尿路感染病原菌分布及耐药性分析

宋春伟

天津市第二人民医院检验科 300192

尿路感染为常见感染疾病，其中以女性和老年人群为主。而尿培养是泌尿系统感染鉴别诊断的最重要手段，伴随医学快速发展，抗菌药物广泛大量应用，耐药菌株相应亦不断增多，导致病原菌耐药性增加[1]，使临床治疗难以收到预期效果。为了解本院病原菌的分布及其具体耐药情况，本文分析了我院近4年间门急诊及病房送检的尿培养结果和药敏情况，给临床医生合理使用抗菌药物提供依据。

1 资料和方法

1.1 标本来源 选取我院2014年6月—2018年7月临床送检的1 259例尿培养(中段尿和导管尿等)，操作严格按照《全国临床检验操作规程》进行，细菌培养阳性的标准为：细菌菌落计数革兰阴性菌105CFU/ml，革兰阳性菌104CFU/ml，共分离到236例病原菌。

1.2 仪器和材料 血琼脂平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板购自天津金章科技发展公司。VITEK-2COMPACT全自动细菌鉴定系统及其配套的细菌鉴定与药敏卡，购买自法国生物梅里埃公司。

1.3 方法 严格按《全国临床检验操作规程》要求取清洁中段尿标本，采用5μl定量接种的标准接种在血琼脂平板上。置5%～10%CO235℃恒温培养箱中培养18～24h，观察菌落的生长情况。按照细菌培养阳性标准筛选阳性菌株，同时排除相同患者分离出的重复菌株，采用仪器相应的鉴定及药敏卡进行菌株的鉴定及药敏实验。

1.4 质量控制 采用质控菌株为：标准菌株大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212和肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.5 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)判定 依据2013年 CLSI推荐的方法及标准进行判读，用头孢噻肟(30μg)和头孢噻肟/克拉维酸(30/10μg)、头孢他啶(30μg)和头孢他啶/克拉维酸(30/10μg)双纸片确证法。 结果以2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5mm时，判定为产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)。

1.6 统计学方法 采用细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.4软件对菌株及其耐药性进行统计。

2 结果

2.1 菌株分布 本次截取时间段内1 259例中共统计分离出236例病原菌，阳性率为18.7%，其中革兰阴性菌为220株(93.2%)，革兰阳性菌为16株(6.8%)。革兰阴性菌中亦以大肠埃希菌为主，共144株(61.0%)，其次为肺炎克雷伯菌36株(15.2%)。革兰阳性菌中以溶血葡萄球菌为主，共6株(2.5%)，其次为金黄色葡萄球菌和屎肠球菌，均为3株(均为1.3%)，各病原菌构成比见表1。

2.2 病原菌耐药率 大肠埃希菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦有相对较低的耐药率(<10%)，而对环丙沙星、氨苄西林及复方新诺明有较高的耐药率，分别为57.3%、86.0%和51.7%，分离率占前5位的病原菌的药敏结果见表2。

3 讨论

尿培养目前仍为诊断尿路感染的重要手段。本文共1 259份尿标本，细菌培养阳性率为18.7%，与张艳等[2]文献报道的15.95%近似。分离得到革兰阴性菌为220株，占93.2%，高于张洁[3]报道的72.51%，可能与本院的疾病分布有关，因本院前身为传染病医院，以肝病居多，可能造成病原菌分布与其他综合性医院差别较大。其中大肠埃希菌仍为主要病原菌，与文献报道一致[3-5]。药敏结果显示，大肠埃希菌对阿米卡星、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦有相对较低的耐药率(<10%)，而对环丙沙星、氨苄西林和复方新诺明有较高的耐药率，分别为57.3%、86.0%和51.7%，与林定忠[4]报道的耐药率一致。其中大肠埃希菌对氨苄西林的耐药性高达86.0%，与其产ESBLs有直接的关系[5]。肺炎克雷伯菌对多种抗生素敏感，对氨曲南、头孢他啶和头孢曲松耐药率均<20%，对阿米卡星、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦及亚胺培南耐药率为0。而大肠埃希菌中21.4%为产ESBLs 株，均低于刘书敏等[6]的报道。铜绿假单胞菌则对氨苄西林/舒巴坦、氨苄西林、呋喃妥因、复方新诺明、头孢呋辛及头孢替坦和头孢唑林100%耐药，对阿米卡星、氨曲南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢他啶和头孢吡肟较敏感，均无耐药情况。综合分析得出碳青霉烯类药物仍是治疗产ESBLs大肠埃希菌的首选抗生素[7]。

表1 236株病原菌构成比

表2 分离率在前5位的病原菌对常用的抗菌药物耐药率(%)

注：-：无数据。

对于尿路感染来说，与革兰阴性菌比较，革兰阳性菌相对感染率较低，但耐药率相对较高，与李彬等[8]报道一致。凝固酶阴性葡萄球菌对呋喃妥因及替加环素耐药率相对较低为0，对克林霉素、苄青霉素及苯唑西林均有较高的耐药率(83.30%)，其余均呈不同程度耐药。屎肠球菌对奎奴普丁/达福普汀、利奈唑胺、替加环素和万古霉素敏感，耐药率为0，而对氨苄西林、环丙沙星、克林霉素及苄青霉素等呈100%耐药，对其余抗菌药均呈不同程度耐药。高水平耐药率与抗生素滥用及多重感染有关，耐药率不断的升高将给临床上治疗肠球菌属引发的感染带来一定困难。令人庆幸的是此次观察中，未发现对万古霉素耐药菌株。

综上所述，本院目前尿路感染仍以大肠埃希菌感染为主，临床医生在经验性用药的基础上，应同时结合细菌培养及其耐药性结果采取合理治疗手段，例如呋喃妥因在尿路感染病原菌中耐药率相对较低且价格低廉，故可作为首选，但此药物具肾毒性，临床在用药过程中应注意监测肾功能。总之，临床在诊断治疗尿路感染前应尽量做中段尿细菌培养及药敏分析，以期尽可能减少耐药菌株产生[9]。