Septin9基因与结直肠癌关系的研究进展

王中月，于洪升

（青岛大学附属医院 肿瘤科，山东 青岛 266000）

0 引言

结直肠癌的发病率位居我国乃至全球各类恶性肿瘤第三位[1]，死亡率也逐年攀升，严重影响人们的幸福指数、生命健康。虽然现有的治疗手段已取得一定疗效，但由于其恶性程度高，侵袭转移性强，复发隐匿性高，其预后欠佳。因此有效的早期筛查、诊断、复发监测及尽早干预治疗是CRC防治的关键。目前发现Septin9 基因与胃癌、卵巢癌、血液系统肿瘤等多种恶性肿瘤相关。最新研究表明，基于Septin9基因的高度甲基化是结直肠癌的重要表观生物遗传学标志之一，使结直肠癌诊疗跨入新的里程碑。现就Septin9基因的结构与生物学功能、致瘤机制及其在结直肠癌筛查、早期诊断、术后监测等方面的研究进展进行综述。

1 SEPT9基因与结直肠癌

SEPT9基因在结直肠癌中具有抑癌作用，随着对SEPT9基因的深入研究，发现SEPT9基因检测在结直肠癌的早期筛选和诊断中具有显著的优越性，在复发监测与预测疗效等方面也表现出巨大的潜力。

1.1 结直肠癌筛查与诊断

CRC筛查主要有内镜检查、影像学检查、血清肿瘤标记物检测、粪便潜血试验（FOBT）等，这些手段又各有缺点，FOBT易受到食物、药物等因素的影响且粪便采集不便，导致假阳性率较高；血清肿瘤标记物检测的敏感性和特异性较低；CT结肠成像虽然无创，但有辐射暴露，且其敏感性与病灶大小有关，对病灶直径＜1 cm者的敏感性低；结直肠镜属于侵入性检查，有很多检查禁忌证，肠道准备要求高且易产生肠穿孔、感染等并发症，患者依从性差，复诊困难。目前急需一种简便、无创或微创、快速、重复性好、特异性及敏感性高的监测手段,SEPT9基因检测应运而生，成为结直肠癌早期筛查、诊断的可靠检测技术。

YAN等[2]的研究显示，mSEPT9检测和FOBT筛查CRC的两者联合诊断灵敏度可达88.7%，mSEPT9基因检测在CRC诊断中具有准确性高、取样方便且无创、检测快速等优点，与 FOBT联合应用能提高CRC的诊断效能，可在结直肠癌早期筛查中作为临床实践的新方案[3]。

最近的一项研究显示，63%的CRC筛查的受试者拒绝接受结肠镜检查，接受了非侵入性筛查试验，其中83%选择了SEBT9血液试验。SEPT9检测还可应用于高风险症状群体的机会性筛查，表现出比平均风险人群更高的阳性率。在平均无症状人群中，据报道SEPT9测定灵敏度较低（SEPT9测定的为68%，FIT检测为79%，FIT-DNA试验为92.3%），特异性较低（SEPT9测定的为80%，FIT 检测为94%，FIT-DNA试验为86.6%）。在无症状人群筛查中，与血液SEPT9测定相比，FIT和FIT-DNA测试略胜一筹。Wu等人报道了首次基于PCR的SEPT9检测的机会性筛查，显示灵敏度为76.6%，特异性为95.9%，阳性率为25.8%（RESEPT研究）[4]。宋等人[5]最近报道了另一个使用Epi proCo- 2.0 CE检测的机会性筛查研究，并且显示敏感性为75.1%，特异性为97.1%（2/3算法），并且其中0期，I期，II期，III期和IV期的敏感性分别为52.4%,54.8%,82.9%,78.6%和86.7%，证明了该测定可用于早期CRC的机会性筛选。

SEPT9基因甲基化在肠癌组织和外周血中高表达，而在正常结直肠粘膜或者其他病变结直肠粘膜中少量表达，且在CRC的癌前病变患者( 如结直肠瘤与息肉) 中的检出率也较低。Warren等[6]研究也发现，在结直肠腺瘤与息肉组中，Septin9基因甲基化的阳性检出率分别为11.5%和11.2%，与正常对照组(10%和9.1%)相比，差异均无统计学意义。

1.2 SEPT9基因甲基化与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系

Lee等人报道，结直肠癌各期的SEPT9基因甲基化的阳性检出率分别为50%，70%，70%，100%，可见SEPT9基因甲基化水平可用来指导临床分期，并与肿瘤恶性程度呈正相关。此外，Lee等人首次报道：9例血液SEPT9甲基化阳性的患者在术后118天后有8例（88.9%）表现为阴性，而阳性的患者有局部复发、远处转移倾向及较低的无病生存率。另外，他们对8位CEA和CA199阴性的患者进行了血液SEPT9检测，其中5位在手术前SEPT9检测结果为阳性，在手术后显示阴性结果。他们进一步发现，在两个化疗周期后，血浆SEPT9甲基化水平下降，这与CT影像显示肿块缩小的表现是一致的。可见，SEPT9甲基化水平与CRC的发展密切相关，并且可以用作监测癌症进展和治疗效果的标志物。

研究认为结直肠癌患者中外周血甲基化 SEPT 9基因含量会随昼夜节律发生变化，因此样本时间不同，检测结果也有所不同。在正常对照的血浆样品中，SEPT9甲基化可以在24小时内的任何时间点都不被检测到。在腺瘤标本中，观察到SEPT 9阳性只有在一天的休息时间（在午夜0∶00）检测到。77.7%的结直肠癌患者的septin甲基化阳性率可在6∶00、12∶00和18∶00被检测到。与腺瘤相似，I期癌症病例，SEPT9阳性仅在午夜才检测到。II-IV期在所有时间点均显示SEBT9阳性。有趣的是，在使用1/3算法的前提下，大多数结直肠癌患者的最高SEPT9甲基化水平是在午夜被发现（比例占100%），在其他时间点如 6∶00、12∶00 和 18∶00 占 77.7%。根据 2/3种算法，所有CRC病例中SEPT 9阳性率最高也是出现在午夜占77.7%。其他时间点的阳性率为66.6%。

基于血液的SEPT9基因甲基化测定，各种算法（1/3,2/3,1/2和1/1 algorithms，1/3算法即3次PCR反应中有1次阳性，即可判定SEPT9基因甲基化阳性；上述算法依次类推）在CRC检测或筛选中的敏感性和特异性：1/2算法展示的灵敏度最低（0.59），具有可接受的特异性（0.91）。可以观察到2/3算法提供了最好的整体表现，而1/3算法表现出最佳的灵敏度，SEPT9甲基化、每个分期的阳性检出率与结直肠癌的恶性程度有关，临床分期越晚，阳性检出率越高，各种算法对各个分期的检出率的影响又有所不同，表现为 1/3＞2/3＞1/1＞1/2[7]。

Tóth等[8]的研究结果显示，CRC从I期到IV期，SEPT9 基因甲基化水平逐渐增高，而 SEPT9的 mRNA和蛋白表达水平降低，对CRCⅡ期的癌细胞进行逆甲基化处理，导致SEPT9基因的表达升高，表明SEPT9 基因 DNA 发生甲基化可导致 SEPT9 mRNA和蛋白表达降低，这可能会成为抗肿瘤靶向治疗的新热点。

2 结论

在结直肠癌的癌前病变中外周血 SEPT9基因甲基化阳性检出率较低，但在是结直肠癌早期筛查和诊断方面已占有一席之地，其有可能成为结直肠癌治疗效果、复发和转移的监测指标,但是需要我们后期开展大量的临床研究予以验证其在结直肠治疗和监测中的应用价值。