孕中期羊水染色体多态性与妊娠结局的关系研究*

李 楠，吴晓昀，严 芳，李 婕，张 珍,朱 燕

(广东省第二人民医院检验医学部,广东广州 510317)

染色体多态性是个别染色体上的微小变异，表现为结构及带型强度的变异。一般涉及在遗传上不活跃的含高度重复DNA 的结构异染色质区，而此区无遗传信息传递，发生变异后一般不会引起临床表型异常。然而，国内外均有研究表明，染色体多态性所具有的遗传效应可能在一定内外环境影响下，导致相应的临床表型或妊娠异常等[1]。本研究通过羊水染色体核型分析及跟踪随访，探讨染色体多态性与妊娠结局的关系，旨在为产前诊断工作提供科学的数据支撑。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2015年1月至2018年3月，由于高龄、异常妊娠史、产前筛查高风险或B超异常等高危因素来本院产前诊断中心就诊的孕期年龄在20～46岁，孕周为16+3～24周的孕妇共581例。所有孕妇经过遗传咨询并签署知情同意书后自愿接受羊膜腔穿刺术进行产前诊断。

1.2研究方法

1.2.1无菌条件下经超声介导行羊膜腔穿刺术，抽取羊水20.0 mL，离心后留细胞沉淀物及羊水0.5 mL，加入10.0 mL Gibco培养基，吸管吹打混匀后平均分至两个25.0 mL的培养瓶中，置37 ℃，5% CO2恒温培养箱中培养。经培养后制备染色体标本，G显带后进行核型分析，计数30个中期分裂相，分析3个以上的核型，对于嵌合体患者，则计数100个中期分裂相，分析5个以上核型。

1.2.2核型分析检测出胎儿染色体多态性时，召回孕妇夫妇抽取其外周血，常规外周血染色体制备，G显带后进行核型分析，明确胎儿染色体多态性的遗传来源，并随访其在孕期的产检结果及新生儿出生情况。

1.2.3外周血Y染色体AZF微缺失基因检测采用深圳亚能生物技术有限公司试验盒，按照试剂盒说明书逐步操作。

2 结 果

2.1581例孕妇中，核型分析发现羊水染色体多态性36例，占受检人数的6.20%。召回夫妇36对(100.00%)。 见表1。

表1 36例羊水染色体多态性核型分布

2.236例胎儿染色体多态核型中，出生男婴21例，女婴14例，1例为21pstk+合并21三体综合征而终止妊娠[47，XN，21pstk+，+21]；其中inv(9)8例，次缢痕变异8例，D组和G组染色体多态13例，大Y 1例，小Y 6例，见表1。产前诊断指征分布：年龄高风险≥35岁9例(25.00%)；产前血清学筛查高风险者23例(63.89%)，其中早期唐筛高风险8例(34.78%),中期唐筛高风险13例(56.52%)，中期唐筛临界风险2例(8.70%)；不良孕产史者4例(11.11%)。

2.336例胎儿染色体多态核型中,35例多态性核型遗传自父母其中一方，且父母无异常临床表型；仅有1例21ps+多态性核型为新生变异，为39+2周顺产男婴，出生时体质量3.05 kg，身长50 cm，Apgar评10分，孕妇在孕期产检以及胎儿出生后均未见明显异常，新生儿期保健各项指标均在正常范围内。

2.4外周血Y染色体AZF下微缺失基因检测结果为：6例中有2例AZFc区的SY152位点缺失，其余4例未发现AZF微缺失。

3 讨 论

染色体多态性是指正常人群中经常可见到各种染色体形态恒定的微小变异，其发生率为2.6%[2]，常涉及9号染色体倒位，D、G组短臂和Y染色体长臂长度变异，并按孟德尔方式遗传，有家族聚集现象，但传统观点认为上述变异不会引起表型效应[3]。本研究58例孕妇中染色体多态性的发生率为6.20%，高于普通人群。

9号染色体臂间倒位[inv(9)]在人群中的发生率为1.00%～1.65%[4],韩国有学者报道，inv(9)患者与健康人群相比畸形率没有显著差异[5],但有学者发现成年患者可出现生育障碍[6]。因有一部分本身或配偶带有结构异常(包括倒位、易位、插入等)的染色体，而表型正常的携带者很容易形成异常的配子而使后代受累，其共同的临床表现是引起反复自然流产、死胎、生育畸形儿等。本研究中inv(9)共8例，占羊水穿刺病例的1.38%(8/581)，与人群中的发生率一致,且均遗传自双亲之一，且双亲表型正常。

本研究中1qh+/9qh+共有8例，占羊水穿刺病例的1.38%(8/581)。目前，对于次缢痕增加会引起流产、生育异常等症状报道观点不一，有支持者[7]，也有反对者[8]。本研究对召回的8对夫妇做检查，结果显示胎儿多态性均遗传自双亲之一，且双亲表型正常。

Y染色体的多态性分为大Y、小Y和Y倒位。大Y过去一直认为是正常的变异形态，而现在认为大Y染色体高度重复的DNA序列可能增加大Y的不稳定性，导致配子或合子在早期细胞分裂时发生不分离、易位或基因数的增减等倾向，从而产生不平衡配子或合子而引起不育、流产等生殖异常[9-11]。小Y染色体，可因存在Y染色质微缺失引起细胞分裂发生错误，引起无精症或异常精子，导致对方流产、死胎等。本研究中大Y 1例，小Y 6例，占羊水穿刺病例的1.20%(7/581)。召回孕妇丈夫检查，Y的多态性均垂直遗传自父亲。我们同时对多态性为小Y的胎儿的父亲加做外周血Y染色体AZF微缺失检测，6例中4例未发现AZF微缺失，有2例为AZFc区的SY152位点缺失。由于Y染色体属于单倍体，当亲代存在AZF微缺失时，缺失的Y染色体会毫无保留地垂直遗传给子代，甚至有报道子代的AZF缺失片段会扩大[12]，子代成年后的精液情况也是不可预知的[13-14]。所以YqAZFc段缺失者自身的影响不大，也可以有正常的生育能力，但遗传给后代时可能有加重的趋势。

D、G组为近端着丝粒染色体，短臂上有多拷贝的rRNA基因，该基因拷贝数的增减对细胞代谢不会造成明显影响，但rRNA基因的增多可使染色体结构功能发生改变，引起D/C组随体区联合，导致染色体不分离和重排机会增多，形成染色体异常的配子和合子，从而导致胚胎发育障碍，致使流产、胚胎死亡或不育等[15]。本组研究中，D、G组染色体多态性胎儿有13例，占羊水穿刺病例的2.23%(13/581)。其中有1例21pstk+合并21三体综合征而终止妊娠；1例21ps+新生变异的病例在孕期及出生后未见明显异常，可能是由于随体区本不具有结构功能基因。由于病例数据少，其新生变异的具体机制及与临床表型效应的关系还需收集数据进一步研究。其余胎儿染色体多态性均遗传自双亲之一，且双亲表型正常。

本组资料显示，36例染色体多态性胎儿中，除1例合并21三体综合征终止妊娠外，均健康出生，随后分别对其36对父母进行外周血染色体检查，除发现1例21ps+新生变异外，其余胎儿多态性均遗传自双亲之一，且这些夫妇均表型正常。21ps+新生变异病例在整个孕期且胎儿出生后均显示正常，新生儿保健各项指标均在正常范围内。因此，笔者推断染色体多态性对临床表型及妊娠结局并无影响。所以在发现胎儿多态性时，应建议召回其父母做相应检查，确定来源。对于具有明确遗传来源的染色体多态性可参照其父母的身体发育、智力发育情况予以判断其妊娠结局。但新发的染色体多态性与胎儿的生长发育之间的关系还需收集更多的样本资料进行进一步的研究，以便更好地进行产前诊断，避免染色体异常胎儿的出生。

具有明确遗传来源的染色体多态性可参照其父母的身体发育、智力发育情况予以判断其妊娠结局，但新发的染色体多态性与胎儿的生长发育之间的关系还待收集更多的样本资料进行进一步的研究。