KLF4、Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

石 芳 赵建芳

锌指转录因子Krtippel样因子4(KLF4)主要参与胚胎发育及肿瘤的发生、发展，可有效抑制多种肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移。Ki-67是与细胞增殖特异相关的一种核抗原，能够反映细胞增殖的活性状态，常被作为肿瘤细胞增殖性标志基因。E钙黏蛋白(E-cadherin)是反映上皮细胞正常功能的重要指标，可作为肿瘤转移、侵袭评价的重要指标。在宫颈鳞状细胞癌中，KLF4及Ki-67于细胞核内表达，E-cadherin于细胞膜及细胞质内表达。有研究表明，KLF4、Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌中的表达与其病理特征具有密切关系[1]。本研究主要探讨KLF4、Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌中的表达与临床特征的相关性，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

以我院2012年12月至2017年12月收治的79例确诊为宫颈鳞状细胞癌的患者为研究对象，所有患者均经病理学诊断为宫颈鳞状细胞癌，病例资料完整，患者年龄33～72岁，平均(53.68±3.15)岁；肿瘤直径1～8 cm，平均(4.56±0.38)cm；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期71例，Ⅲ期8例；低分化癌28例，中、高分化癌51例；淋巴结有转移24例，无转移55例；有局部浸润7例，无局部浸润72例。

1.2 方法

KLF4(1∶100)、 Ki-67抗体、(1∶1 500)及E-cadherin(1∶50) 均购自Sigma公司，Max VisionTM试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。采用MaxVision两步SP法对KLF4、Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达进行分析。取4 μm厚切片，常规脱蜡至水后进行高温高压热修复，并严格按照试剂盒上的说明书进行操作。

1.3 结果判定标准

KLF4在细胞核上定位表达，核中出现黄色颗粒、结合其百分率及染色强度进行综合评分判断：>10%则为阳性(+)，≤10%则为阴性(-)[2]。Ki-67采用阳性率评分，阳性率在30%以内则为低表达，阳性率在30%及以上则为高表达[3]。E-cadherin采用阳性率及阳性强度评分，阳性率：0分：5%以内，1分：>5%～25%，2分：>25%～50%，3分：>50%～75%， 4分：>75%及以上。染色强度：0分：未着色，1分：淡黄色，2分：棕黄色，3分：棕褐色。两项乘积得分≤8分则为低表达，9分及以上则为高表达[4]。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件包，等级资料之间比较采用Wilcoxon秩和检验，行χ2检验，采用Pearson分析法分析三者的相关性，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 KLF4在宫颈鳞状细胞癌中的表达与病理特征的关系

在宫颈鳞状细胞癌中KLF4的表达仅与肿瘤分化程度、Ki-67及E-cadherin表达有关(P<0.05)，而与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴结及局部浸润无关(P>0.05)。KLF4表达与Ki-67增殖指数呈负相关，与E-cadherin表达呈正相关，见表1。

2.2 Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌中的表达与病理特征的关系

在宫颈鳞状细胞癌中Ki-67及E-cadherin的表达仅与淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05)，而与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、局部浸润无关(P>0.05)。E-cadherin与Ki-67的表达无明显相关性(P>0.05)，见表2。

表1 KLF4在宫颈鳞状细胞癌中的表达与病理特征的关系(例，%)

3 讨论

宫颈鳞状细胞癌是宫颈癌中最为常见的1种组织学类型，其发生往往从慢性宫颈炎逐渐发展为宫颈上皮内瘤变，再到癌变的过程。针对宫颈鳞状细胞癌临床上常采用手术联合放化疗手段进行，为评价其治疗效果、判断预后，临床上一直在寻找可以预测肿瘤转移以及预后的生物标记物，以期为临床提供参考。

KLF4是1个复杂干性转录因子，其异常表达可有效评估肿瘤发生、发展。有研究表明[5]，KLF4在肺癌及消化道类癌中的表达均可显著发挥肿瘤抑制因子的功能，抑制肿瘤的侵袭及迁移，而在乳腺癌中则可促进癌细胞的侵袭和迁移，可见KLF4可通过诱导不同靶基因的表达，对癌基因发挥不同作用，其结果与宋晖等报道一致[6]。本研究结果表明，在宫颈鳞状细胞癌中KLF4的表达仅与组织学分级、Ki-67及E-cadherin表达有关(P<0.05)，而与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴结及局部浸润无关(P>0.05)。提示KLF4在宫颈癌中发挥抑制肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移， KLF4的表达在宫颈鳞状细胞癌中下调，其原因可能与肿瘤发生、发展过程中去分化相关[7]。另外KLF4表达与Ki-67增殖指数呈负相关，与E-cadherin表达呈正相关，表明KLF4与细胞增殖能力相关，且KLF4可能通过E-cadherin抑制肿瘤细胞的增殖及迁移[8]。

表2 Ki-67及E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌中的表达与病理特征的关系(例，%)

Ki-67与细胞周期的调节及控制有密切关系，常被作为肿瘤细胞的增殖性标志，E-cadherin是1种钙黏蛋白，其下调可增加肿瘤细胞迁移和侵袭的能力[9-10]。在本研究中，Ki-67及E-cadherin的表达仅与淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05)，而与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、局部浸润无关(P>0.05)。E-cadherin与Ki-67的表达无明显相关性(P>0.05)。提示E-cadherin与Ki-67的表达在一定程度上可判断肿瘤细胞的增殖、转移及分化程度，对判断预后具有重要意义。

综上所述，在宫颈鳞状细胞癌中，KLF4与Ki-67及E-cadherin之间有一定的相关性，三者联合检测可为临床判断宫颈鳞状细胞癌发生、发展提供参考。