葡萄多酚在化妆品中的应用

黄雪秋，韦有杰，马 璐，雷 禄

（百色学院，广西 百色 533000）

关键字：葡萄多酚；化妆品；面霜

生产葡萄酒的时候都会产生大量的葡萄籽、葡萄皮废渣，而葡萄籽、葡萄皮都具有较高的营养和药用价值，特别是，葡萄籽中多酚类物质的含量很高，特别是花青素类。花青素类含有多个酚羟基，低聚花青素可溶于水，而原花青素则是普遍被认为具有很高抗氧化性的物质，相较于维生素C有过之而无不及[1-3]。相关原花青素的提取方法的报道很多[4,5]，但目前提取很纯的且能很好保存原花青素的方法则还有待发掘，因为原花青素是多种聚合度类型并存。

目前，生产葡萄酒的葡萄籽、葡萄皮废渣主要用于生产饲料，未开发更多用途。我们尝试从葡萄籽中提取出较纯的葡萄多酚，之后将其用于制作面霜，研究该款面霜的性质。

1 实验部分

1.1 试剂和仪器

试剂：单甘酯、角鲨烷、黄原胶、硬脂酸异丙酯、卡波姆、二甲基硅油和海藻糖为化妆品级纯度；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、甘油、戊二醇、丁二醇、泛醇、EDTA二钠、苯氧乙醇、维生素C以上试剂均为分析纯；D101大孔吸附树脂。

仪器：研磨机、UV-3600plus型紫外分光光度计、恒温冷藏箱、分析天平、高压消毒柜、旋转蒸发仪、移液器 （1～1000 μL）。

1.2 实验原理

DPPH·乙醇溶液在517nm处有强吸收，通过测定在DPPH·乙醇溶液中加入面霜前后的吸光度值，可以得出DPPH·乙醇溶液浓度的变化，从而验证面霜是否具有抗氧化性。自由基清除率公式：清除率=（1-A样品/A空白） X100%

式中A空白为加入面霜前DPPH·乙醇溶液的吸光度，A样品为加入面霜后DPPH·乙醇溶液的吸光度。

1.3 实验步骤

1.3.1 葡萄多酚的提取流程

干燥葡萄籽→磨碎→石油醚脱脂→50℃干燥→60%乙醇做提取剂在50℃水浴中超声波辅助提取90min→离心分离→上层液减压浓缩→粗提葡萄多酚→柱层析（大孔树脂吸附分离，60%-90%的乙醇梯度洗脱）→减压浓缩→纯提葡萄多酚

1.3.2 面霜制备工艺

参照国家标准和基础理化指标配制，并进行稳定性和安全性试验[6]。配方如表1，A相混合搅拌并加热至85℃，保持15min，使之熔融均匀。同时B相混合搅拌并加热至40℃，保持10min，使之熔融均匀后，A相和B相混合置于乳化设备中乳化30min。最后加入C相物质，搅拌均匀，冷却至室温即可得到产品。

表1 面霜配方

1.3.3 抗氧化性测试

用无水乙醇配制1×10-4mol/L的DPPH·溶液，分别量取 4.98、4.96、4.94、4.92、4.90mLey 1×10-4mol/L的DPPH·溶液，相应往其中分别加入面霜样品 0.02g、0.04 g、0.06 g、0.08 g、0.1 g。超声波辅助均匀，之后在室温下避光静置30min。倒入比色皿，测定波长为517nm时的吸光度A样品。用相应量的无水乙醇与相应量的面霜凋零扣除溶剂的影响。以相应量的DPPH·溶液和相应量的面霜基质作为空白对照，其吸光度即为A空白。

2 结果与讨论

2.1 稳定性与安全性

根据国家标准的耐热、耐冷和冷热试验观察，所配置的葡萄多酚面霜稳定性较好，未出现分层、渗油、结块、析出颗粒等现象，亦无色泽、气味上的变化。

选30名志愿者，男10人，女20人，年龄分布22～55岁，每天早晚进行斑贴试验，连续7天，根据《化妆品安全评价程序和方法》GB7919-87标准观察受试者皮肤反应，受试者均没有出现起疱，糜烂、红斑、色素沉着等不良反应，初步证明葡萄多酚面霜是安全的。

2.2 清除自由基能力

葡萄提取物中的多酚结构，特别是原花青素结构，能与自由基形成半醌式自由基结构，减少自由基的积累，起到减缓皮肤衰老的作用。如图1所示，加入葡萄多酚DPPH·溶液颜色显著变浅，说明葡萄多酚具有显著的清除自由基能力。

图1 加葡萄多酚前后对比图

图2是面霜中维生素C、粗提葡萄多酚和纯提葡萄多酚等几种活性成分含量DPPH·自由基清除率的影响。由图2可知，DPPH·自由基清除率随活性成分含量的增加而增大，其中以纯提葡萄多酚面霜的自由基清除率最佳。这说明，经提纯后，葡萄多酚中的原花青素含量提高，抗氧化性增强。

图2 面霜中活性成分含量对自由基清除率的影响

从图3可知，葡萄多酚与维生素C都具有良好的清除自由基能力。等浓度下，短时间内，葡萄多酚的自有基比不上维生素C，随着时间的延伸，葡萄多酚清除自由基的能力优异于维生素C。

图3 葡萄多酚与Vc自由基清除能力对比

3 结语

葡萄多酚面霜温和无刺激，具有良好的清除自由基能力，在化妆品市场具有相当大的发展潜力。