Ki-67在基底细胞样型三阴乳腺癌中的表达及意义

程新宇 周成美 王露雪 王翠芳

(1沈阳医学院附属中心医院病理科，辽宁 沈阳 110024；2锦州医科大学)

三阴乳腺癌(TNBC)是一种特殊的乳腺癌，组织学分级恶性程度高，内分泌和靶向治疗效果不明显〔1〕，5年生存率低。随着分子生物学技术飞速发展，乳腺癌基因表达谱提出了基底细胞样型乳腺癌的概念，多数学者认为其属于三阴性〔即雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体(HER)2均阴性〕并表达基底细胞免疫表型细胞角蛋白(CK)5/6和表皮生长因子受体(EGFR)等标志物〔2〕。Ki-67是细胞增殖特异相关核抗原，临床上常用作判断肿瘤恶性程度及预后。本文研究基底或非基底细胞样型TNBC中Ki-67的表达及意义。

1 材料与方法

1.1临床资料 收集2015年1月至2017年12月沈阳医学院附属中心医院病理科诊断为TNBC的病例42例，其中基底细胞样型TNBC 24例为试验组，非基底细胞样型TNBC 18例为对照组。年龄30～78岁，中位年龄63岁；组织学分级：Ⅰ级1例，Ⅱ级19例，Ⅲ级22例；有淋巴结转移16例，无淋巴结转移26例。患者取样本前均未行放化疗。

1.2试剂 即用型鼠抗人单克隆抗体Ki-67，柠檬酸缓冲液pH6.0，链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法(SP)检测试剂盒及二氨基联苯胺(DAB)均购自福州迈新生物技术有限公司。

1.3方法 所有标本用10%中性甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片，常规石蜡脱水，柠檬酸缓冲液pH6.0，抗原高压修复后,采用免疫组织化学SP法操作，DAB显色。选取临床病理工作中已知阳性组织片作阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS)(pH7.2)代替一抗作为阴性对照。

1.4结果判定 免疫组化片均由两位经验丰富的病理科医师采用双盲法单独判读。Ki-67阳性判断标准：阳性表达定位于肿瘤细胞核，高倍镜下任意计数5个视野，每次选取200个细胞进行观察，按阳性细胞所占比例的平均值定义Ki-67阳性指数，≤10%为阴性(-)，10%～29%为低表达(+)，30%～49%为中表达()，≥50%为强阳性表达()〔3〕。为统计学方便，-～+为阴性，～为阳性。

1.5统计学处理 应用SPSS17.0软件行χ2检验。

2 结 果

2.1两组临床病理特征比较 两组组织学分级比较有统计学差异(P<0.01)，其余临床特征比较无显著差异(P>0.05)。见表1。

表1 基底细胞样型TNBC与临床病理特征的相关性(n)

2.2形态学特征 基底细胞样型TNBC多由实性巢状、片状的癌细胞组成，肿瘤呈推进性生长；肿瘤周边有不同程度淋巴细胞浸润；伴有大片不规则坏死；核/质比高，核呈卵圆形，核分裂多见。见图1。

图1 TNBC形态学特征(×100)

2.3Ki-67在两组中的表达 实验组Ki-67阳性表达率为95.8%(23/24)，明显高于对照组的50.0%(9/18，χ2=11.911,P=0.001)。

3 讨 论

乳腺癌是高度异质性的恶性肿瘤。基底细胞样型是乳腺癌的一种特殊亚型，Banerjee等〔4〕研究显示其ER、PR、HER2表达阴性，属TNBC范畴。虽然二者组织形态、免疫表型及预后有诸多相似，但基底细胞样型是一种同质性肿瘤，并在三阴基础上表达CK5/6或EGFR〔2〕。TNBC 临床表现为发病年龄小，侵袭力强，无有效治疗药物导致预后较差。本研究结果说明基底细胞样型较非基底细胞样型恶性程度高，预后差；且基底细胞样型较非基底细胞样型患者发病年龄早，肿瘤体积大，恶性程度高，易发生远端转移。Ki-67单克隆抗体在1983年由Gerdes等〔5〕发现，可特异性识别增殖细胞核抗原，是评价恶性肿瘤细胞增殖程度最可靠的指标。有文献报道〔6〕，Ki-67的表达阳性率与TNBC组织学分级相关，Ki-67高表达>35%能增加患者死亡风险，与本研究结果相似。本研究结果提示Ki-67可能参与乳腺癌发生发展，在基底细胞样型TNBC中增殖活性强，组织学分级高，细胞增生活跃，预后差；Ki-67高表达可能是一个不良的预后因素。