过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值变化及其与呼吸功能、免疫球蛋白的相关性

高兵，李松，马虹，吴薇，容志惠，李果

过敏性哮喘是一种慢性气道炎性反应，儿童是其高发人群，可引起反复发作的喘息、胸闷气促、咳嗽等，干预不当者可迁延至成年[1-2]。在早期确诊疾病的同时应积极判断病情严重程度，以此制定针对性治疗方案，但目前缺乏过敏性哮喘病情评估的简便指标。Th17/Treg免疫失衡参与多种炎性疾病的发生发展，已有研究明确Th17/Treg比值与变应性鼻炎的病情密切相关[3]，鉴于变应性鼻炎与过敏性哮喘的紧密联系，推测Th17/Treg比值在过敏性哮喘病情评估中也具有一定作用。故检测过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值，以判断其与患儿病情的内在联系，旨在为该病病情评估提供高效、简便的指标,报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年9月—2018年10月华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科诊治过敏性哮喘患儿300例作为哮喘组，同期在本院进行体检的健康小儿100例作为健康对照组。哮喘组：足月儿278例，早产儿22例；男161例，女139例，年龄3～11(7.39±1.85)岁；出生体质量2.6～4.1(3.19±0.45)kg。对照组：足月儿93例，早产儿7例；男67例，女33例，年龄3～12(7.45±1.91)岁；出生体质量2.5～4.3(3.22±0.51)kg。2组小儿的性别、年龄、足月/早产情况分布、出生体质量比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，受试儿童家属同意并签署知情同意书。

1.2 选择标准 纳入标准：(1)符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的《支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案)》[4]中对于小儿过敏性哮喘的定义：①反复发作的喘息、胸闷咳嗽等；②发作时听诊双肺闻及以呼气相为主的哮鸣音；③上述两点症状经治疗后可缓解或者自行缓解；④不伴有其他疾病所致喘息、气急；⑤临床症状若不典型，伴支气管激发试验、运动试验阳性或支气管舒张试验阳性或PEF日内变异率或昼夜波动率≥20%。(2)首次确诊并未经相关治疗。(3)年龄3～12岁儿童期。(4)可配合肺功能检查及血液标本获取。排除标准：(1)合并先天性心脏病等严重先天性疾病；(2)合并肺炎等下呼吸道感染；(3)合并其他脏器活动性感染；(4)合并严重自身免疫性疾病。

1.3 观察指标与方法

1.3.1 外周血Th17/Treg比值测定：留取晨起空腹外周静脉血(过敏性哮喘组患儿处于发作期)1.0～2.0 ml，采用美国BD FACSCanto Ⅱ流式细胞仪测定其中Th17细胞、Treg细胞的比例，计算Th17/Treg比值。

1.3.2 肺功能指标测定：用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、峰值呼气流速(PEF)。让小儿接上咬口并平静呼吸，经几个呼吸周期后指导其将气缓慢吐出(至无法再吐为止)，让小儿用力快速吸足气至肺总量位，其后以最大能力最快速度吐气，最后深吸一口气回到平静呼吸。每个测试者检测3次，取最好的一次结果进行记录。

1.3.3 免疫指标测定：采血2 ml 离心取血清,采用酶联免疫吸附法测定血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG、IgE的含量。

2 结 果

2.1 Th17细胞、Treg细胞比例及Th17/Treg比值比较 哮喘组患儿外周血中Th17细胞比例、Th17/Treg比值高于健康对照组，Treg细胞的比例低于健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 2组Th17细胞、Treg细胞比例及Th17/Treg比值比较

2.2 肺功能指标比较 哮喘组患儿FVC、FEV1%、PEF水平均低于健康对照组小儿，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 2组肺功能参数水平的比较

2.3 免疫球蛋白含量比较 哮喘组患儿血清IgE含量高于健康对照组(P<0.01)。2组IgA、IgM、IgG含量比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 2组免疫球蛋白含量比较

2.4 相关性分析 过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值与肺功能参数FVC、FEV1%、PEF水平呈负相关(r/P=-0.571/<0.05、-0.483/<0.05、-0.627/<0.05)，与IgE的含量呈正相关(r/P=0.602/<0.05)。

3 讨 论

Th17细胞及Treg细胞在过敏性哮喘的发生发展过程中扮演重要角色，两者来源于共同的初始T细胞，在不同环境影响下其分化出现偏移[5-7]。Th17细胞可分泌IL-17并发挥积极促炎作用，Treg细胞则具有免疫抑制作用[8-9]。胡影等[10]的研究指出儿童过敏性哮喘的发生与Th17/Treg比值异常相关。本研究中过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值较健康同龄小儿有大幅提升，说明在过敏性哮喘患儿中存在Th17/Treg免疫平衡向Th17偏移。

过敏性哮喘患儿发病时存在支气管痉挛，可导致气流受限，长此以往将出现气道直径永久性改变以及肺功能异常[11-12]。肺功能测试有助于确诊支气管哮喘，也是评估哮喘控制程度的依据之一，其主要指标包括FVC、FEV1%、PEF[13-15]。本研究中过敏性哮喘患儿的FVC、FEV1%、PEF水平均明显下降，说明其存在气道痉挛、气道直径缩小、呼气阻力增加等状况。相关性分析指出，过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值与上述肺功能参数水平呈负相关，说明Th17/Treg比值可客观反映过敏性哮喘患儿的肺功能损伤程度，间接反映该病病情严重程度。

免疫功能异常是过敏性哮喘发生的重要原因之一，其中代表体液免疫功能的免疫球蛋白含量的改变可客观反映患儿免疫功能紊乱情况以及哮喘整体病情[16]。IgA、IgM、IgG是最常见的免疫球蛋白，在自身免疫性疾病患儿中其含量可发生显著改变，而在过敏性哮喘患儿中基本处于正常水平[17]。IgE对嗜碱性粒细胞和肥大细胞具有高度亲和性，主要由呼吸道黏膜产生，生理状态下在人体血液中含量极低，在过敏体质或者过敏性疾病患者中其血清含量明显上升并参与变态反应的发生[18-19]。有研究认为过敏性哮喘是IgE介导的Ⅰ型变态反应，IgE诊断该病的灵敏度很高，IgE滴度极高者多处于哮喘急性期[20]。本研究中过敏性哮喘患儿血清中IgE的含量明显高于健康小儿，而IgA、IgM、IgG的含量则与健康小儿无明显差异，与既往研究结果吻合。相关性分析进一步指出，过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值与IgE的含量呈正相关，说明Th17/Treg比值可反映过敏性哮喘患儿的变态反应严重程度。

由此可见，过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值异常升高，且具体值与肺功能损伤程度、IgE含量均直接相关，可客观反映患儿病情严重程度。

利益冲突：无

作者贡献声明

高兵:负责研究设计、论文撰写;李松、马虹:负责临床指标检测；李果：分析试验数据，论文审核和修改;吴薇、容志惠：临床信息采集，资料搜集整理，进行统计学分析