新辅助化疗初期局部进展期乳腺癌患者T淋巴细胞亚群水平变化及其意义

刘 超 杨丽萍 程 红 王烈亮 孙正魁 吴毓东

新辅助化疗又称为早期化疗、原发化疗，近年来已成为局部进展期乳腺癌的标准治疗。新辅助化疗有利于远处微转移灶的早期治疗、能对原发肿瘤的化疗反应作出评估，且不会增加手术并发症，另外可降低肿瘤分期，使手术更彻底[1]。但是化疗对患者的免疫功能也有一定影响。我们对接受新辅助化疗的局部进展期乳腺癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群进行检测，观察其水平的变化及临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择我院收治的乳腺癌患者88例作为观察组，均为首次治疗的女性患者，经病理检查证实为乳腺浸润性导管癌；年龄41～72岁，平均年龄(57.81±12.09)岁；根据AJCC肿瘤分期为Ⅱb期51例，Ⅲ期37例。入选标准：患者血常规、心电图、肝肾功能检查无异常；预计生存期>3个月；KPS评分>60；入院前未接受免疫抑制药物治疗；无化疗禁忌证；既往无手术、化疗、放疗史。另外选取查体中心体检健康者50例作为对照组，均为女性，年龄40～67岁，平均年龄(57.53±11.28)岁。

1.2 新辅助化疗方法

观察组患者给予新辅助化疗方案。环磷酰胺500 mg/m2静脉滴注，第1天；表阿霉素80 mg/m2静脉注射，第1天；氟尿嘧啶500 mg/m2静脉滴注，第1、8天；3周为1个周期，共化疗3个周期。

1.3 观察指标

观察组新辅助化疗前后检查血常规、心电图及肝肾功能。观察组于化疗前后、对照组于查体时抽取清晨空腹静脉血3 ml，单克隆抗体CD3FTTC、抗CD4PE、抗CD8PE购自Becton Dickinson公司，采用流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞水平，用CXP软件分析实验所得数据。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 2组外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平比较

化疗前、化疗第1周观察组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平显著低于对照组，比较差异有统计学意义(P<0.05)；化疗第2、3周期观察组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平逐渐升高，逐渐接近正常对照组水平。化疗第2、3周期观察组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平与化疗前比较，差异有统计学意义(P<0.05)。外周血CD8+T淋巴细胞水平化疗前后变化不大，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平比较/%

*为与对照组比较，P<0.05；#为与化疗前比较，P<0.05。

2.2 乳腺癌患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平与年龄及分期的关系

年龄≤60岁组化疗前后外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平均显著高于>60岁组，比较差异有统计学意义(P<0.05)；Ⅱb期；患者化疗前后外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平均显著高于Ⅲ期患者，比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

3 讨论

T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群，在正常机体内各个T淋巴细胞亚群相互作用，维持着机体正常的免疫功能。根据细胞表面标志，利用单克隆抗体将其分为不同功能亚群。当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，就可导致机体免疫紊乱并发生一系列的病理变化[2]。成熟的T淋巴细胞表面均可表达CD3分子，而CD4、CD8不能同时表达于成熟的T淋巴细胞表面，故可将成熟的T淋巴细胞分为CD4+T细胞和CD8+T细胞二个亚群。血液中T淋巴细胞亚群的检测是观察机体细胞免疫水平的重要方法，对恶性肿瘤、自身免疫性疾病、免疫缺陷病、血液系统疾病的诊断、治疗及预后判断有重要作用[3-4]。

表2 乳腺癌患者外周血CD3+T淋巴细胞水平与年龄及分期的关系(%)

目前越来越多的研究表明，T淋巴细胞亚群在各种临床疾病都有异常改变，在疾病的发生发展过程中不同的T淋巴细胞又产生着极其重要的影响[5]。在自身免疫性疾病中，T抑制/细胞毒细胞(CD8+)的数量的功能低下是发病的重要因素，有时也有T辅助/诱导细胞(CD4+)数量和功能的增高；在乙型肝炎、自身溶血性贫血、类风湿症、重症肌无力等患者都具有类似的T亚群异常的特征。CD4+/CD8+比值减少是免疫缺陷病的重要特征，在AIDS患者中就存在着CD4+细胞显著减少的现象；在一些上呼吸道感染的患者中CD8+细胞的数量和功能都有异常增高的现象。很多感染性疾病都和免疫抑制有关，CD4+/CD8+比值的倒置被认为是病毒感染性疾病的重要特征。在肿瘤患者外周血中T淋巴细胞亚群数值都有异常，其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显著降低，说明肿瘤患者的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长转移[6]。骨髓造血细胞的增殖和分化障碍也与T细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒细胞减少症中，患者外周血CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+/CD8+比值明显下降。因此T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生、发展、了解发病机制、指导临床治疗都有极其重要的理论意义和临床意义，它已成为临床检验的一项重要指标[7-9]。高翠红等[10]对乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白的变化进行分析，结果乳腺癌患者全血CD8+高于健康对照组，血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值则低于健康对照组，IgG、IgM水平高于对照组。提示，乳腺癌患者细胞免疫功能降低，而体液免疫功能增强。且进一步证实检测外周血T细胞亚群和免疫球蛋白对判断乳腺癌患者的病情、预后及机体的免疫功能状态有指导意义。本研究中乳腺癌患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平显著低于对照组，而外周血CD8+T淋巴细胞水平差异不大。可见乳腺癌患者细胞免疫功能降低。

化疗是利用化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移，直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式，是一种全身性治疗手段，由于化疗药物的选择性不强，在杀灭癌细胞的同时也会不可避免地损伤人体正常的细胞，降低患者免疫力。化疗时，如何达到最佳的抗肿瘤作用又能预防药物的不良反应是目前临床治疗的关键。有研究发现乳腺癌患者辅助化疗1周期后，原本降低的 CD4/CD8比值恢复至正常[11]。白海亚等[9]对局部进展期乳腺癌患者新辅助化疗前、后T淋巴细胞亚群及NK细胞免疫功能的变化进行观察，结果乳腺癌患者治疗前CD4+、CD4+/CD8+明显低于对照组，NK细胞明显低于对照组，新辅助化疗后，有效组总CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞较治疗前均显著升高，CD8+降低；无效组CD3+、CD4+/CD8+及NK细胞较治疗前显著降低，而CD8+升高。提示，辅助化疗能提高局部进展期乳腺癌患者的免疫功能。

本研究化疗第1、2、3周期观察组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平逐渐升高，逐渐接近正常对照组水平，可见辅助化疗能显著提高局部进展期乳腺癌患者的免疫功能，与以上研究结果一致。且本研究进一步证实化疗前后外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平与年龄及临床分期有关，临床对于年龄>60岁，临床分期Ⅲ期的局部进展期乳腺癌患者应特别加以注意。