厚朴及其不同炮制品中挥发性成分GC-MS 分析

袁金凤， 乔艺涵， 彭诗涛， 刘 娜， 王靖越， 柴冲冲， 李 飞

（北京中医药大学中药学院，北京102488）

厚朴为木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.Var.biloba Rehd.et Wils.的干燥干皮、枝皮及根皮，具有燥湿消痰、下气除满的功效，常用于湿滞伤中、脘腹吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳等［1］。宋代《本草衍义》 记载“厚朴不以姜制，则棘人舌喉”［2］，厚朴生品辛辣峻烈，对咽喉有强烈的刺激性，炮制后不仅能降低刺激性，还能增强宽中和胃的作用［3-4］，故临床多用其炮制品。厚朴炮制方法多样，以姜制法为主，2015 版《中国药典》 及各省市炮制规范中收载的厚朴炮制方法主要有姜炙法、姜煮法、姜浸法等［5-7］。

厚朴的主要化学成分为酚类、挥发油、生物碱等，其中挥发油含有量约1%，有报道挥发油成分具有杀菌、镇静、驱风健胃等药理作用［8-10］，现有姜煮厚朴、姜炙厚朴炮制前后挥发性成分变化的相关研究［11-14］，但结果有所不同，且未见姜浸、姜炙、姜煮不同炮制方法同时进行比较研究的报道，因此探讨不同炮制方法对厚朴挥发性成分的影响。本研究采用GC-MS 法对厚朴生品及不同炮制品中的挥发性成分进行分析，探寻不同炮制方法及辅料姜对厚朴挥发性成分的影响。

1 材料

1.1 仪器 Agilent 7890B／5977A-GC／MSD 型气相色谱-质谱联用仪（美国Agilent 公司）；PL2002 电子天平 （梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；ZDHW 型电热套（北京中兴伟业仪器有限公司）。

1.2 试药 厚朴生品（四川，批号E20170701）由湖北金贵中药饮片有限公司提供，经北京中医药大学中药学院杨瑶珺教授鉴定为木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.的干燥干皮。生姜购自市场。乙酸乙酯、无水硫酸钠等均为国产分析纯。

2 方法与结果

2.1 样品制备

2.1.1 生姜 洗净表面泥土，切成小块，备用。

2.1.2 生品 取厚朴饮片，净制备用。

2.1.3 姜汁 按2015 版《中国药典》 四部炮制通则制备，将生姜洗净，捣烂，加水适量，压榨取汁，姜渣再加水适量重复压榨1 次，合并汁液，即为姜汁。姜汁与生姜的比例为1 ∶1。

2.1.4 姜炙品［1］将厚朴饮片与姜汁拌匀闷润，闷润至姜汁吸尽，置于锅内，文火炒干，取出，放凉，备用。每100 kg 厚朴用生姜10 kg。

2.1.5 姜浸品［6］取厚朴饮片，用姜汁拌匀，闷润至姜汁吸尽，烘干（不超过60 ℃）。每100 kg厚朴用生姜10 kg。

2.1.6 姜煮品［7］取厚朴饮片与姜汁拌匀，煮至姜汁被吸尽，烘干（不超过60 ℃）。每100 kg 厚朴用生姜10 kg。

2.1.7 清水煮品 按“2.1.6” 项下炮制方法制备等量清水代替姜汁。

2.2 供试品溶液制备 按2015 版《中国药典》四部附录挥发油测定法甲法提取挥发油，称取生姜、厚朴及其炮制品粗粉（过2 号筛） 100 g，置烧瓶中，加7 倍量水浸泡过夜，加热并保持微沸状态，以水蒸气蒸馏法提取8 h，至挥发油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0 线上面5 mm 处为止，放置1 h 以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0 线平齐，读取挥发油量，并计算供试品中挥发油含有量，收集各样品挥发油以适量乙酸乙酯溶解，无水硫酸钠脱水后备用。辅料姜、厚朴生品、姜浸品、姜炙品、姜煮品、清水煮品的挥发油得率分别为 0.42%、 0.30%、0.34%、0.24%、0.22%、0.20%。

2.3 气相色谱-质谱条件

2.3.1 色谱条件 HP-5MS 毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；进样量1 μL；进样口温度250 ℃，传输线温度280 ℃，初始温度60 ℃保持2 min，以8 ℃／min 上升至280 ℃保持10 min；恒流模式；分流比20 ∶1；载气为高纯氦气，体积流量1 mL／min。

2.3.2 质谱条件 EI 电离源；电子能量70 eV；离子源温度200 ℃；扫描质量范围m／z 33～450。

2.4 GC-MS 分析 采用GC-MS 法分析辅料生姜、厚朴生品及其炮制品的挥发油，得其总离子流色谱图，见图1。所得各组分峰的质谱数据通过计算机数据系统NIST 数据库检索对照，根据相似度，确定了辅料生姜、厚朴生品及炮制品中挥发油的主要化学成分，按峰面积归一化法计算各化合物在挥发油中的相对百分含有量，将其进行分析比较。生姜中鉴别出47 种成分，鉴于生姜中成分较多，本研究只对厚朴生品及其炮制品进行了比较，见表1。

图1 各样品GC-MS 总离子流图Fig.1 GC-MS total ion current chromatograms of various samples

表1 挥发性成分GC-MS 分析（%）Tab.1 GC-MS analysis of volatile oil constituents（%）

3 讨论

厚朴经炮制后挥发油含有量均有变化，不同炮制品挥发油含有量由高到低依次为姜浸品＞生品＞姜炙品＞姜煮品，姜炙、姜煮后挥发油含有量降低，姜浸品挥发油含有量升高，表明挥发油总量与不同的加热方式有关。表1 表明，生品、姜浸品、姜炙品、姜煮品、清水煮品挥发油提取物经GCMS 分析检测出30、30、27、26、22 种成分，分别鉴定出28、28、24、25、20 个化合物，占挥发油总量的95.21%～97.99%。厚朴生品及其各炮制品挥发油中鉴别出20 种共有成分，共有成分占挥发油总量的90.09%～96.87%，其中β-桉叶醇含有量最高，相对含有量较高的成分还有γ-桉叶油醇、石竹烯氧化物、石竹烯、δ-杜松烯等。

对厚朴不同的姜制品进行分析，姜浸品与生品相比，消失了1 种成分，新增了1 种成分，两者共有成分29 种；姜炙品与生品相比，消失了4 种成分，新增了1 种成分，两者共有成分26 种；姜煮品与生品相比，消失了5 种成分，新增了1 种成分，两者共有成分25 种；其中姜炙品、姜煮品中长叶蒎烯、丁香烯醇、6，8-五烯-17-酮3 种成分均消失，而姜浸品中未消失；姜浸品与姜煮品中2-己酰基呋喃消失，而姜炙品中未消失；表明不同的炮制方法对厚朴挥发性成分的总量及化学组成有影响。

本实验以清水煮品为对照，探讨水煮过程及姜汁煮过程中辅料姜对厚朴挥发性成分的影响，同时也对生姜中所含挥发性成分进行GC-MS 分析，综合分析辅料生姜对厚朴挥发性成分含有量的影响。结果清水煮品与生品相比消失了8 种成分，无新增成分，水煮过程会对厚朴挥发性成分产生影响；姜煮品与清水煮品相比新增了5 种成分，其中1，3，3-三甲基三环［2.2.1.02，6］ 庚烷、龙脑、香叶醇，在生姜中均被检出，表明辅料生姜的代入对厚朴挥发性成分有一定的影响。

综上所述，不同的炮制方法及辅料生姜对厚朴挥发性成分的总量及化学组成有影响，以往的研究多集中在厚朴炮制前后的酚类成分的变化上［15-18］。本研究对厚朴不同炮制品的挥发性成分进行比较，以期为厚朴的炮制工艺提供依据，且不同炮制品在药效方面是否有差异，有待于进一步研究。