白藜芦醇软膏治疗病理性瘢痕的临床疗效研究

唐志铭丁继存荆梦晴李永聪翟晓翔

1.徐州市中医院 江苏，徐州 221003 2.徐州市中心医院

病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，常发生在外科手术、烧伤及外伤后，以真皮成纤维细胞大量增殖和胶原纤维过度沉积为主要病理特征，属于纤维增生性疾病[1]。病理性瘢痕不仅影响美观，而且还可因瘢痕挛缩而造成严重的功能障碍[2]，给患者身心健康带来严重影响。因此，病理性瘢痕的防治在皮肤外科及烧伤整形科领域是一项重要课题。白藜芦醇是一种存在于虎杖、藜芦、决明等中草药中的多酚类化合物，具有抗氧化、抗炎、改善微循环、保护线粒体功能等多种药理作用[3]。本课题组前期研究证实白藜芦醇还具有抑制病理性瘢痕成纤维细胞增殖的作用[4]，因此，笔者推测其应当具有防治病理性瘢痕的功效。为探讨白藜芦醇治疗病理性瘢痕的疗效，本课题组制备白藜芦醇软膏进行了临床研究，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 主要试剂 白藜芦醇购于上海金和生物技术有限公司（批号：0865143），冰片购于湖北清大中药饮片有限公司（批号：1043725），羟丙基-β-环糊精为江苏倍达医药科技有限公司产品（批号：170828），白凡士林购于上海现代哈森药业有限公司（批号：161003），十六醇、十八醇、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、三乙醇胺、吐温-80均购于天津市大茂化学试剂厂（批号：20151014、20150923、20150917、20151017、20150815、20151022、20150926、20150710、20150830）。

1.2 白藜芦醇软膏的制备

1.2.1 白藜芦醇包合物的制备 称取羟丙基-β-环糊精90g，置于干净烧杯中，加入纯化水，搅拌使其溶解。溶解完毕后，称取10g的白藜芦醇加入试管中，避光，加30mL无水乙醇溶解，然后滴加进上述烧杯中，避光继续搅拌。待包合结束后，将包合物溶液放入冰箱中静置90min，抽滤并将滤液倒入培养皿中，用打好孔的保鲜膜盖上，放入-80℃冰箱中冷冻，24h后取出放入真空冷冻干燥机中干燥，待包合物呈成白色蓬松的块状时，即得白藜芦醇环糊精分子包合物。

1.2.2 白藜芦醇软膏的制备 参考文献[5]制备白藜芦醇软膏，具体方法为：分别称取白凡士林50g、十六醇20g、十八醇20g、硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、羊毛脂20g，混合加热融化，保持温度80℃；另取冰片9g、尼泊金乙酯1g、三乙醇胺8g、吐温-80 5g、尼泊金甲酯1g、甘油50g，加纯化水100mL，加热溶解，保持温度80℃，在搅拌下缓缓加入到上述油相中，继续搅拌乳化形成基质；然后再加入白藜芦醇包合物250g，搅拌均匀至室温既得。

1.2.3 质量控制（1）性状：本品为乳白色软膏，色泽一致，均匀细腻，具一定的粘稠性，易于涂布于皮肤，不融化，但可软化；（2）稳定性：①耐寒试验，将软膏置于-5℃下24h，无分层；②耐热试验，将软管置于55℃，恒温6h，无分层；③离心稳定性，将软膏10g置于离心管中，2 500r/min离心 30min，无分层；（3）皮肤刺激性试验：选择3只健康家兔，选择背部面积约为2.5cm2的皮肤，剃去背毛。剃毛后休息24h，待剃毛处皮肤无刺激症状后，取0.5g本软膏涂于剃毛部位，涂抹均匀，形成薄层。24h后观察，局部未出现发红、皮疹和水疱等皮损。

1.3 临床观察

1.3.1 纳入标准与排除标准 纳入标准：（1）均符合《新编瘢痕学》中病理性瘢痕诊断标准[6]：①增生性瘢痕：局部增生但局限于病损区域内；②瘢痕疙瘩：增生性病变超出原有的皮肤损伤范围，并向周围正常皮肤侵袭性生长；（2）本项临床研究经徐州市中医院伦理委员会批准。所有受试者均同意参与本项研究，并签署知情同意书。

排除标准：（1）过敏体质及对药物成分过敏者；（2）1个月内应用过其他祛除瘢痕的方法者；（3）妊娠期或哺乳期女性，或备孕的育龄女性；（4）瘢痕表面积＞10cm2者。

1.3.2 一般资料 选择2016年1月至2018年1月到徐州市中医院就诊并符合病理性瘢痕纳入标准的患者共68例，其中男32例、女36例，年龄12～65岁，平均（23.4±2.6）岁；病程 3个月～4年，平均（13.7±0.6）个月。瘢痕分布部位：面颈部11例、胸背部28例、腰腹部9例、上肢7例、下肢13例。瘢痕大小（以面积计算）：＜2cm2者 39处、2～4cm2者 31 处、4～6cm2者17处、6～8cm2者6处、＞8cm2者3处。采用随机数字表法将患者分为治疗组和对照组，每组34例，治疗组共49处瘢痕，对照组共47处瘢痕。两组患者在性别、年龄、病程、瘢痕分布及大小等方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 两组患者性别、年龄、病程、瘢痕分布及面积大小比较（±s）

表1 两组患者性别、年龄、病程、瘢痕分布及面积大小比较（±s）

组别 例数 分布部位（处） 性别 病程（月） 年龄（岁） 面积大小（cm2）面颈 胸背 腰腹 四肢 男 女治疗组对照组34 34 6 5 13 15 5 4 10 10 15 17 19 17 13.4±6.2 13.2±6.7 23.6±2.4 24.1±2.8 2.4±0.6 2.3±0.4

1.3.3 治疗方法 治疗组患者使用白藜芦醇软膏，对照组使用美宝疤痕软膏[上海美宝生命科技有限公司产品，批准文号：沪食药监械（准）字2010第2640926号]，均于皮肤瘢痕部位外涂，涂抹后按摩10min，每日早晚各涂一次，30d为1个疗程，连用3个疗程。两组治疗结束后进行疗效判定，并随访6个月。

1.4 疗效观察

1.4.1 瘢痕评分 瘢痕评分采用温哥华瘢痕量表（Vancouver scar scale，VSS）[7]，从色泽、厚度、血管分布和柔软度4个方面综合评估。总分为15分，评分越高表示瘢痕越严重。见表2。

1.4.2 临床疗效判定 依据文献制定临床疗效判定标准。痊愈：瘢痕中≥90%的部分变平、变软，触之无硬节或索状条痕，痒痛感消失，停止治疗6个月后无复发；显效：瘢痕中60%～89%的部分软化、变平，痒痛感明显减轻，停止治疗6个月后无复发；有效：瘢痕中20%～59%的部分软化、变平，痒痛感减轻，停止治疗6个月后无复发；无效：瘢痕无变化，症状无明显改善甚至加重，停止治疗后6个月内出现复发。[8]总显效率（%）=（痊愈例数+显效例数）/总例数×100%。

1.5 统计学分析 应用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析，计量资料以±s表示，治疗前后组内比较采用配对t检验，组间比较采用成组t检验。计数资料组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

表2 VSS评分方法

2 结果

2.1 两组治疗前后VSS评分比较 两组患者治疗前的VSS评分无统计学差异（P＞0.05），分别使用白藜芦醇软膏和美宝疤痕软膏后，两组的VSS评分均低于本组治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后组间比较，治疗组VSS评分低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。治疗组治疗后VSS评分降低（6.73±1.01）分，对照组 VSS评分降低（4.05±0.83）分，治疗组VSS评分降低程度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表3 两组患者治疗前后VSS评分结果（±s，分）

表3 两组患者治疗前后VSS评分结果（±s，分）

注：与同组治疗前比较，*P＜0.05；与对照组治疗后比较，ΔP＜0.05

4.15±0.86*Δ 6.84±1.02*VSS评分治疗前 治疗后治疗组对照组组别 瘢痕数49 47 10.72±1.10 11.03±1.06

2.2 两组临床疗效比较 治疗组治愈瘀痕15处，显效28处，总显效率为87.75%；对照组治愈10处，显效22处，总显效率为68.08%。两组间比较，治疗组总显效率显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表 4。

表4 两组患者临床疗效比较

2.3 不良反应 两组患者治疗过程中均未出现发红、刺痒、起疹、水疱等不良反应。

3 讨论

病理性瘢痕是一种皮肤结缔组织增生性疾病，其主要病理特点是真皮成纤维细胞大量增殖及胶原纤维过度沉积。病理性瘢痕不仅影响美观，甚至可以引起严重的功能障碍，因此对其防治进行深入研究具有重要的意义。目前由于病理性瘢痕的发病机制尚未完全阐明，故其治疗尚未取得突破性进展[9]。目前临床上多采用有创性治疗，如激素局部注射、冷冻、手术等，疗效均不甚理想。手术治疗虽可完全祛除瘢痕，但复发率高，而且术后可能再次形成瘢痕，甚至可能较原先情况更严重；激素局部注射及冷冻治疗，可使瘢痕变软、缩小，但均无法使瘢痕完全消退。因此，通过更深入地揭示病理性瘢痕的发病机制，并寻找一种新的有效防治病理性瘢痕的天然药物具有重要的意义。中医药防治瘢痕有着悠久的历史，许多宝贵的经验与方法值得进一步深入挖掘。本课题组在白藜芦醇防治病理性瘢痕方面进行了一些研究探索，并取得了一些成果。

白藜芦醇是一种来源于虎杖、藜芦、决明等中草药中的多酚类化合物，是植物在受到真菌感染、紫外线照射或在病理状况下所产生的植物防御素。它具有广泛的生物学活性和多种药理作用，如抗氧化、抗炎、改善微循环、保护线粒体功能、抗肿瘤、抑制血小板聚集、调节免疫等[10]。研究证实，白藜芦醇能通过多种途径抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，可用于增生性疾病的治疗[11]。本课题组前期研究证实了白藜芦醇能够抑制病理性瘢痕的成纤维细胞增殖，并诱导其凋亡，其机制与调控病理性瘢痕成纤维细胞转化生长因子-β1（transform growth factor-β1，TGF-β1）/Smads[12]和mTOR信号通路关键分子表达有关[13-14]，这为白藜芦醇防治病理性瘢痕提供了实验依据。

为探讨白藜芦醇治疗病理性瘢痕的疗效，本课题组将其制备成软膏进行了临床研究。由于白藜芦醇对光热均不稳定，因此在白藜芦醇软膏的制备过程中采用包合技术，即采用羟丙基-β-环糊精将白藜芦醇包裹制备成包合物。羟丙基-β-环糊精是一种无臭、无毒、微带甜味、可食用的白色结晶粉末，是一种很好的包合材料。采用羟丙基-β-环糊精将白藜芦醇包裹不仅能提高白藜芦醇的稳定性，增加其溶解性能，还能降低刺激性和毒副作用。然后再把白藜芦醇包合物加入含有冰片的乳化基质中，即得白藜芦醇软膏。因为冰片是较好的渗透促进剂，能促进药物渗透进入皮下从而更好地发挥药理作用，所以白藜芦醇软膏制备过程中加入冰片能够提高临床疗效。本研究结果显示，白藜芦醇软膏能显著降低病理性瘢痕患者的VSS评分，且总显效率达到87.75%，治疗效果优于美宝疤痕软膏。因白藜芦醇软膏为纯中药制剂，在使用过程中未发现任何不良反应，具有安全性高的特点，因此对病理性瘢痕的防治具有独特的优势，不失为一种安全有效的祛瘢产品。