment of IDA children，and is superior to the diagnostic index of MCHC.

【Key words】 Children; Low hemoglobin density; Reference interval; Iron deficiency anemia; Application value

First-authors address：The Second Peoples Hospital of Longgang District in Shenzhen City，Shenzhen 518112，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.02.040

低血紅蛋白密度（low hemoglobin density，LHD%）是通过红细胞参数MCHC衍生计算而来的一项新的诊断指标，有研究发现，LHD%在缺铁性贫血（iron-deficiency anemia，IDA）患者诊疗中具有一定的应用价值[1-3]，也有学者建立了部分地区健康成人的LHD%参考区间[4-6]，但未见有人建立儿童LHD%参考区间。不同地区因地理环境、生活习惯、地质矿物质及农作物等多方面的不同，会导致不同地区健康儿童体内铁的含量不同，这样会影响红细胞内血红蛋白的合成，导致不同地区儿童外周血中平均血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）的含量不同，从而会导致由其衍生而来的LHD%也可能存在一定差异性。为了更好地为IDA患儿的早期诊断、鉴别诊断及疗效判断提供可靠、客观及科学的参考依据，不同地区应建立健康儿童LHD%参考区间。因此，本文对深圳地区4～13岁健康儿童低血红蛋白密度进行了调查分析，建立了其参考区间，并探讨了其在IDA患儿诊疗中的应用价值，取得了一定效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年6月-2018年1月来深圳龙岗区第二人民医院体检的健康儿童560例为健康组，（1）纳入标准：①所有研究对象经体检科医生严体格检查，均发育正常;②心电图（electrocardiogram，ECG）、B超检查均正常;③血常规、尿常规、大便常规、肝功能及肾功能均正常。（2）排除标准：①近期有感染及用药史;②患有血液系统性、其他器质性等疾病;③有剧烈活动、药物及非疾病因素的影响;④有急、慢性疾病，肝、肾疾病及心脏病家族史。（3）参照IDA诊断标准《血液病诊断及疗效标准》（第3版）[7]。经医院确诊为IDA患儿91例，所有IDA患儿均未经过任何抗贫血治疗。本研究经同医院伦理委员及儿童家长同意，并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 健康儿童和IDA患儿治疗前后均于清晨空腹按统一标本留取方法采集外周静脉血2～3 mL于EDTA-2K抗凝管内，轻轻地颠倒混匀8～10次，尽量避免产生气泡和溶血，及时送检。

1.2.2 仪器与试剂 Sysmex XN9000全自动血细胞分析仪、试剂、校准品及定值质控物均由日本Sysmex公司提供。

1.2.3 检测方法 标本检测前对全自动血球分析仪进行系统性维护、保养和定标校正，并进行室内定值质控物检测，待质控检测结果均在定值参考范围内才进行研究标本检测，统一按自动进样模式进行检测，确保检测结果的准确性和一致性。所有标本均置于室温内30 ℃后开始检测，2 h内完成。

1.2.4 LHD%数值计算 计算公式为：LHD%=100×[8]，MCHC单位为g/dL。

1.2.5 治疗方法 根据IDA患儿的贫血程度和病因不同，选用不同剂量铁剂和采用不同用药途径进行补铁治疗。

1.3 观察指标 观察健康儿童LHD%含量及参考区间、IDA患儿治疗前后LHD%含量、LHD%对早期IDA诊断特性、LHD%和MCHC对IDA患儿诊断敏感性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。ROC曲线分析采用medelac软件进行分析，95%参考区间以均值±1.96标准差（x±1.96s）表示。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 健康组中，男女各280例，年龄4～13岁，平均（9.00±4.26）岁，并按年龄段分为4～6岁（男102例，女99例）、7～10岁（男87例，女93例）和11～13岁（男91例，女88例）。经医院确诊为IDA患儿91例，其中男53例，女38例，年龄3～13岁，平均（9.00±4.73）岁。两组年龄及性别分布比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 健康儿童LHD%含量及参考区间 健康儿童LHD%含量为（2.53±0.89）%，95%参考区间为（0.79%，4.27%），其中男性和女性分别为（2.85±0.93）%和（2.14±0.80）%，95%参考区间分别为（1.03%，4.67%）和（0.57%，3.71%），男性高于女性，差异有统计学意义（t=3.176，P<0.05）。

2.3 不同年龄段健康儿童LHD%含量及参考区间 健康男性儿童中以7～10岁的LHD%含量最低，为（2.63±0.84）%，低于其他年龄段，但差异无统计学意义（t=0.616、0.861，P>0.05）。女性以11～13岁的LHD%最低，为（2.03±0.70）%，明显低于其他两个年龄段，但差异均无统计学意义（t=0.592、0.773，P>0.05），除7～10岁的男女LHD%含量比较，差异无统计学意义（t=0.382，P>0.05），其他年龄段LHD%男性均高于女性，差异均有统计学意义（t=2.027、2.917，P<0.05），见表1。

2.4 IDA组患儿治疗前后LHD%含量 IDA组治疗前LHD%为（31.62±11.08）%，明显高于健康组（2.53±0.89）%，差异有统计学意义（t=13.816，P<0.01），其中男患儿为（32.19±11.54）%，女患儿为（30.87±11.06）%，两者比较差异无统计学意义（t=0.854，P>0.05）。治疗后，IDA组LHD%为（9.61±5.24）%，明显低于治疗前，差异有统计学意义（t=7.912，P<0.05）。

2.5 LHD%对早期IDA诊断特性 通过ROC曲线分析，取LHD% cut-off值为4.30%时，曲线下面积（AUC）为0.923，敏感性为92.21%，特异性为98.6%。

2.6 LHD%和MCHC对IDA患儿诊断敏感性比较 取MCHC cut-off值为322 g/L时，LHD%对IDA患者诊断的敏感性高达84.05%，明显高于MCHC的62.38%，两者比较差异有统计学意义（字2=3.215，P<0.05）。

3 讨论

IDA是儿童最常见的一种贫血，主要是由于体内铁吸收或利用障碍或摄入不足导致铁缺乏，从而影响血红蛋白的合成而引发的。IDA可导致儿童免疫力下降、生长发育迟缓及智力发育障碍[9-10]，其发病率在经济欠发达的发展中国家中呈逐年上升趋势，目前已成为全球普遍公共卫生健康问题[11-12]，应引起全社会重视。IDA早期具有发病率高、症状隐匿性强及容易漏诊等特点，但早期治疗效果非常理想。因此，及早发现和诊断IDA，并及时采取有效预防和干预性治疗措施，对预防或降低IDA的发生具有重要意义[13-14]。

目前，用于临床IDA诊断和鉴别诊断的指标很多，涉及血常规中红细胞、网织红细胞及铁代谢等各项指标，但这些指标各自存有一定的局限性，如外周血常规各参数指标不利于IDA早期诊断且灵敏度不高;铁代谢指标，包括SF、SI、TIBC、TS等，但它们对IDA的诊疗存在很多局限性，如SF减少仅见于ID症，是最敏感的诊断早期铁缺乏的指标，但易受感染、炎症等因素影响而升高，SI、TIBC及TS反映体内可利用铁的情况，但影响它们测定的因素较多，且检测耗时较长，费用高，不适合IDA的临床常规筛查;骨髓小粒铁染色是诊断铁缺乏的金标准，但骨髓穿刺损伤性较大，检查耗时，患者依从性差，未能满足临床需求，这就给IDA的早期发现和诊断带来了极大的困难[15-16]。

因此，寻求有效、便捷的铁缺乏诊断方法极为必要。MCHC主要反映红细胞中血红蛋白的浓度，其除了可以反映90～120 d机体内铁的可获性，还可以反映用于血红蛋白生成的铁的可利用性[17]，其浓度降低主要见于小细胞低色素性贫血，而LHD%是通过MCHC计算而来的，与铁的可获得性和可利用性均有关。

本研究结果显示，深圳地区4～13岁健康儿童外周血LHD%含量为（2.53±0.89）%，略低于唐永华等[6]报道的光明新区健康成人的（2.61±0.93）%，而略高于何金泉等[4]报道的广东虎门地区健康成人的（2.41±0.85）%，差异均无统计学意义（P>0.05），但明显高于张丽霞等[5]报道的陕西地区健康成人的（1.86±0.77）%，这说明了同一地区不同年龄人群外周血中的LHD%含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），但不同地区和不同人群之间LHD%含量存在一定的差异性，这可能与不同地区周围地理环境、生活习惯、地质矿物质及农作物等多因素不同有关[18]。本研究结果还发现，7～10岁年龄段男女外周血中LHD%含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），其他年龄段男性均高于女性，差异均有统计学意义（P<0.05），这可能与男女自然生理结构不同有关。

IDA为一种缺铁性低色素小细胞性贫血，主要因患儿体内铁缺乏而影响红细胞内血红蛋白（Hb）合成，导致LHD%含量增加。本研究結果显示，IDA患儿治疗前外周血LHD%含量明显高于健康儿童，差异有统计学意义（P<0.01），与文献[4-6，19]报道一致，而治疗后LHD%含量明显低于治疗前（P<0.05），但仍然高于健康儿童，这可能与输血和服药治疗后，外周血新生正常红细胞逐渐增多，Hb和MCHC浓度上升明显，但外周血中仍有少量小细胞低色素红细胞残存，导致LHD%恢复较慢等有关。

LHD%是通过MCHC参数值，经过公式处理后间接计算出来的，这样可以大大提高对IDA诊断的敏感性和特异性，是诊断和鉴别诊断IDA最新发现的指标。本研究结果显示，当LHD%的cut-off值取4.30%时，LHD%对IDA早期诊断的敏感性高达92.21%，特异性98.6%，同时当MCHC的cut-off值取322 g/L时，LHD%对IDA早期诊断的敏感性优于MCHC，差异有统计学意义（P<0.05），与0sta等[20]报道相一致，这可能与LHD%对小细胞低色素红细胞非常敏感，只要外周血中有少量存在就会导致LDH%结果升高有关。

综上所述，LHD%是通过MCHC间接计算而来，结果易得，价格低廉，快速，适合临床应用，可作为IDA筛查的首选指标，同时LHD%弥补了铁代谢检测的局限性，在目前医疗资源有限的条件下，对于减少过度医疗，减轻患者家庭经济负担具有重要的社会和经济效益，值得临床推广应用。

参考文献

[1]师传帅，续薇.低血红蛋白s密度对铁缺乏状态的临床应用评价[J].中国实验诊断学，2017，21（3）：431-434.

[2]何淑娅，宋晓玉，张莉.低血红蛋白密度在宫颈癌合并缺铁性贫血诊断中的意义[J].国际检验医学杂志，2014，35（24）：3311-3313.

[3]李秀锋，宋金凤，邢莹，等.低血红蛋白密度在铁缺乏筛查及贫血类型鉴别诊断中的临床应用探讨[J].中华医学杂志，2014，94（44）：3506-3509.