大中型猪场猪伪狂犬病抗体检测与分析

梁 乔

（1.辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁 沈阳 110164；2.辽宁省动物医学研究院，辽宁 沈阳 110164）

猪伪狂犬病（Pseudorabies,PR），又称Aujeszky氏病，是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起各种年龄猪产生发热、流产、繁殖障碍等主要病理特征的一种病毒性传染病[1]。感染后引起死亡率最高的是易感染母猪产下的哺乳期仔猪[2]。种猪出现繁殖障碍，母猪则容易出现早产、流产、死胎等症状，成年猪一般呈隐性感染，通常不会出现死亡现象，但生产性能会降低，引起免疫抑制造成多种疾病的混合感染[3]。该病的流行将给养猪业带来巨大的经济损失。目前绝大多数商品化的伪狂犬病疫苗被证实是gE基因缺失苗，广泛使用的是Bartha-k61株[4]，因此免疫的猪只是没有gE基因抗体的。通过gB抗体检测试剂盒能够确定猪的免疫状态，经过免疫后，gE抗体检测试剂盒能有效辨别该猪是经过免疫的还是被野毒感染的，进而分析辽宁地区大中型猪场猪伪狂犬病免疫抗体水平，进一步有效防控辽宁地区大中型猪场的伪狂犬病。1 材料和方法

1.1 血清的来源

该检测中的血清全部来自于区域一、区域二、区域三不同规模化猪场，被检血清均为随机采集，试验时间为2018年4—6月，据了解猪场全部免疫过伪狂犬病疫苗。

1.2 猪伪狂犬病抗体检测所用的检测试剂盒

IDEXX PRV-gE和IDEXX PRV-gB抗体检测试剂盒，由美国IDEXX公司生产，购自北京爱德士生物科技有限公司。

1.3 主要设备

37 ℃温箱型号：SPX-250、imark酶标仪、Thermo Scientific Heraeus Pico离心机、PN-960型号的洗板机、单道移液器、多道移液器、振荡器、蒸馏水等。

1.4 检测方法

利用阻断ELISA（酶联免疫吸附试验）的方法，具体操作步骤详见说明书。

1.5 结果判定

阴性对照平均值A（650）值减去阳性对照平均值A（650），其差必须大于或等于0.3。若S/N值小于或等于0.6，样品为PRV阳性；若S/N值小于或等于0.70但大于0.60，判为可疑需重测；若S/N比值大于0.70，样品则为PRV阴性。

2 结果与分析

2.1 大型猪场猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测情况

由表1可知，区域三的gE抗体阳性率最高，为36%，区域二的gE抗体阳性率为0；区域一的gB抗体阳性率最低，为84%，区域二的gB抗体阳性率最高，为100%。

表1 大型猪场猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测结果

2.2 中型猪场猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测情况

由表2可知区域一随机抽取了两个中型猪场，检测出gE抗体和gB抗体阳性率都高于其它地区，gE抗体平均阳性率为25%，gB抗体平均阳性率为86.67%；区域二的gE抗体阳性率为0，但是gB抗体阳性率较低，为76.7%；区域三的gE抗体阳性率为3.3%，gB抗体阳性率为73.3%。

表2 中型猪场猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测结果

2.3 不同地区猪群猪伪狂犬病gE和gB抗体检测结果

由表3可知，区域二的免疫预防取得了较理想的效果，gB抗体阳性率达到91.3%，gE抗体阳性率为0；区域一、区域三的gB抗体阳性率较区域二偏低，gE抗体阳性率较区域二偏高。但整体来看，免疫抗体水平还是较高的。

表3 不同地区猪群猪伪狂犬病gE和gB抗体检测结果

2.4 不同养殖规模猪群猪伪狂犬病gE和gB抗体检测结果

由表4可知，大型猪场的gE和gB抗体阳性率分别为18.0%、90.0%；中型猪场的gE和gB抗体阳性率分别为13.3%、80.8%；总体来看，大型猪场gE和gB抗体阳性率略高于中型猪场。

表4 不同养殖规模猪群猪伪狂犬病gE和gB抗体检测结果

3 结论与讨论

伪狂犬病是一种猪的急性、传染性疾病，仔猪的病死率很高，最高可达100%。在2012年国务院办公厅印发《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》[国办发（2012）31号]文件中，伪狂犬病被列为中国优先防制的二类动物疫病[5]。该病在世界范围内都有流行，诊断方法也不复杂，通过实验室诊断（ELISA方法、间接免疫荧光诊断、RT-PCR诊断等）或临床诊断都可判定[6]。目前，我国用于预防PRV的疫苗主要是gE基因缺失苗，通过血清学方法可以检测出产生该种抗体是由于免疫或是感染[7]。配合该检测的gE、gB试剂盒都经过认证，能够快速、方便、有效检测出抗体，因此该检测能够如实反映疫苗免疫效果，对于伪狂犬病的预防和控制有重要现实意义。

猪伪狂犬病gE抗体检测结果表明，270份猪血清中gE抗体阳性率为15.9%，其中区域一、区域二、区域三的阳性率分别为21.8%、0、23.8%，由于3个地区都免疫过gE基因缺失苗，因此出现gE抗体则表明该猪只感染猪伪狂犬病病毒，不难看出区域一、区域二、区域三中均有小程度的感染，同时发现大型场和中型场的感染率差距较小。

猪伪狂犬病gB抗体检测结果表明，270份猪血清中gB抗体阳性率为85.9%，其中区域一、区域二、区域三的阳性率分别为85.5%、91.3%、81.3%，总体来讲免疫抗体水平较高，免疫效果较好。同时发现大型场的gB抗体阳性率要稍微高于中型场。

猪伪狂犬病仍是畜牧业较重视的疫病之一，它能引起猪繁殖障碍、仔猪的神经症状和高致死率[8]。特别对于大中型猪场来说如果感染将造成重大的经济损失，虽然我国在预防伪狂犬病方面做出了很多努力，也取得了明显的成效，但还是无法彻底根除。因此，预防重于治疗，加强免疫预防，定期进行猪伪狂犬病gE抗体和gB抗体检测，提前制定合适的免疫程序和净化方案才是根本的预防措施。