孕激素受体阴性子宫内膜样腺癌中PTEN的表达及意义

陈勇，王夙斐

(长江大学医学部，湖北 荆州 434000)

易村犍，魏华

(长江大学第一临床医学院 荆州市第一人民医院妇产科，湖北 荆州 434000)

子宫内膜癌是妇科常见的恶性生殖系统肿瘤，其发病率逐年上升，目前已居达女性所有恶性肿瘤的第4位，甚至在有些发达国家其发病率已位居妇科恶性肿瘤的第1位[1]。子宫内膜样腺癌是子宫内膜癌中最常见的病理类型，目前子宫内膜样腺癌的治疗方式主要是全面分期手术及辅助放疗或化疗，但是手术使患者失去了女性卵巢内分泌功能。近年针对孕激素受体(PR)表达阳性的患者业已证实采用孕激素治疗有效，但是对于PR阴性的患者无较好的治疗方法。本研究通过检测PR及PTEN在子宫内膜样腺癌的表达情况，并分析与临床相关病理特征的关系，进一步探讨在PR阴性子宫内膜样腺癌中PTEN检测的意义。

1 资料与方法

1.1 资料来源

收集到的96例标本均在长江大学附属第一医院手术切除，患者术前未进行化疗及放疗等治疗，且术后由病理科专家诊断为子宫内膜样腺癌。

1.2 检测方法

收集到的标本均常规行规石蜡包埋、切片、HE染色。采用免疫组化Envision法(单克隆鼠抗人PR抗体及单克隆鼠抗人PTEN抗体均购自DAKO公司)检测PR及PTEN在肿瘤组织中的表达情况。

1.3 结果评定

PR的阳性表达定位在肿瘤细胞胞核，PTEN的阳性表达定位在肿瘤细胞胞质或胞核。切片染色结果评分根据阳性肿瘤细胞占比和细胞染色强度确定。随机选取5个高倍镜视野计算阳性细胞数：阴性0分，<10%为1分，10%～50%为2分，>50%为3分；同时确定染色强度：阴性0分，淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。两组相乘结果：0分(-)、1～3分(+)、4～6分(++)、7～9分(+++)。最终评定结果为：阴性：(-)和(+)，阳性：(+ +)和(+ + +)。

1.4 统计学分析

采用统计软件SPSS19.0，采用χ2检验，相关性分析用相关系数。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床病理特点

子宫内膜样腺癌96例患者年龄33～78(56.8±8.9)岁。组织病理分级：G1级30例(31.25%)，G2级38例(39.58%)，G3级28例(29.17%)。手术病理分期：Ⅰ期86例(89.58%)，Ⅱ～Ⅳ期10例(10.42%)。

2.2 PR及PTEN表达情况与临床病理特征的关系

PR表达与女性平均绝经年龄[2]无关(P>0.05)，但PR阳性表达缺失率在大于48岁年龄组中高于小于48岁年龄组。PR表达在组织病理学分级中比较差异有统计学意义(P<0.05)，且随着组织学分级越高，PR阳性表达缺失率越高。PTEN阳性表达缺失与女性平均绝经年龄无关(P>0.05)，PTEN阳性表达缺失率在各临床病理特征中比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 不同临床病理特征子宫内膜样腺癌中PR与PTEN表达情况

2.3 PR阴性时PTEN表达情况与临床病理特征的关系

共有44例标本PR表达阴性，其中PTEN阳性表达在组织病理分级表达情况为：G1级0例，G2级8例，G3级7例；在手术病理分期表达情况为：Ⅰ期13例，Ⅱ～Ⅳ期2例；PTEN阳性表达缺失在组织病理分级表达情况为：G1级7例，G2级6例，G3级16例；在手术病理分期表达情况为：Ⅰ期26例，Ⅱ～Ⅳ期3例。PR阴性时PTEN的表达与子宫内膜样腺癌的组织学分级相关(P<0.05)，且PTEN在G1级中表达缺失率明显高于G2及G3级，但与手术病理分期无关(P>0.05)。

2.4 PR与PTEN相关性分析

表2 PR与PTEN的相关性

PR阳性表达52例(54.17%)，PR阳性表达缺失44例(45.83%)；PTEN阳性表达34例(35.42%)，PTEN阳性表达缺失62例(64.58%)。在52例PR阳性子宫内膜样腺癌标本中，PTEN阳性表达缺失为33例，PR阳性子宫内膜样腺癌中PTEN阳性表达缺失占比例为63.46%；在44例PR阴性子宫内膜样腺癌标本中，PTEN阳性表达缺失为29例，PR阴性子宫内膜样腺癌中PTEN阳性表达缺失占比例为65.91%。子宫内膜样腺癌中PTEN表达与PR表达无相关性(相关系数r=0.025，P>0.05)。见表2。

3 讨论

子宫内膜癌是欧美等发达国家最常见的妇科恶性肿瘤，随着全球经济发展及生活环境的改变，其发病率仍在逐年上升，在我国子宫内膜癌发病率也开始呈现增高及年轻化的趋势。

子宫内膜癌主要分为两型：Ⅰ型(雌激素依耐型)和Ⅱ型(非雌激素依耐型)。Ⅰ型主要组织病理类型包括子宫内膜样腺癌,Ⅱ型主要组织病理类型包括浆液性细胞癌、透明细胞癌和癌肉瘤。子宫内膜样腺癌是子宫内膜癌最常见的病理类型，占各种亚型的80%以上。子宫内膜样腺癌患者主要接受全面分期手术为主及辅助性放疗或化疗的综合治疗。虽然这些治疗提高了患者的生存率，但患者往往失去生育能力和女性卵巢内分泌功能，导致全身代谢紊乱及相关并发症，严重影响患者的生活质量。

中国女性的平均绝经年龄约为48岁，理论上只要卵巢存在排卵就有生育的可能，随着俩孩时代的开放，这种生育的希望可能更迫切。但是对于患有子宫内膜样腺癌且希望保留生育能力的女性来说，这是一种艰难的选择。基于子宫内膜样腺癌的发生是由于雌激素的长期作用而无孕激素拮抗导致的发病机制，目前已开展以孕激素及其衍生物治疗的一种非手术方法。一般认为孕激素对癌细胞有直接抑制作用，在外源性孕激素作用下，孕激素通过与其特异性靶细胞受体结合，抑制癌细胞增长，逐渐向分泌状态转化，促进癌细胞凋亡和萎缩。Koskas等[3]报道，子宫内膜癌患者经大量孕激素保守治疗后的完全缓解率约为80%，复发率为25%左右。目前关于PR的表达情况与患者预后的关系已经有大量研究，均认为PR表达阳性患者其预后较PR阴性患者更佳。临床上已有通过补充孕激素治疗子宫内膜癌后成功妊娠的报道[4]。本研究发现PR表达在组织病理学分级中比较差异有统计学意义(P<0.05)，且随着组织学分级越高，PR阳性表达缺失率越高，也证实了以上结论。但是针对PR阴性的子宫内膜样腺癌患者，目前尚无较好的保留女性生育及卵巢内分泌功能的治疗方法。本研究发现PR阴性患者占全部子宫内膜样腺癌的45.83%，占平均绝经年龄以下的比例为28.57%。然而，针对此类临床亚型的保留女性生育及卵巢内分泌功能治疗方式的研究甚少。

PTEN基因是1997年被发现并被命名的一种肿瘤抑制基因[5]。PTEN是一种兼具蛋白磷酸酶和脂质磷酸酶活性的双特异性磷酸酶，具有促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长、侵袭转移等主要功能[6, 7]。目前大量研究表明，PTEN基因的缺失、失活或减弱在多种肿瘤如胶质母细胞瘤、前列腺癌、乳腺癌和黑色素瘤中均有发现[8]。有研究发现PTEN基因是子宫内膜癌中最常见的突变基因，且其突变主要发生在Ⅰ型子宫内膜癌。本研究发现PTEN阳性表达缺失率在子宫内膜样腺癌患者中为64.58%，同时发现在组织病理分级G1级中表达缺失率高于G2级及G3级，且呈递减趋势。在手术病理分期早期中表达缺失率高于晚期，可见PTEN表达缺失在子宫内膜样腺癌是早期分子事件。但是PTEN阳性表达缺失率在各临床病理特征中比较差异无统计学意义，该结果也与国内学者报道的基本一致[9]。通过进一步分析发现当PR阴性时PTEN的表达与子宫内膜样腺癌的组织学分级相关(P<0.05)，且PTEN在G1级中表达缺失率明显高于G2及G3级，表明PTEN可能参与PR阴性子宫内膜样腺癌的发病机制，但仍需要更多的样本量来验证此结论。Nei等[10]通过检测孕激素治疗后复发的患者发现存在PTEN表达缺失，提示PTEN的缺失可能有拮抗孕激素的作用，但具体分子机制还有待进一步研究。该结论可能有助于解释使用孕激素治疗PR阳性的子宫内膜癌有效率达不到100%的可能分子机制。

此项研究存在几个局限性。首先，样本容量不是很大，未来仍需大样本来验证此结论。其次，这是一项现象分析，我们无法探讨PR和PTEN表达缺失导致子宫内膜样腺癌的机制。同时，我们没有检测到PR和PTEN异常表达的相关性。

综上所述， PR的表达与子宫内膜样腺癌的发生发展相关。临床上希望保留生育能力和女性卵巢内分泌功能的子宫内膜样腺癌患者，若检测出PR阳性，使用孕激素是一种较好的替代手术方法。PTEN作为子宫内膜样腺癌早期分子事件，对于子宫内膜样腺癌的早筛查、早诊断具有临床意义。因此我们建议对于年轻的早期子宫内膜样腺癌患者，在选择孕激素治疗时建议联合筛查PR及PTEN的表达情况，从而来判断激素治疗的高效性。同时PTEN也可能参与PR阴性子宫内膜样腺癌的发病机制，针对PTEN的靶向治疗可能弥补PR阴性子宫内膜样腺癌患者保留生育及卵巢内分泌功能治疗的空缺。