江苏扬州地区4 682例女性高危型人乳头瘤病毒感染结果分析

解松刚,张 玲

(江苏省苏北人民医院 医学检测中心,江苏 扬州,225001)

人乳头瘤病毒(HPV)是一种来自乳头瘤病毒家族的DNA病毒，其影响人体皮肤表面的湿润黏膜，通过皮肤对皮肤的接触在人与人之间传播，是世界上最常见的性传播病毒[1]。大多数情况下,HPV感染不会引起临床症状而可逐渐自行消失，而在某些个体中，持续HPV感染可能导致疣、癌前病变和癌症，包括男性和女性生殖器及头颈部区域的疾病[2]。世界卫生组织报告显示，约84%的HPV相关癌症病变是宫颈癌。每年有超过50万的新发病例被诊断出来[3]。高危型HPV持续感染是宫颈癌及癌前病变的必备条件[4]。在不同的国家和地区，HPV亚型分布也不同，故明确一个地区的主要感染类型对宫颈病变的防治尤为重要。本研究分析了江苏扬州地区女性HPV感染情况，探讨与宫颈癌发生关系最密切的15种高危型HPV，旨在为该地区女性宫颈疾病的早期发现及有效治疗提供重要参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年5—9月在江苏省苏北人民医院进行高危 HPV分型检测的女性共4 682例作为研究对象，年龄17～83岁。入选者均无盆腔化疗、放疗病史，无妊娠，排除全子宫切除术者和有宫颈手术史者。标本采集:采样避开月经期，采样前72 h内禁止性生活，避免阴道冲洗及上药。妇科医师以窥阴器暴露宫颈，用棉签擦去宫颈过多的分泌物，将宫颈刷置于宫颈口，轻搓宫颈刷使其单方向旋转3～5圈，取出宫颈上皮脱落细胞放入加有细胞保存液的专用管中。拧紧管盖于4 ℃冰箱保存,72 h内进行检测。

1.2 仪器与试剂

高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型核酸测定试剂盒(荧光PCR法)购自上海之江生物科技股份有限公司，可检测15种高危型别HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、82、66。检测仪器为SLAN-96P型实时荧光定量PCR仪。

1.3 DNA提取及检测

取1 mL标本于微量离心管(EP管),13 000转/min离心5 min,弃上清，用无菌生理盐水洗涤1 次，留沉淀。最后加入核酸提取液充分混匀，沸水浴10 min,离心备用。根据试剂盒要求吸取4 μL上清液作为模板加入反应管中进行PCR反应。扩增参数及结果判定严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学分析

采用 SPSS 16.0 统计软件进行数据处理与统计学分析，计数资料采用例数或率表示，各组间率的比较采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HPV感染总体情况

4 682例受检者中,HR-HPV阳性结果936例，总检出率为19.99%。HR-HPV阳性患者中，单一感染718例(占76.71%),二重感染155例(占16.56%),三重感染45例(占4.81%),四重感染15例(占1.60%),五重感染3例(占0.32%),未发现六重及以上的感染类别。

2.2 HPV不同亚型总体分布情况

对936例高危HPV阳性受检患者进行分析，感染率高的5种亚型由高到低依次是HPV52、16、58、51、39型。718例单一感染中，感染率高的前3种亚型依次是HPV52、16、58型;218例多重感染中，感染率高的前3种亚型依次是HPV52、58、16型。见表1。

表1 HR-HPV亚型分布特点[n(%)]

2.3 不同年龄组HPV感染情况

根据年龄的不同，将所有受检者分为≤20岁组(n=42)、21～30岁组(n=961)、31～40岁组(n=1 293)、41～50岁组(n=1 565)、51～60岁组(n=623)、61～70岁组(n=175)和≥71岁组(n=23)这7个年龄组，各组HR-HPV感染情况依次为9例(21.43%)、143例(14.88%)、237例(18.33%)、323例(20.64%)、164例(26.32%)、56例(32.00%)、4例(17.39%)。受检人群以50 岁以下人群为主，但感染率较高的3个年龄组分别是61～70岁组(32.00%)、51～60岁组(26.32%)和≤20岁组(21.43%)。不同年龄组的HPV感染率差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.4 不同年龄组女性HPV亚型的分布

江苏扬州地区不同年龄组女性感染HPV的亚型各不相同:≤20岁组常见HPV亚型类别为HPV16、58、52、18、59型,21～30岁组为HPV52、16、39、58、18型,31～40岁组为HPV52、16、58、51、59型,41～50岁组为HPV52、16、58、51、39型,51～60岁组为HPV52、16、58、39、56型,61～70岁组为HPV58、52、56、16、35型。

3 讨 论

宫颈癌是世界上第二常见的女性恶性肿瘤，中国2015年约有98 900例新发病例报道，占全球发病总数的18.7%[5]。HPV的致癌基因型被认为是宫颈癌发生的必要因素[6]。近年来，宫颈癌的发病呈现年轻化趋势，而高危型HPV感染与此密切相关[7]。在宫颈癌的预防中，筛查是一项重要的二级预防策略，可有效降低其发病率，目前中国最主要的筛查手段是细胞学和HPV-DNA检测，而后者更具有优越性。HPV-DNA检测可直接查出HPV的高危亚型，还可为宫颈病变患者手术前后的随访提供依据[8-9]。世界范围内HPV感染存在明显的地区与种族差异，感染亚型不同，致癌性也不尽相同[10]。因此，了解本地区的HPV感染现状及主要型别，对于防治本地区人群宫颈病变及宫颈癌有重要意义。

本研究发现,4 682例受检患者中,HR-HPV阳性936例，总阳性率19.99%,该结果低于陕西咸阳地区的阳性率32.14%[11],高于上海浦东高桥地区的阳性率16.64%[12],也高于四川南充地区的阳性率17.5%[13],基本符合之前研究[14]报道的中国不同地区HPV感染率16.2%～41.9%。这种差异可能是由于检测方法不同和受检人群独特的地域因素所致。此外，本研究结果表明，不同年龄组HPV感染率有显著差异(P<0.05),21～30岁组、31～40岁组、41～50岁组这3个年龄组感染率差异不大，≤20岁组、51～60岁组及61～70岁组的检出率显著增高，而≥71岁组的检出率显著下降，总体呈“U”型分布。≤20岁组感染率高可能与该年龄组女性的宫颈上皮还未发育成熟、性生活过早、过频以及性伴侣过多等有关。而51～70岁年龄段女性HPV感染率升高可能是由于绝经期前后女性体内雌激素水平下降，造成机体生理与免疫调节紊乱，抵抗力差而有利于病毒复制。70岁后的患者子宫颈上皮已经萎缩，且性生活明显减少，导致HPV感染率大幅度降低。

本研究中,HPV感染者以单一感染为主(占比76.71%),其次是二重感染(占比16.56%),五重及以上的感染类型少见。Lee等[15]研究表明，单一感染可使宫颈癌发病风险增加19.9倍，而多重感染可使宫颈癌发病风险增加31.8倍，故HPV多重感染可增大宫颈癌患病风险。而Massimi等[16]指出，宫颈癌的发生与HPV多重感染无相关性，只与感染的亚型及持续感染有关。鉴于地理环境和种族差异等因素，江苏扬州地区HPV多重感染与宫颈癌的相关性还需要进一步展开研究。

本地区HPV感染女性患者中，共检出15种高危型别。所有HPV感染病例中，主要亚型按感染率由高到低依次是HPV52、16、58、51、39型;单一感染中，主要亚型按感染率由高到低依次是HPV52、16、58型;多重感染则以HPV52型和HPV58型联合其他亚型为主。有研究指出，世界各地宫颈癌患者中,HPV16型是最主要的感染亚型，其次是HPV18型，其他亚型随地区分布显现出一定差异。中国大陆HPV感染亚型处于前4位的分别是HPV16、18、58、52型[17-18]。本研究结果说明，江苏扬州地区HPV感染亚型以HPV52、16、58、51型为主，地域特征明显，HPV18型在本地区感染分型中并未显出特别优势。此外，本研究还对不同年龄组女性感染HPV的常见亚型进行了统计，发现各年龄组间HPV亚型分布存在差异，可为HPV疫苗的研发提供针对性指导。

综上所述，本研究对江苏扬州地区妇女高危型HPV感染亚型及不同年龄段感染特点进行了分析，结果显示本地区女性HPV感染以单一感染为主，常见HPV亚型为HPV52、16、58、51、39型，各年龄段妇女HPV亚型分布也不相同。这对于帮助本地区女性合理选择 HPV预防疫苗，降低区域内宫颈癌发病率及早诊断、早治疗都有着重要意义。