微波消解-AFS测定蛴螬中硒 汞 锑的含量△

赵磊，刘北力，蒋黄卉，刘仕聪，郭思兰，孙艳涛*

1.四平市食品药品检验所，吉林 四平 136000；2.吉林省四平市第四人民医院，吉林 四平 136000；3.吉林师范大学 化学学院，吉林 四平 136000；4.吉林省四平市妇婴医院，吉林 四平 136000

蛴螬主产东北、江苏、安徽、四川、河北、山东、河南等地，从黑龙江起至长江以南地区以及内蒙古、陕西等地均有分布[7]。蛴螬生活在土壤中，这种习性可能引起锑及汞元素的富集，影响用药的安全[8-10]。锑与汞是可长距离输送的有毒元素，锑已被证实对人体及具有毒性及致癌性，并导致肝、皮肤、呼吸系统和心血管系统方面的疾病，锑中毒具有潜伏期长的特点[11]。工业中的锑用于阻燃剂、制造合金材料等。锑属于一类污染物，欧盟将锑列为高危害有毒物质和可致癌物质并予以管制。硒可防止因氧化而引起的衰老、组织硬化，并且它还具有活化免疫系统、预防癌症的功效，是必要的微量矿物质。硒参与构成很多酶类，特别是谷胱甘肽过氧化酶，可以保护细胞和组织，维持其正常功能。硒还有解毒功效，因为硒和金属有很好的亲和性。硒有很强的抗氧化性，具有保护心血管和抗肿瘤的作用[12-13]。

目前测定重金属及有害元素素的分析多为原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)。原子荧光光谱法(AFS)因化学蒸气分离、非色散光学系统等特性，是测定微量硒、汞、锑等元素最成功的分析仪器之一。是我国科技工作者为原子荧光光谱分析的发展作出了重要贡献[14]。微波消解-ASF操作简单，可为蛴螬药材测定锑、汞、硒元素提供参考[15]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

AFS-9700A双通道原子荧光光度计(北京海光仪器有限公司)；MARS微波消解仪(美国CEM公司)；Thermo Genpure Pro型超纯水器(美国Thermo公司)；电子天平BT125D型万分之一分析天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂制造)；BHW-09C-20恒温加热器(上海博通化学科技有限公司)

1.2 试药

锑标准储备溶液 100 μg mL-1(坛墨质检标准物质中心，批号：B1807102)；汞标准储备溶液 100 μg mL-1(坛墨质检标准物质中心，批号：B1803110)；硒标准储备溶液 100 μg mL-1(坛墨质检标准物质中心，批号：B1804120)；氢氧化钠、硼氢化钾、铁氰化钾、硫脲、抗坏血酸、溴酸钾、溴化钾、盐酸羟胺为分析纯；盐酸、硝酸、过氧化氢为优级纯，水为高纯水。

蛴螬收集9批药材，规定编号为qc1～qc9，经延边大学药学院吕慧子教授鉴定为蛴螬。

2 方法与结果

2.1 AFS仪器条件

设定仪器最佳状态，稳定30 min，还原剂为20 mg mL-1硼氢化钠溶液(称取10.0 g硼氢化钠溶于500 mL的2 mg mL-1氢氧化钠溶液)，载气为氩气，载流为(5∶95)的盐酸溶液，进样体积1.5 mL，以荧光强度值测量。仪器条件见表1。

表1 原子荧光光度法仪器条件

2.2 样品溶液及空白溶液制备

精密称取蛴螬样品0.5 g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸8 mL、过氧化氢2 mL，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置微波消解仪中消解(消解程序：一阶段10 min内升温至130 ℃保持10 min；二阶段，20 min升至160 ℃；三阶段，5 min升至180 ℃保持10 min)。二次消解完全后，取消解罐置恒温加热器中120 ℃缓缓加热至红棕色蒸气挥近并近干，加入1 mL盐酸。硒元素测定时加入100 mg mL-1的铁氰化钾1 mL。汞元素测定时加入5 mL高纯水，加入0.5 mL溴酸钾-溴化钾溶液(0.278 g无水溴酸钾、1 g溴化钾，加高纯水溶解并稀释至100 mL)，摇匀放置20 min后，滴加1滴 100 mg mL-1的盐酸羟胺溶液。锑元素测定时加入1 mL硫脲-抗坏血酸溶液(10.0 g硫脲加约80 mL高纯水，加热溶解，冷却后加入10.0 g抗坏血酸，稀释至100 mL)，分别用高纯水定容至10 mL，摇匀，作为样品溶液。同法制备样品空白溶液，作为空白校正。

2.3 标准曲线的制备

硒、汞、锑元素标准储备溶液，用高纯水稀释成标准使用液的质量浓度分别为100、10、100 ng mL-1。分别取硒、汞、锑元素标准使用液至10 mL量瓶中，制成表2中的不同浓度，每个容量瓶中分别加入1 mL盐酸。硒元素测定时加入100 mg mL-1的铁氰化钾1 mL。汞元素测定时加入7 mL高纯水，加入0.5 mL溴酸钾-溴化钾溶液(0.278 g无水溴酸钾、1 g溴化钾，加高纯水溶解并稀释至100 mL)，摇匀放置20 min后，滴加1滴100 mg mL-1的盐酸羟胺溶液。锑元素测定时加入1 mL硫脲-抗坏血酸溶液(10.0 g硫脲加约80 mL高纯水，加热溶解，冷却后加入10.0 g抗坏血酸，稀释至100 mL)，分别用高纯水稀释定容至10 mL，摇匀，作为标准溶液。同法制备标准空白溶液，作为空白校正。 测定其荧光强度，以浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制成标准曲线。硒、汞、锑元素的浓度见表2，标准曲线见表3。

表2 硒、汞、锑元素标准曲线浓度范围 ng mL-1

表3 硒、汞、锑元素的回归方程 μg L-1

2.4 精密度试验

取硒、汞、锑质量浓度分别为10、0.4、3.0 ng mL-1的标准溶液进行测定，结果荧光强度的RSD分别为0.21%、0.34%、0.38%，结果表明精密度良好。

2.5 稳定性试验

取硒、汞、锑质量浓度分别为10、0.4、3.0 ng mL-1的标准溶液进行测定，分别定容后的0、1、3、4、5 h测定，结果荧光强度RSD为0.33%、0.37%、0.42%结果表明5 h的稳定性良好。

2.6 重复性试验

取样品qc1共6份，按照2.2样品溶液制备方法制备后测定，结果硒、汞的RSD为1.41%、2.42%，结果表明重复性良好。

2.7 加样回收率试验

称取已知含量的供试品粉末9份(qc1)，每份约0.25 g，精密称定，分别加入 硒、汞、锑元素的标准溶液，配制成高、中、低3个浓度的加标样品各3份，按“2.2样品溶液制备”，测得值按标准曲线计算，结果回收率见表4。

表4 加样回收率试验(n=9) %

2.8 样品测定结果

取10批样品，按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项所示仪器工作条件测定，计算样品中硒、汞、锑元素的含量。结果见表5。

3 讨论

富硒稻谷硒含量在0.04～0.30 mg kg-1之间。而测定蛴螬中含硒元素在0.43～1.96 mg kg-1，说明蛴螬富含硒。而硒元素具有如提高人体免疫力，保护眼睛，保护修复细胞，减轻细胞损伤，防止血栓、冠心病等作用。而蛴螬具有破血，利水消肿。常用于太阴人跌打损伤，羸瘦腹满，癥瘕，经闭，浮肿等病症。说明硒元素与蛴螬的治疗作用有相关性。在汞元素测定时对比原子吸收测定方法，结果原子荧光与原子吸收测定的样品RSD<7.0%，说明测定结果的差异性较小。有害元素锑未检测到，说明具有迁移性的蛴螬未受到锑元素污染。样品处理时采用的微波消解过程，考察加入2 mL过氧化氢试液，结果比不加入过氧化氢消化效果好。如有批次消化不完全，可采用二次微波解。本实验采用微波消解-AFS测定蛴螬中硒、汞、锑的含量，具有简便、准确、测试成本较低的优点。

表5 9批样品中硒、汞、锑元素的含量(n=2) mg kg-1

注：/表示未检出。