武汉市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺失症筛查分析

沈姗姗 胡睿 周斌 蔡文倩 胡晞江

华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院（武汉市妇幼保健院）（武汉430016）

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphata dehydrogenase deficiency，G6PD）缺乏症是红细胞酶缺乏引起溶血性贫血中最常见的一组X 连锁不完全显性的遗传病。G6PD 缺乏症地理分布广泛，呈全球性多民族分布，全球罹患人数超过4 亿［1］，我国是本病的高发区之一，尤其以我国的长江以南地区高发。G6PD 缺乏是引起新生儿高胆红素血症的重要原因，严重时损伤大脑，造成永久性的神经损害致使智力低下甚至死亡［2-3］。G6PD 缺乏症为遗传性疾病，暂无根治方法，发病后只能对症处理，因此防重于治，开展新生儿G6PD 缺乏症的筛查工作，能够早期诊断和预防该病的发生，控制出生缺陷、提高人口素质。

武汉市处于华中长江流域，因为不是蚕豆病的传统高发区，因此缺乏相关流行病学的研究，无相关统计分析数据。武汉儿童医院（武汉妇幼保健院）新生儿疾病筛查室自1998年建立了武汉市的新生儿疾病筛查网络系统，于2016年11月中旬开始进行武汉地区（涵盖武汉十三个区）的新生儿G6PD缺乏症筛查工作（武卫生计生通［2016］123 号）。本文统计自筛查工作开展以来至2018年11月武汉市新生儿的G6PD 筛查数据，分析武汉市G6PD 缺乏症的发生情况。本研究可以为武汉地区G6PD缺乏症的疾病防控提供参考依据，为优生优育提供指导作用，并且对G6PD 缺乏症在中部地区的发病等流行病学数据做一个填充。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象本研究选取2016年11月至2018年11月在武汉市新生儿疾病筛查中心进行新生儿疾病筛查的全市健康新生儿共计202 994例，男108 529例，女94 433例，性别不详32例，包括我院出生和武汉市其他公立与私立医院（其中2016年93 家医院、2017年92 家医院和2018年89 家）出生的活产新生儿，完整涵盖武汉13个区的人群样本，因此本文所选样本可以代表武汉地区常住人群的G6PD 筛查情况。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集和递送新生儿的G6PD 缺乏症筛查标准：按《新生儿疾病筛查技术规范（2010年版）》要求，武汉市各医院在新生儿出生72 h 并充分哺乳后采集足跟血，滴于专用采血S＆S903滤纸（型号FH-A-02）上，自然渗透两面形成直径≥8 mm的血斑4个，室温中自然干燥后，置密封塑料袋内封口，放入2～8 ℃冰箱保存。于5个工作日内送至武汉儿童医院（武汉市妇幼保健）新生儿疾病筛查中心进行G6PD 筛查，武汉市新生儿疾病筛查室负责对全市标本进行G6PD 筛查。

1.2.2 实验室检测采用广州丰华时间分辨荧光免疫法以2.5 为参考值，样本测定值＞2.5 为阴性，样本测定值≤2.5 为可疑阳性，对筛查阳性患儿召回进行G6PD 基因测序。

1.2.3 质量控制本中心实验室G6PD 筛查每块反应板均采用双标双控制，每次试验每板均做标准品和低值、高值质控，G6PD 检测项目每年参加国家卫生和计划生育委员会临床检验中心新生儿疾病筛查实验室室间质量评价，成绩均为合格。

1.2.4 确诊试验将筛查阳性者进行电话召回，总共召回219例婴儿统一采集静脉血，进行G6PD基因13个外显子全长测序进行突变类型鉴定。

1.3 统计学方法采用SPSS 17.0 统计学软件对数据进行分析，发生率采用百分比（%）表示，组间比较采用了χ2检验；酶活力结果情况采用表示，组间采用t检验，P＜0.05 表示差异显著，具有统计学意义。

2 结果

2.1 武汉市2016年11月至2018年11月新生儿G6PD 筛查情况202 994例新生儿足跟血G6PD缺乏症采用时间免疫荧光法的阳性检出率为0.18%（369/202 994），其中男婴缺乏率为0.33%（353/108 529），女婴缺乏率为0.02%（16/94 433），两者差异有统计学意义（χ2=264.499，P=0.000），男婴的G6PD缺乏率显著高于女婴。在G6PD 时间免疫荧光法检出为阳性的新生儿中，男婴G6PD 活性（1.41±0.55）U/gHb，女婴G6PD 活性（1.77±0.58）U/gHb（t=2.522，P=0.012），男婴酶活性显著低于女婴。通过电话召回筛查阳性患儿219例，抽取静脉血进行基因检测来验证筛查效率。

2.2 可疑阳性的基因检出情况通过对219例G6PD 活性筛查阳性标本进行G6PD 基因全长测序分析，共检出182例标本携带G6PD 基因致病突变位点，阳性确诊率为83.1%（182/219）。

2.3 武汉地区与其他地区G6PD 缺乏症发生情况比较本次武汉市检出的G6PD 发生率明显低于我国南方如两广、云贵，四川、福建等高发地区，与上海持平，但略高于河北、山东地区等北方地区，略低于江浙和湖北省临近的江西、湖南等省市。见表1。

表1 武汉市新生儿G6PD 缺乏症筛查发生率和其他城市、地区比较Tab.1 Comparisons of the prevalence of the G6PD deficiency in wuhan and other cities of China

3 讨论

G6PD 缺乏症为一种遗传性溶血性疾病，发病的临床表现与一般溶血性贫血大致相同，分为新生儿黄疸、蚕豆病、药物性溶血、感染性溶血、非球形细胞溶血性贫血等临床类型［17］。G6PD 活性低下的新生儿更容易发生新生儿黄疸，这是由于G6PD 缺乏的新生儿在失去母源性抗氧化保护后，处理H2O2的酶不成熟，而新生儿器官还未发育完善，在感染或者药物等诱因存在的情况下，体内发生溶血，肝脏不能及时将间接胆红素转变为直接胆红素排出体外，造成血中间接胆红素浓度急剧升高透过血脑屏障，严重损伤脑细胞，导致核黄疸，造成智力低下［18-19］。此病目前尚无有效的治疗措施，预防为最重要的干预手段，患儿如果避免患病因素，可能终生不发病。因此，对新生儿进行G6PD 活性的早期筛查和诊断，能够有效的避免G6PD 缺陷所引起的一系列疾病的产生，更高效的保护患儿的健康。

世界上G6PD 缺乏症患儿主要分布在非洲、中东、亚洲的热带和亚热带地区，我国是G6PD 缺乏症的高发地区，并呈现“南高北低”的分布特点，长江流域以南多常见，其中以海南、广西、广东、云南、贵州、四川、香港和台湾等地区较高发，且有诸多研究报道，随着纬度北移，发生率呈现逐渐下降趋势，长江以北省市较少报道。湖北省地处华中长江流域，但目前却没有G6PD 缺乏症发生情况的相关报道。2016年湖北省内武汉市（包括下辖13个区）率先开展G6PD 缺乏症筛查工作，该工作由武汉市新生儿疾病筛查中心承担并运营武汉市新生儿遗传代谢疾病监督管理网络平台，本文就武汉市的检出情况做了统计分析，结果显示武汉市的G6PD 缺乏症发生率为0.18%（369/202994），与地处同一纬度的上海市检出率相同（0.18%），远低于我国华南、西南等G6PD 缺乏症的高发地区，明显高于长江以北的城市如：河北廊坊检出率0.05%，陕西省宝鸡市的检出率0.02%及山东省检出率0.00%～0.02%。而与湖北交界的湖南和江西，G6PD 缺乏症的检出率分别为0.39%和1.20%，这与G6PD 缺乏症的“南高北低”分布特点相一致。在本次研究中，武汉地区男性检出率为0.33%（353/108 529），女性检出率为0.02%（16/94 433），男性发病率显著高于女性（χ2=264.499，P=0.000），并且G6PD缺乏症的男性患儿的酶活力显著低于女性患儿［男（1.41±0.55）U/gHb，女（1.71±0.58）U/gHb；t=2.522，P=0.012］。这些结果也符合X 染色体连锁不完全显性遗传方式，因为男性只有一条X染色体，男性表现型多为酶活性显著缺乏，女性有两条X 染色体，表型以轻度缺陷（杂合子）多见，因此导致男女表型差异较大［20-21］。通过对召回的219例初筛阳性患儿进行G6PD 基因测序，共检出182例携带G6PD 致病突变位点，即初筛的检测效率达83.1%，这些结果也表明时间分辨免疫荧光法是一种准确性高、适合大规模的G6PD 标本筛查的方法，可以应用这种方法推广至湖北省的G6PD筛查。

G6PD 缺乏症筛查是先天性G6PD 缺乏症三级预防的重要且有效的方法，我国新生儿遗传代谢性疾病筛查起步较晚，2008年国家首次将G6PD 缺乏症纳入常规筛查范围，南方高发地区筛查起步较早、模式完善［22］；发病率较低的北方筛查尚未完全建立，大规模的筛查数据较少。然而随着经济的发展，南北人口的流动与通婚及定居的变迁，以及人民生活水平的提高，在全国范围内开展新生儿筛查具有重要意义。随着全国各地的外来人口不断流入，南北人群交流日益频繁，只有新生儿筛查工作的全面覆盖，才能了解本省G6PD 缺乏症的发病情况，为提高本省出生人口健康而努力。