两款糖化血红蛋白床旁分析仪的正确性评价

王 尉，郑华荣，周 睿，宋智心

（1.首都医科大学附属北京地坛医院输血科，北京100015；2.中国计量科学研究院，北京100013；3.首都医科大学附属北京朝阳医院检验科，北京100020；4.北京市房山区良乡医院检验科，北京102401）

糖尿病是目前世界范围高发的慢性代谢性疾病。早期识别糖尿病前期和糖尿病人群，可以有效减少大血管、微血管病变等糖尿病并发症的发展，有效改善糖尿病高危人群和糖尿病人群生存质量。HbA1c作为国际上公认的糖尿病检测指标，在临床应用越来越广泛。1996 年美国糖尿病协会（ADA）［1］推荐将HbA1c≥6.5%作为临床诊断的指标，HbA1c在5.7%～6.4%之间为糖尿病前期，糖尿病患者HbA1c控制指标定为7%。在我国也将HbA1c＜7%作为临床对糖尿病患者血糖控制情况的评价标准［2］。使用POCT方法进行HbA1c检测为临床和患者监测糖尿病控制情况提供了更为便捷的方式。国外研究［3］表明，有些POCT HbA1c在经过临床评估后可以较好的应用于临床。本研究使用溯源到IFCC的二级参考测量程序（SRMP），探讨两台POCT HbA1c分析仪检测的正确性。

材料和方法

1 仪器与试剂

1.1 POCT仪器 POCT-1糖化分析仪为Alere Afinion AS100，试剂批号为10173570，配套质控品批号为10182606。POCT-2糖化分析仪为博唐平TMA1C EZ 2.0，试剂批号为AMC16010702，使用Canterbury Scientific Ltd.质控品，批号为0105P。两仪器检测均为硼酸盐亲和原理，均可以使用静脉和末梢两种采血模式，精密度评价均符合NGSP要求。

1.2 参比仪器 中心实验室Tosoh G8作为二级参考测量程序（SRMP），采用离子交换高效液相色谱 法 （ion exchange high performance liquid chromatographym，HPLC ion exchange），色谱柱批号YJ3908E；原厂配套质控品批号AB1040。该种仪器从2009年起参加美国病理学家协会（CAP）的能力验证（PT）计划，结果正确度均符合质评要求。使用可溯源到IFCC参考物质的国家二级有证参考物质（冰冻混合人血糖化血红蛋白标准物质）对Tosoh G8进行校准和验证。其中，使用编号GBW（E）090634（靶值±不确定度为34.43±1.54mmol/mol）和编号GBW（E）090637（靶值±不确定度为86.79±3.87mmol/mol）的参考物质作为校准物对Tosoh G8进行校准，使用编号为GBW（E）090636（靶值±不确定度为62.29±2.93 mmol/mol）的参考物质进行曲线验证，通过分析检测结果是否在参考物质定值范围内，对实现溯源后的Tosoh G8检测曲线的有效性进行判断。

1.3 标本 收集40例体检人群验后EDTA抗凝静脉全血标本，排除脂血、黄疸、溶血、贫血、肾病患者的标本，存储在2～8℃并在收集后48 h内完成测试.

2 方法

2.1 标本检测 依据美国国家临床实验室标准化委员会（CLSI）EP9-A2［4］用患者样本进行方法学对比和偏移评估；批准指南-第三版。选取40份EDTA抗凝全血样本涵盖POCT HbA1c分析测量范围：10个样本浓度在4% ～6%之间，10个样本浓度在6%～8%之间，10个样本浓度在8%～10%之间，10个样本浓度＞10%。每天测量8个标本，每个样本双份测定，连续检测5 d。以二级参考测量程序（溯源到参考方法的Tosoh G8）作为参比仪器。

2.2 偏倚计算 根据指南要求进行方法内离群点检验及方法间离群点检验。根据实验数据求得回归方程Y＝aX+b及相关系数r，利用偏倚SE＝｜a+（b-1）Xc｜公式得出其预期偏倚（Bc），相对预期偏倚SE% ＝（Bc/Xc）×100%。分别对5.7%、6.5%、7%临床诊断、监测关键点进行评价，评估相对偏倚是否小于NGSP和CAP要求的±6%的允许误差［5-6］，评价POCT仪器和参比仪器间结果是否具有可比性。

3 统计学处理

采用Excel 2010软件作直线回归和偏倚分析。

结 果

1 前期结果

参比仪器校准方程为：Y＝1.4194X-0.9186，检测 GBW （E）090636 的 验 证 结 果 为 7.7%（60.66mmol/mol）在62.29±2.93 mmol/mol范围内。根据指南要求的方法内和方法间离群点检验，均未发现离群点。

2 直线回归方程和偏倚图

以溯源到IFCC方法的Tosoh G8分析仪作为参比系统（X），POCT-1（红色三角）和POCT-2（蓝色菱形）作为比对系统（Y），进行回归分析得到回归方程和相关系数（R2）见图1。计算偏倚绘制偏差图见图2。回归分析显示POCT-1和POCT-2回归方程分别为Y＝1.0424X-0.3144和Y＝1.0054X-0.2242，R2分别为0.9918和0.8967。

图1 两台POCT HbA1c与可溯源到IFCC参考方法的G8相关图

图2 两台POCTHbA1c与可溯源到IFCC参考方法的G8偏差图

3 偏倚

将检测的40组结果根据EP9-A2方法计算偏倚，并用NGSP和CAP评价标准（6%）对临床决定值进行评估。见表1。

表1 两台POCT仪器正确性评价结果

讨 论

我国HbA1c检测质量，多年来虽有改进，但与发达国家比较存在一定差距［7-8］。临床检测中，HbA1c检测仪分析质量直接影响到各患者诊疗效果，随着POCT HbA1c分析仪在临床使用的日益广泛，其检验结果的正确性已经成为关注的焦点。

本研究，使用溯源到IFCC参考方法的Tosoh G8作为参比仪器，采用CLSIEP9-A2文件对两台POCT HbA1c分析仪进行方法学比对以及偏差评估，结果显示回归分析POCT-1和POCT-2两仪器R2分别为0.9918和0.8967，显示两台POCT HbA1c分析仪与溯源到IFCC参考方法的中心实验室仪器的检测结果相关性良好。HbA1c医学决定水平5.7%、6.5%和7%时，POCT-1和POCT-2偏倚分别为-0.07、-0.04、-0.02和-0.21、-0.20、-0.19，预期偏倚结果小于NGSP和CAP标准要求的允许误差（±6%）。两台POCT HbA1c分析仪与溯源到IFCC参考方法的Tosoh G8在临床患者测定结果之间具有良好的可比性。

因此，两台POCT HbA1c分析仪测定静脉血结果具有良好的正确性，临床检测结果可靠，可用于糖尿病治疗疗效评价和血糖水平监测，末梢血情况将在后续实验中进行研究。