氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌对患者血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE水平的影响分析

谢 娟，景娈恋

（湖北省汉川市人民医院肿瘤科，湖北 汉川432300）

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌病例的近85%［1］。临床研究表明，氟脲苷对几种实体瘤具有抗肿瘤作用，包括乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌、非小细胞肺癌和胰腺癌［2］。QIU等［3］发现成熟miR-499序列中的rs3746444T／C多态性可能通过调节癌症相关基因的表达而导致预后不良。ZHANG等［4］发现miR-328在肺癌患者血清中呈现高表达的状态。耿纪群等［5］通过meta分析发现高血清HE4水平是肺癌患者预后不良的标志，尤其是在亚洲肺癌患者中。CEA（serum carcinoembryonic antigen）在晚期非小细胞肺癌血清中表达异常［6］。WANG等［7］发现NSCLC患者血清POTEE水平与TNM分期有关，是潜在的预后因素。基于此，本研究选取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小细胞肺癌患者33例采用氟脲苷联合化疗治疗，旨在探究氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌对患者血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE水平的影响。

材料和方法

1 一般资料

选取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小细胞肺癌患者66例为研究对象，其中，男性36例，女性30例；年龄27到69岁，平均年龄46.2±7.5岁。肿瘤TNM分期Ⅲ期患者25例，Ⅳ期患者41例。其中鳞癌34例，腺癌32例。所有患者均经病理科和影像学诊断为晚期非小细胞肺癌。所有患者基本资料差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经过本院伦理委员会批准，且所有患者均签署知情同意书。

排除标准：①同时患有其他器官癌症的患者。②对本研究所用药物过敏的患者。③本研究前接受过药物或手术治疗的患者。④同时患有精神疾病的患者。

2 分组

将患者随机分为对照组和治疗组，每组各33例。对照组中男14例，女19例；年龄32～69岁，平均51.2±3.4岁；其中鳞癌13例，腺癌20例；治疗组中男22例，女11例；年龄27～61岁，平均41.0±3.7岁；其中鳞癌21例，腺癌12例。两组人员在年龄、家族史、性别、身高体重、组织学类别等差异无统计学意义，具有可比性。

制度性章程一旦建立，政府只负责执行合作章程、维持市场秩序等问题的处理，转型为市场服务，具体市场实务一般不需过问[8]。“黄金周”长假对旅游企业的冲击仅是旅游业面临的众多不稳定因素之一，为保障旅游企业在遇到冲击时能有效运营，成本支出的增加得到控制，需要建立企业协调合作机制。旅游企业间、行业间的合作及协调此时变为主体，提高企业竞争力、共享资源、降低交易费用、降低成本、联合开发客源市场和旅游精品等是旅游企业间开展合作的目标性动因。企业协调机制包括不同发展策略下的企业间和企业内外部协调方式。

3 药物和治疗方法

所有患者在第1和第8天均给予注射用盐酸吉西他滨（江苏豪森药业集团有限公司生产，规格：1.0g）1000mg／m2，1次／d。此外，所有患者在第1天至第5天静脉滴注顺铂（江苏豪森药业集团有限公司生产，规格：6mL：20mg×5瓶）75mg／m2，1次／d。治疗组在此基础上，在第1天至第5天静脉滴注氟脲苷（广东岭南制药有限公司生产，规格：0.25g）1500mg／m2，1次／d。两组均连续治疗21 d。化疗期间给予止呕及其他对症处理。

完全缓解（CR）：患者病灶消失；部分缓解（PR）：患者病灶消失 ＞30%；稳定（SD）：患者病灶介于缓解与恶化之间；进展（PD）：病灶进展＞20%，或已转移。客观缓解率（ORR）＝（CR＋PR）／总例数。疾病控制率（CBR）＝（CR＋PR＋SD）／总例数。

4 临床疗效评价

水泥：通常用于GRC中的水泥主要有快硬硫铝酸盐水泥、低碱度硫铝酸盐水泥、普通硅酸盐水泥、白色硅酸盐水泥。泰科石采用的是阿尔博波特兰水泥，其强度及白度都比普通水泥高。

5 观察指标

治疗前，对照组与治疗组血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，对照组与治疗组血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平明显下降，而miR-499的水平明显上升；同组治疗前后比较差异有统计学意义（P＜0.05）。经不同治疗后，治疗组血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平较对照组下降的更显著，而miR-499的水平上的更升显著，两组组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

对两组患者共66例进行不良反应评价，均无死亡病例产生。33例对照组和33例治疗组均未出现肌酐升高、脱发、耳毒性和周围神经毒性的不良反应。相比于对照组，治疗组出现的白细胞减少、血小板降低、恶心和呕吐均明显减少，且差异具有统计学意义（P＜0.05）；而两组出现的贫血、肝功ALT／AST升高、血尿和蛋白尿差异无统计学意义（P＞0.05）。见表4。

5.3 Karnofsky（KPS）评分 采用KPS评分对66例我院收治的晚期非小细胞肺癌患者进行功能状态的评分，总分为100分，分数越低，表示患者健康状态越差。

统计学软件为PRISM 7.0，两组患者的miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE指标比较采用t检验，用表示。临床治疗效果比较选用 χ2检验。

6 统计学处理

5.4 不良反应评价 不良反应评价应用Common Terminology Criteria for Adverse Events（CTCAE v.4.03）［8］进行等级评估，分为5个等级，1级（轻度），2级（中度），3级（严重），4级（危机生命），5级（死亡）。记录两组每周的血常规，血生化肝肾功等情况，并对症处理。

结 果

1 两组临床疗效比较

青年教师是学校发展的后备力量，青年教师的专业发展决定着学校的可持续发展，这已经引起了学校的足够重视，具体表现在为青年教师搭建了一系列的平台和舞台，比如师徒结对、课例打磨、校本教研、外出学习等.然而，这一切都是基于外部力量的青年教师的被动成长，缺少青年教师对自己专业成长路径的自主规划和系统梳理，本文在具体实践的基础上，试图从初中青年数学教师的视角，借助“教科研+”的主要阵地，自主开展专业论文写作为切入点，简单谈几点体会，不当之处，敬请指正.

表1 两组临床疗效比较

2 两组KPS评分比较

治疗后，对照组和治疗组的Karnofsky（KPS）评分均显著提升，同组治疗前后比较差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组和治疗组的Karnofsky（KPS）评分在治疗前比较无统计学意义（P＞0.05），但两组经不同治疗后，治疗组的Karnofsky（KPS）评分明显高于对照组，两组组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组KPS评分比较（）

注：与对照组比较，☆P＜0.05；与治疗前比较，*P＜0.05

KPS评分治疗前 治疗后对照组 33 53.89±7.16 70.13±10.47*治疗组 33 54.03±7.33 83.27±12.28组别 n／例☆*

3 两组血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比较

5.1 血清中miR-328和miR-499的水平 采取66例我院收治的晚期非小细胞肺癌患者治疗前后的外周血3mL。所有实验在在取样后两小时内开始。miR-328和miR-499的SYBR Green miRNA荧光定量PCR试剂盒购自HaiGene公司（货号：AP01476，AP01564）。miRNA快速提取试剂盒购自HaiGene公司（货号：B1802）。miRNA反转录试剂盒购自HaiGene公司（货号：D1801）。使用miRNA快速提取试剂盒抽取外周血的miRNA。使用miRNA反转录试剂盒将纯化好的总miRNA进行反转录。再使用miR-328和miR-499 SYBR Green miRNA荧光定量PCR试剂盒在ABI7500仪器上进行qPCR反应，实验重复3次。

表3 两组血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比较（）

表3 两组血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比较（）

注：与对照组比较，☆P＜0.05；与治疗前比较，*P＜0.05

组别 观察时间 miR-328 miR-499 HE4（pmol／L） CEA（ng／mL） POTEE（pg／mL）对照组 治疗前 3.16±0.42 0.36±0.08 217.21±21.26 5.41±0.35 327.21±47.18治疗后 1.85±0.36* 0.87±0.12* 124.27±13.77* 3.17±0.16* 211.37±22.84*治疗组 治疗前 3.20±0.49 0.37±0.07 220.85±24.15 5.33±0.42 339.71±58.27治疗后 1.32±0.31*☆ 1.09±0.15*☆ 55.23±9.35*☆ 2.84±0.31*☆ 163.95±29.61*☆

4 不良反应评价

5.2 血清中HE4、CEA和POTEE的水平 采取66例我院收治的晚期非小细胞肺癌患者治疗前后的外周血3mL，行酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）。HE4的ELISA试剂盒购自厦门研科生物技术有限公司（货号：XWCEK1908）。CEA的ELISA试剂盒购自帝肯（上海）贸易有限公司（货号：RE59101）。POTEE的ELISA试剂盒购自北京华夏远洋科技有限公司（货号：E3654h）。按照试剂盒说明书，大致方法如下：使用前让所有试剂恒温到室温，使用前轻轻混合所有液体试剂。向孔中加入50～100μL制备的标准品和样品。盖板并在室温下孵育2 h。从孔中彻底吸出或倾倒溶液并丢弃液体。使用喷射洗瓶或自动96孔板洗涤器洗涤孔4次。向孔中加入100μL稀释的检测抗体。盖板并在室温下孵育1 h。从孔中彻底吸出或倾倒溶液并丢弃液体。洗涤4次。向每个孔中加入100μL稀释的HRP缀合物。盖上盖板并在室温下孵育30 min。从孔中彻底吸出或倾倒溶液并丢弃液体。洗涤4次。每孔加入100μL生色底物。在室温下在黑暗中显影30min。每孔加入100μL终止液。孔中的溶液应从蓝色变为黄色。必须在停止反应后30min内评估该板。读取每个孔在450nm和550nm处的吸光度。从450nm值减去550nm值以校正微孔板中的光学缺陷。使用曲线拟合统计软件绘制符合标准的四参数逻辑曲线，然后计算测试样品的结果。

对照组完全缓解7例，部分缓解9例，稳定8例，客观缓解率为48.48%，疾病控制率为72.73%；治疗组完全缓解9例，部分缓解15例，稳定4例，客观缓解率为72.73%，疾病控制率为84.85%，两组客观缓解率和疾病控制率比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表4 两组方案毒副反应比较（n）

讨 论

肺癌被认为是全球癌症导致死亡的主要原因之一［9］。肺癌的分类基于组织学特征，主要分为两种亚型：非小细胞肺癌（NSCLC），其占85%的肺癌病例，以及小细胞肺癌（SCLC）；且NSCLC的5年生存率低于15%［10］。氟尿苷是一种细胞生长抑制剂，通过嘧啶核苷磷酸化酶生物转化为5-氟尿嘧啶，能够抑制肿瘤细胞增殖和迁徙［11］。基于此，本文旨在探究氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌对患者血清NSCLC相关生化因子水平的影响。本研究中，氟脲苷联合化疗治疗治疗后，对照组和治疗组的KPS评分均显著提升（P＜0.05），且治疗组的客观缓解率、疾病控制率和KPS评分均大于对照组（P＜0.05），治疗组的不良反应显著降低（P＜0.05）。氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的客观缓解率率和疾病控制率分别为72.73%和84.85%。相比于单一的使用盐酸吉西他滨进行化疗治疗晚期非小细胞肺癌，氟尿苷联合盐酸吉西他滨治疗晚期非小细胞肺癌具有较好的疗效。因此，其为临床治疗晚期非小细胞肺癌提供了方案选择。

本文研制的是一种无机泡沫吸波材料，是利用碎玻璃或火山灰等为主要原材料，在其中添加电磁损耗物质，熔融发泡而成的一种隐身材料，如图7所示。

ZHANG等［4］发现miR-328在肺癌患者血清中呈现高表达的状态，而miR-499呈现低表达的状态。最近，一系列流行病学研究评估了成熟miR-499中rs3746444T／C多态性与各种人类疾病风险和预后之间的关联［12-14］。本研究中，治疗后，对照组与治疗组血清中miR-328的水平明显下降（P＜0.05），而miR-499的水平明显上升（P＜0.05）。经不同治疗后，治疗组血清中miR-328水平较对照组下降的更显著，而miR-499的水平上升更显著（P＜0.05）。ANDO等［15］在评估中认为小鼠miR-499对肿瘤生长有抑制作用，提示了miR-499表达的异常下降是肿瘤发生发展的一个重要因素，暗示了miR-499可作为潜在的分子标志物和临床疗效指标。尽管发现miR-328在肺癌患者血清中高表达，且经过治疗后其表达水平明显降低，但是许多研究发现miR-328能够靶向不同的基因来促进肿瘤细胞的增殖和迁移［16］。然而，关于miR-328的机制研究未涉及到非小细胞肺癌，期待进一步研究。但是，这并不影响miR-328能作为潜在治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效指标。

CEA是参与细胞黏附的糖蛋白，通常在胎儿发育期间产生，多项研究表明CEA能促进癌细胞转移［17］。以前的研究报道了POTEE在肿瘤进展中起表观遗传调控作用［18］。在裸鼠中HE4过表达促进了肿瘤生长［19］。因此，HE4、CEA和POTEE均为促肿瘤因子。本研究发现，经过治疗后，对照组与治疗组血清中HE4、CEA和POTEE的水平明显下降（P＜0.05）。并且，氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌后患者血清中HE4、CEA和POTEE的水平下降地更明显（P＜0.05）。患者血清中的HE4、CEA和POTEE生化因子的降低进一步证明了氟脲苷联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌具有较好的疗效，与前面KPS评分、客观缓解率和疾病控制率的临床指标相符。提示HE4、CEA和POTEE均可作为潜在的治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效指标。根据不良反应评价，相比于对照组，治疗组出现的白细胞减少、血小板降低、恶心和呕吐均明显减少，且差异具有统计学意义（P＜0.05）。提示氟脲苷联合化疗治疗方案耐受性好，安全性高。但因本组例数相对较少，因此需进一步加大样本量获得更可靠的临床证据。

爸爸依然笃定地一步步向前走去，好像没有什么东西会让他回头……可是当他走到拐弯处，就在他侧身拐弯的刹那，好像不经意似的悄悄回过头来，很快地瞟了弟弟他们一眼，然后才消失在拐弯处。

综上所述，氟脲苷联合化疗具有较好的临床疗效，能够显著降低miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平，提升miR-499的水平，其耐受性好、安全性高，具有一定的临床推广应用价值。