枳椇饮对急性酒精中毒小鼠醒酒作用的实验研究*

叶 勇 李俊贤 吴 英 万春平 汪子君 赵 淳△

（1.云南中医学院第一附属医院，云南 昆明 610000；2.云南省曲靖市中医医院，云南 曲靖655000）

急性酒精中毒是指短时间内摄入过量酒精造成机体机能的损害，严重者引起中枢神经系统兴奋或抑制状态，使患者出现昏迷、休克、甚至呼吸衰竭［1］。中医学对酒精中毒有较为详细的描述，有 “酒悖”“酒毒”“酒厥”“酒胀”“酒臌”等病名［2］。本研究旨在观察枳椇饮对急性酒精中毒小鼠解酒作用，为其临床应用提供实验依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 昆明小鼠50只，雌雄各半，7～8周龄，体质量 20～25 g，许可证号 SCXK（川）2008-24；用 SPF级动物房饲养实验动物，实验动物至少饲养1周后使用。动物饲养在云南省中医医院中心实验室SPF级动物房，实验动物至少饲养1周后使用。温度（22±1）℃，湿度（55±5）%，12 h光暗循环。饲料和水均在消毒后由动物自由摄取。所有实验均严格按照《实验动物管理条例》以及动物实验学的“3R”原则进行。

1.2 试药与仪器 1）试药：枳椇饮系本文通信作者，云南省名老中医赵淳教授经验方，其组方为：枳椇子20 g，葛根 10 g，豆蔻 10 g，青橄榄 10 g，玉米肽 8 g，柚皮 10 g，乌梅 10 g，虎杖 10 g，鹿仙草 10 g，枸杞子 10 g。按剂量制成颗粒剂 （由云南麦谷农业科技有限公司提供）备用；牡蛎大豆肽肉碱口服液（海王金樽牌）；56°食用白酒（北京红星二锅头）。2）仪器：YLS-1A自主活动测试仪（山东益延科技发展有限公司生产）。

1.3 造模及分组 实验前将昆明小鼠禁食不禁水12 h，然后将50只昆明小鼠随机分为模型组及枳椇饮低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性对照组，每组10只。各组均以10 mL/kg为标准给小鼠灌酒，诱导急性酒精中毒小鼠模型。

1.4 干预方法 枳椇饮低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃给药0.25 g/kg、0.5 g/kg和1 g/kg枳椇饮。模型组以相同剂量给0.9%氯化钠注射液0.4 mL。阳性对照组予牡蛎大豆肽肉碱口服液给予10 mL/kg牡蛎大豆肽肉碱口服液口服液。灌胃1次。

1.5 小鼠翻正反射记录 灌胃白酒和药物以后，即将小鼠背向下轻轻放在动物笼里，若仰位姿势保持30 s以上，则认为翻正反射消失，记录小鼠从灌酒到翻正反射消失的潜伏时间 （从造模到翻正反射消失时间）和翻正反射的恢复时间（从造模到翻恢复翻正反射的时间）。

1.6 小鼠自主活动记录 使用自主活动仪分别记录各组小鼠5、30、150 min自主活动次数。

1.7 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件。计量资料以（±s）表示。均值间差异比较采用t检验或单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组小鼠翻正反射比较 见表1。与模型组比较，枳椇饮高剂量药物干预组显著提高了翻正反射消失潜伏时间（P＜0.05）；与模型组比较，阳性组、枳椇饮低、高剂量组翻正反射的恢复时间显著缩短（P＜0.05）。

表1 各组小鼠翻正反射比较（min，±s）

表1 各组小鼠翻正反射比较（min，±s）

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01下同

组 别 n 翻正反射消失潜伏时间 翻正反射的恢复时间模型组 10 18.16±10.98 169.67±50.12阳性对照组 10 19.67±7.63 100.83±29.67*枳椇饮低剂量组 10 26.17±15.63 139.00±33.51枳椇饮中剂量组 10 36.17±18.53 111.16±23.26*枳椇饮高剂量组 10 28.80±6.45* 73.00±46.11**

2.2 各组小鼠自主活动比较 见表2。给予酒精后，随着时间的推移，实验小鼠由兴奋变为安静。5 min时，与模型组比较，枳椇饮高剂量组自主活动显著减少（P＜0.05）；30 min时，与模型组比较，各组实验小鼠自主活动无显著性差异。150 min时，与模型组比较，阳性组及枳椇饮低、中、高剂量组自主活动显著增加（P＜0.01）。

表2 各组小鼠自主活动比较（次，±s）

表2 各组小鼠自主活动比较（次，±s）

组 别 n 5 min 30 min 150 min正常组 10 147.50±38.55 148.00±46.99 155.25±38.78模型组 10 162.37±33.87 138.16±35.50 53.42±33.21**阳性对照组 10 176.50±36.80枳椇饮低剂量组 10 161.50±38.85枳椇饮中剂量组 10 143.57±46.73枳椇饮高剂量组 10 88.00±31.36**146.83±32.40 132.28±50.50**102.33±58.70 145.55±46.01**108.33±58.10 149.33±48.21**121.50±50.62 145.71±38.20**

3 讨 论

急性酒精中毒主要表现在对中枢神经系统的抑制作用上，作用于小脑时主要表现为走路不稳、共济失调等运动障碍；作用于脑干网状结构，则进入昏睡期，最后会因为抑制延髓而出现休克、呼吸衰竭进而导致死亡。小鼠翻正反射、攀附实验和转棒实验及自主活动评价是主要评价大鼠醉酒后肌力和运动协调能力的有效方法［3-4］。故本实验通过翻正反射消失潜伏时间和恢复时间来验证枳椇饮对急性酒精中毒中枢抑制的解酒疗效。实验结果显示，与模型组比较，枳椇饮高剂量药物干预组显著提高了翻正反射消失潜伏时间；与模型组比较，阳性组、枳椇饮低、高剂量组翻正反射的恢复时间显著缩短，表明枳椇饮能有效改善急性酒精中毒小鼠的中枢抑制状态。

本实验在给予小鼠酒精后，随着时间的推移，乙醇在脑内剂量的逐渐蓄积，小鼠先后经历兴奋期、共济失调期和昏睡期，故实验小鼠由兴奋变为安静，实验结果提示，灌酒后5 min，与模型组比较，枳椇饮高剂量组自主活动显著减少，表明枳椇饮能减少小剂量乙醇中毒的神经兴奋状态；150 min时，与模型组比较，阳性组、枳椇饮低、中、高剂量组自主活动显著增加，表明枳椇饮能改善急性酒精中毒小鼠昏睡期的中枢抑制状态。

枳椇子作为本方的主要药物，具有清热利尿、解酒毒之功效，主治酒醉、烦热、口渴、呕吐、二便不利等症。早在《千金要方》和《本草纲目》中就均有记载，枳椇子和葛根是最为经典的解酒药物［5-6］，葛根和枳椇子具有的解酒护肝作用也在现代研究中得到了证实［7-8］。

现代研究表明，过多的乙醇可导致乙醇脱氢酶活性下降，而枳椇子可逆转这种过程，提高该酶的活性，让中间产物乙醛的产生与积累达到一种平衡［9］。任发政等［10］通过动物实验发现，长期摄入酒精的小鼠可引起肝脏超氧化物歧化酶（MDA）和谷胱甘肽巯基转移酶活性降低，从而导致丙二醛含量升高和谷胱甘肽含量下降，而枳椇子对上述变化具有拮抗作用。时涛等［11］研究发现枳椇子乙酸乙酯能够提高急性酒精中毒小鼠中血液谷丙转氨酶活性，降低小鼠肝脏丙二醛（MDA）含量，升高小鼠肝脏乙醇脱氢酶（ADH）活性和超氧化物歧化酶（SOD）活性，升高肝脏谷胱甘肽（GSH）含量，因此枳椇子具有显著的解酒效果。嵇扬等通过研究提出枳棋子能显著缩短急性酒精中毒小鼠的醒酒时间，降低血液中乙醇浓度，有治疗急性酒精中毒的作用［12］；药理研究发现葛根可以解酒毒，通过抑制酒精自主摄入、增加乙醇耐受 、降低血液乙醇浓度。有利于乙醇在体内的分解代谢，从而可以解酒毒。影响中枢神经系统兴奋与抑制过程是葛根具有解酒作用的重要原因之一［13］。虎杖中提取的活性成分-虎杖苷能减少肝损害，具有保护肝细胞，降低脂肪肝，改善胰岛素抵抗的作用［14］，这对急性酒精中毒时发生的肝脏功能损害起到了保护肝脏的作用。枸杞对酒精性肝损伤大鼠具有保护作用，能有效地阻止酒精所致肝损伤脂质过氧化物的终产物MDA的升高，具有抗脂质过氧化及保护肝细胞的作用［15］。鹿仙草也具有解酒毒的作用。通过提高ADH和ALDH的活性，加快了乙醇在体内的代谢，增强SOD和GSH-Px的活性，清除自由基，保护细胞膜的结构和功能［16］。玉米肽可以促进乙醇代谢 ，减低血液乙醇水平的作用。

本方中枳椇子清热利尿、解酒毒，葛根既解酒毒，又善醒脾生津，共为君药；虎杖、鹿仙草、肉豆蔻、余甘子、玉米肽解酒毒；柚子皮和乌梅消食、醒酒、化痰、健脾、生津止渴、增食欲，助君药共奏解酒毒之功效，为臣药；菊花清热解毒，平肝明目，沙棘、桑葚、枸杞滋养肝肾，护肝共为佐药。合而用之，共奏解酒毒、清热护肝、健脾生津、利湿之效，则酒毒诸症自消。